基于莖環(huán)自組裝擴增的電化學生物傳感器高靈敏與高特異檢測DNA
發(fā)布時間:2022-08-23 11:28
DNA(脫氧核糖核酸),是生物體遺傳信息的攜帶者。近年的研究發(fā)現(xiàn),帶有遺傳信息的DNA片段的異常表達與疾病和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關。傳統(tǒng)方法檢測DNA具有操作復雜、成本高、耗時長等局限性。因此,建立一種簡便、靈敏和特異的DNA定量檢測新方法具有十分重要的意義。本課題整合莖環(huán)自組裝擴增技術和酶催化信號放大策略,構建了一種簡單的、等溫的電化學生物傳感器,實現(xiàn)了DNA的高靈敏和高特異檢測:首先,靶DNA通過堿基互補與生物素標記的莖環(huán)H1雜交,打開H1的莖環(huán)結構;隨后,打開的莖環(huán)H1與莖環(huán)H2雜交,將靶DNA置換下來,生成H1-H2復合物;被置換下來的靶DNA促發(fā)下一輪莖環(huán)自組裝擴增反應,生成大量的H1-H2復合物;最后,金電極表面固定的捕獲探針與H1-H2復合物特異性雜交,形成捕獲探針-H1-H2復合物。金電極表面形成的捕獲探針-H1-H2復合物上的生物素與鏈霉親和素標記的堿性磷酸酶結合,催化底物α-萘磷酸鈉鹽產(chǎn)生電化學信號。為減少莖環(huán)之間的非特異性雜交反應,本研究在莖環(huán)的呼吸位點處引入錯配堿基,降低了背景信號。在最優(yōu)條件下,所構建的電化學生物傳感器在25 p M-25 n M范圍內(nèi)...
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
1 實驗部分
2 結果與討論
3 結論
參考文獻
文獻綜述
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間撰寫的文章
本文編號:3677680
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