目的:構(gòu)建高效率低毒性的基因載體是基因治療成功的關(guān)鍵。本研究目的是設(shè)計(jì)一種以“零代聚酰胺-胺”為內(nèi)核、聚谷氨酸接枝小分子PEI為側(cè)鏈的共聚物G0-b-PLG-g-PEI（PGLP）,并且評(píng)估該聚合物作為基因載體的理化性質(zhì)和生物性能。方法:本文通過(guò)三光氣法制得L-谷氨酸-γ-芐酯-N-羧酸酐（BLG-NCA）,以PAMAM G0作引發(fā)劑引發(fā)BLG-NCA發(fā)生開(kāi)環(huán)聚合反應(yīng),制得聚酰胺-胺-b-聚谷氨酸芐酯（G0-b-PBLG）,以PEI 423為氨解劑對(duì)G0-b-PBLG進(jìn)行氨解,制得三嵌段共聚物G0-b-PLG-g-PEI（PGLP）,采用核磁共振氫譜（~1H NMR）對(duì)聚合物PGLP的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。通過(guò)靜電結(jié)合作用制備PGLP/DNA自組裝基因傳遞系統(tǒng),瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)考察PGLP對(duì)DNA的壓縮能力和保護(hù)能力;動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定PGLP/DNA復(fù)合物的粒徑與電位;采用CCK-8試劑盒和溶血實(shí)驗(yàn)評(píng)估聚合物PGLP與PGLP/DNA復(fù)合物的安全性;流式細(xì)胞儀測(cè)定PGLP/DNA復(fù)合物的體外轉(zhuǎn)染能力;共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞對(duì)基因的攝取,以及DNA在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。結(jié)果:~1H NMR圖譜證實(shí)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略圖表
第一章 前言
    1 研究背景
    2 本研究的目的、意義及內(nèi)容
第二章 PGLP的合成與表征
    1 試劑與儀器
    2 試驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與討論
    4 本章小結(jié)
第三章 PGLP/DNA復(fù)合物的制備及性能研究
    1 試劑與儀器
    2 試驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與討論
    4 本章小結(jié)
第四章 PGLP/DNA復(fù)合物的細(xì)胞毒性和生物相容性研究
    1 試劑與儀器
    2 試驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與討論
    4 本章小結(jié)
第五章 PGLP/pEGFP-C3 復(fù)合物的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染研究
    1 試劑與儀器
    2 試驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與討論
    4 本章小結(jié)
全文總結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]GGI/MDR1 siRNA逆轉(zhuǎn)A549/DDP細(xì)胞多藥耐藥的研究[J]. 王子瑞,白鳳,張小英,吳佳敏,郭羚,利智,馮敏.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2017(02)
[2]Membrane immunoglobulin expressed by retroviral vector gene transfer mimics partial function of the B-cell receptor in vivo[J]. Jing Lu,Feng Chen,Zhen Xu,Lingling Zhang,Peng Xu,Depei Liu,Chihchuan Liang.  Science China（Life Sciences）. 2016(01)



本文編號(hào)：3648520