背景:孢子絲菌復(fù)合體是全球分布的雙相真菌,主要包含6個(gè)親緣種,其中球形孢子絲菌、申克孢子絲菌以及巴西孢子絲菌為主要的臨床致病菌。不同的種在地域分布、致病力、傳播途徑等方面均存在一定的差異。孢子絲菌通過(guò)侵襲皮膚、皮下組織及附近淋巴系統(tǒng),導(dǎo)致人類(lèi)和其他動(dòng)物的慢性感染,引起孢子絲菌病,其臨床表現(xiàn)多樣,嚴(yán)重程度不一。孢子絲菌病的臨床診斷主要通過(guò)真菌培養(yǎng)及組織病理學(xué)檢查。目前,一些基于核酸擴(kuò)增技術(shù)的分子生物學(xué)方法逐漸應(yīng)用于孢子絲菌病的診斷,但仍存在耗時(shí)長(zhǎng)、靈敏度低、操作復(fù)雜等缺點(diǎn)。研究表明,孢子絲菌病的發(fā)病率逐年上升,引起眾多研究學(xué)者的關(guān)注。我國(guó)東北地區(qū)是孢子絲菌病的高發(fā)地區(qū),幾乎全部由球形孢子絲菌引起。球形孢子絲菌遺傳差異小,常規(guī)方法難以進(jìn)行種內(nèi)區(qū)分,其群體遺傳結(jié)構(gòu)尚未闡明。為了解析我國(guó)球形孢子絲菌的遺傳多態(tài)性,彌補(bǔ)孢子絲菌臨床快速診斷方面的不足,本研究擬采用具有高分辨能力的微衛(wèi)星長(zhǎng)度多態(tài)性分型技術(shù)對(duì)我國(guó)球形孢子絲菌群體遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,并建立孢子絲菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法,希望為孢子絲菌流行病學(xué)監(jiān)控及快速診斷提供有力的工具。方法:1、球形孢子絲菌群體遺傳學(xué)分析（1）收集來(lái)自中國(guó)不同地區(qū)的球形... 

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PubMed中檢索“孢子絲菌”及“孢子絲菌病”每年發(fā)表文獻(xiàn)數(shù)量與孢子絲菌歷史中的重要發(fā)現(xiàn)

1.1.1 孢子絲菌孢子絲菌在環(huán)境中腐生或者培養(yǎng)溫度為 25℃時(shí)，表現(xiàn)為菌絲相，由 1-2μ的分隔菌絲組成，分生孢子梗從菌絲側(cè)呈銳角長(zhǎng)出。頂端分生孢子成簇分布，呈花朵樣，孢子或圍繞菌絲排列，稱(chēng)“套袖狀菌絲”[11]。暗色的分生孢子是區(qū)分病性孢子絲菌與其他非致病性的孢子絲菌的依據(jù)[9]。在燕麥培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，菌落初期為絲狀且光滑，隨后出現(xiàn)褶皺，初為白色或奶油色[12幾天后變成棕色或黑色，或開(kāi)始即形成暗色菌落[13]。孢子絲菌在人、動(dòng)物組織內(nèi)，或在 35℃營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中，可以形成出芽酵母細(xì)胞，圓或者橢圓形，直徑通常 2-6μm，窄端可延伸，形成雪茄樣出芽細(xì)胞。酵母相菌落表面光滑，呈黃褐色或奶油色[14]。孢子絲菌在 35~37°C 下，生長(zhǎng)明顯受到抑制，40℃時(shí)所有菌株都不生長(zhǎng)[6]。孢子絲菌可以利用葡萄糖、果糖、甘露糖和纖維二糖[15-16]，蔗糖，阿拉伯糖，棉子糖和核糖醇的利用存在一定的種變異性[6,15]。不同的生長(zhǎng)溫度以及糖同化情況是鑒別不同種孢子絲菌的依據(jù)（圖 1.2）[6]。

孢子絲菌基因分型及群體遺傳結(jié)構(gòu)的研究仍有很多未知之處。尤其是對(duì)不同菌株在地域分布、致病力、臨床表型等方面的差異形成的原因，尚未能進(jìn)行較好的闡述。微衛(wèi)星長(zhǎng)度多態(tài)性分型（microsatellite length polymorphism，MLP）作為具有較高分辨率的分子分型方法，廣泛應(yīng)用于念珠菌屬、曲霉屬以及多種地方性真菌病病原菌的鑒定[108]。微衛(wèi)星標(biāo)記（Microsatellite），也稱(chēng)為短串聯(lián)重復(fù)序列（short tandem DNArepeats，STRs）或簡(jiǎn)單重復(fù)序列（simple sequence repeats，SSR），廣泛分布在真核生物基因組中。位于非編碼區(qū)的 STRs，由于受到適應(yīng)性壓力較小，具有較高的可變性，因此更有利于基因分型。不同的 STRs 重復(fù)次數(shù)可達(dá) 5-50 次不等，而不同的重復(fù)單元產(chǎn)生了片段大小長(zhǎng)度不等的等位基因。用標(biāo)記引物進(jìn)行 PCR 后，根據(jù)毛細(xì)管電泳的遷移率計(jì)算擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。由于STRs 比 SNPs 具有更高的突變性及不穩(wěn)定性，與 MLST 相比，MLP 具有更高的多態(tài)性以及分辨力（圖 1.3）[109-112]。因此，將 MLP 應(yīng)用于孢子絲菌基因分型及遺傳多樣性的研究，可能會(huì)有新的發(fā)現(xiàn)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]中國(guó)不同地區(qū)球形孢子絲菌臨床分離株的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析及表型特征研究[D]. 趙莉佩.吉林大學(xué) 2017

碩士論文
[1]新疆申克孢子絲菌PCR-RAPD基因分型研究[D]. 張萍.新疆醫(yī)科大學(xué) 2010
[2]吉林省孢子絲菌病流行病學(xué)調(diào)查分析[D]. 包寶龍.吉林大學(xué) 2008
[3]利用核糖體基因進(jìn)行孢子絲菌種內(nèi)分型及一株播散型孢子絲菌的基因鑒定[D]. 張振穎.大連醫(yī)科大學(xué) 2005



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