目的:探討PI3K/Akt信號通路與肝星狀細胞（HSC）活化的關系及其在放射性肝纖維化中的作用。方法:使用6 MV X射線聯(lián)合PI3K/Akt信號通路特異性抑制劑（Ly294002）處理HSC,分為空白對照組、抑制劑組、10Gy組、10Gy+抑制劑組、20Gy組和20Gy+抑制劑組。MTT法檢測24、48、72、96h后細胞抑制率;流式細胞儀檢測細胞凋亡率、ELISA法檢測TGF-β1濃度、RT-PCR檢測α-SMA、caspase-3、caspase-9的mRNA表達量、Western blot檢測p-Akt的表達量。結果:空白對照組細胞形態(tài)正常,隨著照射劑量的增加細胞形態(tài)改變越明顯,加入抑制劑后細胞形態(tài)改變減輕。MTT法顯示:相同時間,隨著照射劑量的增加抑制率也增加（F=40.421、319.196、128.928、270.5 4,P<0.05）。隨著時間的延長,抑制率也增加。FCM法顯示:與空白對照組相比,10Gy和20Gy組細胞的凋亡率隨照射劑量的增加而增加（t=8.43、11.63,P<0.05）;與10Gy和20Gy組比較,分別加抑制劑后細胞的凋亡率降低（t=8... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照表
摘要
ABSTRACT
前言
內(nèi)容與方法
    1. 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要實驗設備
    2. 細胞培養(yǎng)
        2.1 細胞復蘇
        2.2 細胞換液
        2.3 細胞傳代
        2.4 細胞凍存
        2.5 細胞計數(shù)方法
    3. 實驗分組
    4. 實驗方法
        4.1 照射方法
        4.2 MTT 法檢測各組細胞的抑制率
        4.3 流式細胞術（FCM）檢測各組細胞凋亡率
        4.4 ELISA 法檢測細胞上清液 TGF-β1 的濃度
        4.5 RT-PCR 法檢測α-SMA、caspase-3、caspase-9 m RNA 的表達
        4.6 Western blot 法檢測信號通路關鍵分子 p-Akt 蛋白的表達
    5. 質量控制
    6. 統(tǒng)計方法
    附：技術路線圖
結果
討論
小結
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀碩士學位期間獲得的學術成果
導師評閱表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]靶向結締組織生長因子的siRNA對于肝星狀細胞介導肝纖維化的研究進展[J]. 樊雪強,陳新華,齊曉艷.  中國醫(yī)藥導報. 2012(35)
[2]TGF-β1對大鼠HSC-T6細胞增殖、細胞周期和膠原分泌的影響[J]. 鄭素軍,邢欣悅,韓源平,武聚山,王世美,張瑩,劉梅,陳煜,劉霜,段鐘平.  實用肝臟病雜志. 2012(04)
[3]新疆地區(qū)3602例原發(fā)性肝癌臨床流行病學資料分析[J]. 倪雅瓊,趙化榮,毛睿,張華,溫浩,肖蕾,艾力·吐爾遜,包永星.  中華腫瘤雜志. 2012 (05)
[4]大麻素受體1、FAK mRNA在小鼠肝纖維化形成過程中肝組織中的表達及相互關系[J]. 楊莉,趙召霞,侯軍良,劉玉珍,姜惠卿,戴二黑.  臨床肝膽病雜志. 2011(08)
[5]PI3K/Akt信號通路與肝纖維化[J]. 黃成,李俊,馬陶陶.  中國藥理學通報. 2011(08)
[6]膽汁淤積性肝纖維化大鼠肝組織中PTEN表達與肝星狀細胞凋亡的關系研究[J]. 郝禮森,張曉嵐,周智宏,李玉林,麻繼臣,安君艷,姚冬梅,房澍名,姜慧卿.  解放軍醫(yī)學雜志. 2010(07)
[7]羅格列酮對人肺腺癌A549細胞整合素β1表達的影響[J]. 楊潔,莊英幟,曹建國.  中國藥理學通報. 2007(02)
[8]肝癌放療應采用何種分割劑量?[J]. 曾昭沖.  中華放射腫瘤學雜志. 2006(04)
[9]慢性乙型肝炎患者血清轉化生長因子β1水平與肝臟炎癥程度及纖維化程度的相對獨立關系[J]. 王軍,李勇富.  中國醫(yī)師雜志. 2006(07)
[10]Effects of ribozyme targeting platelet-derived growth factor receptor β subunit gene on the proliferation and apoptosis of hepatic stellate cells in vitro[J]. CHEN Yue-xiang, LU Cui-hua, XIE Wei-fen, ZHANG Xing-rong, ZHANG Zhong-bing, WEI Li-xin, JIN You-xin and GUO Ya-jun Department of Gastroenterology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200003, China International Joint Cancer Reseach Institute, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China State Key Laboratory of Molecular Biology, Shanghai Institute of Biochemistry, Chinese Academy of Science, Shanghai 200031, China.  Chinese Medical Journal. 2005(12)



本文編號：3601817