背景和目的:人白蛋白（human albumin,HA）是人體內濃度最高的血漿蛋白,血漿中濃度為35-55g/L,占總血漿蛋白的50%以上。HA僅在肝臟中合成,正常人以12-25g/d的速率合成。多項研究表明體液中的HA含量的變化與多種疾�。ㄈ缣悄虿　⒛I病、和肝損傷）的發(fā)生、發(fā)展密切相關。因此,精確檢測體液中白蛋白含量在臨床診斷和生物醫(yī)學研究中意義重大。本論文以HA為靶標分子,通過篩選獲得HA特異性熒光探針底物1,3-二氯-7-羥基-9,9-二甲基-2（9H）-吖啶酮甲基聯苯甲酸酯（DDABP）,并建立相應的熒光分析方法,以用于復雜體系中白蛋白的快速檢測。篩選的新型探針分子DDABP及相應的分析方法為探索白蛋白分子的體內功能、代謝規(guī)律及在相關疾病中的作用提供參考。方法:1.利用熒光分析和紫外分光光度法考察探針與白蛋白反應的光譜變化。2.通過表型篩選實驗考查探針的選擇性,測量定量下限值評估探針的靈敏性,小分子離子干擾實驗考察探針的生物穩(wěn)定性。3.基于液相質譜的蛋白質組學方法考察探針的識別機理。4.利用探針構建的熒光分析方法檢測細胞上清和人血漿中白蛋白,并與其它方法比較。5.應用熒光成像技... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

四個探針化合物與多種水解酶和蛋白在磷酸鹽緩沖體系中反應60min后熒光強度變化

圖 3.2 探針 DDABP 與多種血漿蛋白和水解酶反應后熒光強度的變化 熒光探針與 HA 反應的光譜特征探針在 HA 存在條件下光譜的變化如下圖 3.3 所示，探針 DDABP 在緩幾乎無熒光，但在體系中加入 HA 后在 662 nm 處逐漸有熒光產生，且現很好的線性關系。相應的，如圖 3.4 所示探針 DDABP 在 430nm 處有峰，但用 HA 處理后，在 646nm 處出現了一個新的吸收峰。同樣，這的變化也使溶液從黃色變成藍色，暗示探針也作為 HA 的“裸眼”指示

圖 3.2 探針 DDABP 與多種血漿蛋白和水解酶反應后熒光強度的變化3.1.2 熒光探針與 HA 反應的光譜特征探針在 HA 存在條件下光譜的變化如下圖 3.3 所示，探針 DDABP 在緩沖體系中幾乎無熒光，但在體系中加入 HA 后在 662 nm 處逐漸有熒光產生，且與時間呈現很好的線性關系。相應的，如圖 3.4 所示探針 DDABP 在 430nm 處有一個吸收峰，但用 HA 處理后，在 646nm 處出現了一個新的吸收峰。同樣，這種吸收譜的變化也使溶液從黃色變成藍色，暗示探針也作為 HA 的“裸眼”指示劑。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]比較白蛋白與低分子羥乙基淀粉代血漿對自發(fā)性細菌性腹膜炎的作用:一項隨機非盲試點研究[J]. Fernández J.,Monteagudo J.,Bargallo X.,李翔.  世界核心醫(yī)學期刊文摘(胃腸病學分冊). 2006(01)



本文編號：3599262