背景和目的:人白蛋白（human albumin,HA）是人體內(nèi)濃度最高的血漿蛋白,血漿中濃度為35-55g/L,占總血漿蛋白的50%以上。HA僅在肝臟中合成,正常人以12-25g/d的速率合成。多項(xiàng)研究表明體液中的HA含量的變化與多種疾�。ㄈ缣悄虿�、腎病、和肝損傷）的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此,精確檢測(cè)體液中白蛋白含量在臨床診斷和生物醫(yī)學(xué)研究中意義重大。本論文以HA為靶標(biāo)分子,通過篩選獲得HA特異性熒光探針底物1,3-二氯-7-羥基-9,9-二甲基-2（9H）-吖啶酮甲基聯(lián)苯甲酸酯（DDABP）,并建立相應(yīng)的熒光分析方法,以用于復(fù)雜體系中白蛋白的快速檢測(cè)。篩選的新型探針分子DDABP及相應(yīng)的分析方法為探索白蛋白分子的體內(nèi)功能、代謝規(guī)律及在相關(guān)疾病中的作用提供參考。方法:1.利用熒光分析和紫外分光光度法考察探針與白蛋白反應(yīng)的光譜變化。2.通過表型篩選實(shí)驗(yàn)考查探針的選擇性,測(cè)量定量下限值評(píng)估探針的靈敏性,小分子離子干擾實(shí)驗(yàn)考察探針的生物穩(wěn)定性。3.基于液相質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)方法考察探針的識(shí)別機(jī)理。4.利用探針構(gòu)建的熒光分析方法檢測(cè)細(xì)胞上清和人血漿中白蛋白,并與其它方法比較。5.應(yīng)用熒光成像技... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

四個(gè)探針化合物與多種水解酶和蛋白在磷酸鹽緩沖體系中反應(yīng)60min后熒光強(qiáng)度變化

圖 3.2 探針 DDABP 與多種血漿蛋白和水解酶反應(yīng)后熒光強(qiáng)度的變化 熒光探針與 HA 反應(yīng)的光譜特征探針在 HA 存在條件下光譜的變化如下圖 3.3 所示，探針 DDABP 在緩幾乎無熒光，但在體系中加入 HA 后在 662 nm 處逐漸有熒光產(chǎn)生，且現(xiàn)很好的線性關(guān)系。相應(yīng)的，如圖 3.4 所示探針 DDABP 在 430nm 處有峰，但用 HA 處理后，在 646nm 處出現(xiàn)了一個(gè)新的吸收峰。同樣，這的變化也使溶液從黃色變成藍(lán)色，暗示探針也作為 HA 的“裸眼”指示

圖 3.2 探針 DDABP 與多種血漿蛋白和水解酶反應(yīng)后熒光強(qiáng)度的變化3.1.2 熒光探針與 HA 反應(yīng)的光譜特征探針在 HA 存在條件下光譜的變化如下圖 3.3 所示，探針 DDABP 在緩沖體系中幾乎無熒光，但在體系中加入 HA 后在 662 nm 處逐漸有熒光產(chǎn)生，且與時(shí)間呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系。相應(yīng)的，如圖 3.4 所示探針 DDABP 在 430nm 處有一個(gè)吸收峰，但用 HA 處理后，在 646nm 處出現(xiàn)了一個(gè)新的吸收峰。同樣，這種吸收譜的變化也使溶液從黃色變成藍(lán)色，暗示探針也作為 HA 的“裸眼”指示劑。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]比較白蛋白與低分子羥乙基淀粉代血漿對(duì)自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎的作用:一項(xiàng)隨機(jī)非盲試點(diǎn)研究[J]. Fernández J.,Monteagudo J.,Bargallo X.,李翔.  世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè)). 2006(01)



本文編號(hào)：3599262