目的:探討MT2對單核巨噬細(xì)胞極化的調(diào)控作用,揭示MT2調(diào)控炎癥反應(yīng)的可能作用機(jī)制,為闡明MT2對膿毒癥臟器損傷的保護(hù)作用機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:1.膿毒癥動物模型的制備取健康SPF級6-8周齡雌性C57BL野生型小鼠24只（WT）及對應(yīng)MT2敲基因小鼠24只（KO）,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為:對照組、LPS6小時組（LPS6h）、LPS12小時組（LPS12h）、LPS24小時組（LPS24h）,每組均含野生型小鼠及敲基因小鼠各6只。采用腹腔注射脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）10mg/Kg劑量制備膿毒癥小鼠模型,對照組注射等量生理鹽水。2.MT2對膿毒癥小鼠炎癥因子和氧化還原水平的影響分別于LPS染毒后6h、12h、24h 4%水合氯醛（0.15mL/20g）腹腔注射麻醉后心臟取血制備血清,采用ELISA檢測血清中MT2、MDA、SOD、促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6及抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGF-β含量。3.MT2對膿毒癥小鼠臟器損傷及巨噬細(xì)胞極化的作用頸椎脫臼法處死各組小鼠,提取肝臟、肺臟、小腸組織。4%多聚甲醛固定,常規(guī)脫水、脫蠟包埋切片。HE染色觀察... 

【文章來源】：成都醫(yī)學(xué)院四川省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

-1A兩種基因型小鼠血清中MT2的含量；B兩種基因型小鼠肝臟中MT2mRNA表達(dá)量

3.1.3 MT2對膿毒癥小鼠血清炎癥細(xì)胞因子含量的影響通過ELISA法檢測兩種基因型小鼠血清中促炎細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α）及抗炎細(xì)胞因子（IL-10、TGF-β）含量，結(jié)果如圖3-1-2所示。對照組中兩種基因型小鼠血清中IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β含量相近，無顯著差異。經(jīng)LPS處理后兩種基因型小鼠血清中抗炎及促炎細(xì)胞因子含量均明顯增加。其中抗炎細(xì)胞因子隨LPS作用時間延長呈遞增趨勢，同一時間點(diǎn)野生型小鼠與敲基因小鼠相比，野生型小鼠增加更顯著（P＜0.05）。促炎細(xì)胞因子在LPS染毒6h達(dá)到高峰，6h后隨LPS作用時間延長逐漸減少，但在各時間點(diǎn)野生型小鼠均低于敲基因小鼠，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。圖3-1-2 兩種基因型小鼠血清中炎癥細(xì)胞因子含量Fig.3-1-2 The levels of inflammatory cytokines in serum of two genotypic mice注：相同處理后野生型小鼠與敲基因型小鼠比較＊P＜0.05、＊＊P＜0.01、＊＊＊P＜0.0013.1.4 MT2對膿毒癥小鼠血清MDA、SOD含量的影響如圖3-1-3所示，對照組中兩種基因型小鼠，血清中MDA、SOD含量相近，注射LPS后兩種基因型小鼠血清中MDA含量隨作用時間延長均呈遞增趨勢，SOD活性隨作用時間延長呈遞減趨勢；與野生型小鼠相比

16基因小鼠SOD活性降低均較野生型小鼠更顯著，在24h差異顯著。（P＜0.05）。圖3-1-3 兩種基因型小鼠血清中MDA、SOD含量Fig.3-1-3 The levels of MDA、SOD in serum of two genotypic mice注：相同處理后野生型小鼠與敲基因型小鼠比較＊P＜0.05、＊＊P＜0.01、＊＊＊P＜0.0013.1.5 MT2對膿毒癥小鼠各臟器損傷程度的影響如圖3-1-4所示。對照組中兩種基因型小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，形態(tài)規(guī)整，肝索沿中央靜脈向四周呈輻射狀規(guī)則排列，肝竇、匯管區(qū)無炎性細(xì)胞浸潤。LPS染毒后兩種基因小鼠肝細(xì)胞間隙、匯管區(qū)均出現(xiàn)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞出現(xiàn)濁腫、變性壞死，細(xì)胞間隙變窄，中央靜脈血栓形成。上述病理改變隨LPS作用時間延長呈加重趨勢，同一時期敲基因小鼠與野生型小鼠比較，敲基因小鼠病理改變較明顯。圖3-1-4 肝臟HE染色情況Fig.3-4 HE staining of liver

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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