陰道毛滴蟲和白色念珠菌熒光定量PCR方法的建立及應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2022-01-01 00:51
研究目的:1.建立雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法同時(shí)檢測陰道毛滴蟲和白色念珠菌感染,優(yōu)化該檢測方法的反應(yīng)條件,并評估該方法的特異性、敏感性、重復(fù)性等。旨在為臨床提供一種快速并同時(shí)檢測陰道毛滴蟲和白色念珠菌的方法,應(yīng)用于女性陰道炎、尿道炎患者的的臨床診斷。2.收集2016年8月至2017年4月期間,在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科就診者的陰道分泌物標(biāo)本,使用建立好的雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法檢測標(biāo)本陰道毛滴蟲和白色念珠菌感染情況,分析雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法的臨床實(shí)用性。研究方法:1.通過查看文獻(xiàn)獲得目的基因序列,并合成陰道毛滴蟲和白色念珠菌引物、探針的基因序列,初步確定雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法的反應(yīng)體系;通過對反應(yīng)體系中Mg2+濃度和酶的種類進(jìn)行篩選,優(yōu)化該檢測方法的反應(yīng)條件。2.以生殖道常見微生物,包括大腸桿菌、淋病奈瑟氏菌、加德納菌、乳酸桿菌、人型支原體臨床分離株DNA和人基因組DNA為模板,以陰道毛滴蟲(Trichomonas vaginalis,TV)和白色念珠菌(Candida albicans,CA)臨床分離株作為陽性對照,以去離子水作為陰性對照,進(jìn)行...
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同Mg2+濃度的雙重?zé)晒舛縋CR檢測CA、TV陽性質(zhì)粒的平均數(shù)Ct值
圖 2. ACE、HOT 和 T-Taq 聚合酶的雙重?zé)晒舛?PCR 檢測 CA、TV 陽性質(zhì)粒的平均數(shù) Ct 值Fig. 2. The mean Ct value of the double fluorescence quantitative PCR of ACE, HOT andT-Taq polymerase in the detection of CA and TV positive plasmid.
圖 3. 熒光定量 PCR 檢測 CA、TV、其它菌株的擴(kuò)增圖Fig.3. The amplification of CA, TV and other strains detected by PCR. 雙重?zé)晒舛?PCR 方法的檢測限實(shí)驗(yàn)結(jié)果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]新型TaqMan-MGB探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測HCV-RNA方法學(xué)的建立[J]. 喬斌,李艷,汪明,熊格. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(05)
[2]成年女性陰道毛滴蟲感染情況及其影響因素的Logistic回歸分析[J]. 潘繼升,陳軍. 中國性科學(xué). 2017(09)
[3]陰道炎的常見發(fā)病類型及其常見病原體的分布狀況[J]. 彭利群,劉志敏,梁瑞芳. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2017(23)
[4]基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊蟲足樣本DNA提取技術(shù)[J]. 閆振天,司風(fēng)玲,鮮鵬杰,何正波,陳斌. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(05)
[5]Establishment of a Real-time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Genetically Modified Maize Line MON88017[J]. Jun SONG,Dong WANG. Agricultural Biotechnology. 2017(01)
[6]使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR解析嬰兒腸道雙歧桿菌構(gòu)建規(guī)律[J]. 何苗,李鳴,王舒悅,張玲琳,苗俊杰,石磊,余倩,姚建蓉,黃承鈺,何方. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(04)
[7]白色念珠菌ITS2的實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測方法的建立及評價(jià)[J]. 郭毅,楊靖嫻,邵冬華,劉靜,梁國威. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016(07)
[8]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在環(huán)境領(lǐng)域研究探討[J]. 周震宇,顏智勇. 廣州化工. 2016(12)
[9]Bacterial vaginosis:a synthesis of the literature on etiology,prevalence,risk factors,and relationship with chlamydia and gonorrhea infections[J]. Christian T.Bautista,Eyako Wurapa,Warren B.Sateren,Sara Morris,Bruce Hollingsworth,Jose L.Sanchez. Military Medical Research. 2016(02)
[10]女性患者生殖道感染狀況分析[J]. 王小霞,余碧瑜,蘇群志,唐榮德. 廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
本文編號:3561322
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同Mg2+濃度的雙重?zé)晒舛縋CR檢測CA、TV陽性質(zhì)粒的平均數(shù)Ct值
圖 2. ACE、HOT 和 T-Taq 聚合酶的雙重?zé)晒舛?PCR 檢測 CA、TV 陽性質(zhì)粒的平均數(shù) Ct 值Fig. 2. The mean Ct value of the double fluorescence quantitative PCR of ACE, HOT andT-Taq polymerase in the detection of CA and TV positive plasmid.
圖 3. 熒光定量 PCR 檢測 CA、TV、其它菌株的擴(kuò)增圖Fig.3. The amplification of CA, TV and other strains detected by PCR. 雙重?zé)晒舛?PCR 方法的檢測限實(shí)驗(yàn)結(jié)果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]新型TaqMan-MGB探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測HCV-RNA方法學(xué)的建立[J]. 喬斌,李艷,汪明,熊格. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(05)
[2]成年女性陰道毛滴蟲感染情況及其影響因素的Logistic回歸分析[J]. 潘繼升,陳軍. 中國性科學(xué). 2017(09)
[3]陰道炎的常見發(fā)病類型及其常見病原體的分布狀況[J]. 彭利群,劉志敏,梁瑞芳. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2017(23)
[4]基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊蟲足樣本DNA提取技術(shù)[J]. 閆振天,司風(fēng)玲,鮮鵬杰,何正波,陳斌. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(05)
[5]Establishment of a Real-time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Genetically Modified Maize Line MON88017[J]. Jun SONG,Dong WANG. Agricultural Biotechnology. 2017(01)
[6]使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR解析嬰兒腸道雙歧桿菌構(gòu)建規(guī)律[J]. 何苗,李鳴,王舒悅,張玲琳,苗俊杰,石磊,余倩,姚建蓉,黃承鈺,何方. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(04)
[7]白色念珠菌ITS2的實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測方法的建立及評價(jià)[J]. 郭毅,楊靖嫻,邵冬華,劉靜,梁國威. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016(07)
[8]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在環(huán)境領(lǐng)域研究探討[J]. 周震宇,顏智勇. 廣州化工. 2016(12)
[9]Bacterial vaginosis:a synthesis of the literature on etiology,prevalence,risk factors,and relationship with chlamydia and gonorrhea infections[J]. Christian T.Bautista,Eyako Wurapa,Warren B.Sateren,Sara Morris,Bruce Hollingsworth,Jose L.Sanchez. Military Medical Research. 2016(02)
[10]女性患者生殖道感染狀況分析[J]. 王小霞,余碧瑜,蘇群志,唐榮德. 廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
本文編號:3561322
本文鏈接:http://sikaile.net/linchuangyixuelunwen/3561322.html
最近更新
教材專著