一、研究背景、研究目的由于軟骨組織中血管缺乏、自我修復(fù)能力差,關(guān)節(jié)軟骨損傷難以修復(fù)。研究證明,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs）具有多向分化的潛能,是修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的理想種子細(xì)胞。然而,BM-MSCs成軟骨分化能力較低,治療效果仍欠佳。本研究旨在探索BM-MSCs在低氧環(huán)境及超順磁性氧化鐵納米顆粒（Superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs）共同調(diào)節(jié)下對(duì)其生物安全性及對(duì)分化、遷移能力的影響,證明BM-MSCs在內(nèi)外環(huán)境的協(xié)同作用下,可以增強(qiáng)其向成軟骨分化及遷移的能力,為治療關(guān)節(jié)軟骨損傷提供一個(gè)安全、有效的辦法。二、研究方法本研究首先構(gòu)造了SPIONs,并在不同氧濃度下標(biāo)記大鼠來(lái)源的BM-MSCs,實(shí)驗(yàn)分組為常氧未標(biāo)記組、常氧標(biāo)記組、（低氧未標(biāo)記組）、低氧標(biāo)記組。體外通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的表型、周期、凋亡及活性氧情況;通過(guò)Transwell、劃痕、qRT-PCR及Western blot等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其遷移能力;通過(guò)誘導(dǎo)培養(yǎng)、qRT-PCR及Westernblot... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－ｌ．ＳＰ丨ＯＮｓ的理化性質(zhì)

圖３－２．比色法檢測(cè)低氧和常氧的培養(yǎng)條件下孵育不同濃度不同時(shí)間ＢＭ－ＭＳＣｓ內(nèi)攝取鐵??

被ＢＭ－ＭＳＣｓ吞噬后在其細(xì)胞內(nèi)的定位。激光共聚焦圖片提示ＳＰＩＯＮｓ標(biāo)記ＢＭ－??ＭＳＣｓ后，幾乎所有ＢＭ－ＭＳＣｓ均發(fā)出綠光，提示ＳＰＩＯＮｓ標(biāo)記率接近１００％，而??且不同氧濃度條件不影響超順磁性納米氧化鐵顆粒的標(biāo)記率（圖３－３Ａ）。流式細(xì)??胞術(shù)檢測(cè)到不同氧濃度條件下超順磁性納米氧化鐵顆粒的標(biāo)記率均可達(dá)１００％??（圖３－３Ｃ），結(jié)果與免疫熒光結(jié)果相似。透射電鏡結(jié)果則提示超順磁性納米氧化??鐵顆粒被ＢＭ－ＭＳＣｓ吞噬后位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)（圖３－３Ｂ），同時(shí)顯示了不同的氧濃度??并不影響細(xì)胞標(biāo)記率。??Ｕｎｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ?ＳＰＩＯＮｓ?Ｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ?ＳＰＩＯＮｓ?Ｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ??（２０％?０２）?（２０％?０２）?（１％?０２）??Ａ＿＿＿??ｃ??＾２ｂＤ???３００ｊ??３５〇１???芒?２００?、、＇?０．０７％?＾ｌｏｏ?１００％?ｋ?＾２５０?１００％?ｋ??ｊ；：?ｔ?Ａ?Ａ??５０?５０??０?ｉｂ＇?ｉｏ�。保埃�?ｉｏ４￣ｗ?０?ｉ〇＇?ｉｏ！?ｉｏ３?ｉｏ４?ｉｏ５?０?ｉｄ１?ｉｏ＇２?ｉｄ３?ｉｏ＾ｉｏｓ??ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ??圖３－３．檢測(cè)ＢＭ－ＭＳＣｓ的標(biāo)記率。Ａ）激光共聚焦顯示不同氧濃度培養(yǎng)下未標(biāo)記和標(biāo)記組??的ＢＭ－ＭＳＣｓ熒光（比例尺＝１００?ｎｍ），包裹了?Ｆ１ＴＣ的納米晶體為綠色熒光，細(xì)胞核ＤＡＰＩ??染色呈藍(lán)色；Ｂ）透射電鏡顯示不同氧濃度培養(yǎng)下未標(biāo)記和標(biāo)記的ＢＭ－ＭＳＣｓ，黃色箭頭所指??細(xì)胞攝取的納米顆粒


本文編號(hào)：3507090