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基于重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速檢測鮑曼不動桿菌及碳青霉烯類耐藥基因的研究

發(fā)布時間:2021-10-29 01:36
  目的:1.建立重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(Recombinase Polymerase Amplification RPA)15ul反應(yīng)體系(本文中簡稱RPA-15ul反應(yīng)體系)快速檢測鮑曼不動桿菌的實時熒光檢測方法,并同時進(jìn)一步檢測臨床分離株,以評估該方法的臨床實用性。2.選擇鮑曼不動桿菌耐碳青霉烯類耐藥基因中檢出率最高的blaOXA-23基因作為檢測目的基因,建立實時熒光重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)15ul反應(yīng)體系快速檢測耐藥基因的方法,以期檢測細(xì)菌的同時完成耐藥基因的測定,指導(dǎo)臨床快速選擇敏感抗生素。方法:1.分別根據(jù)鮑曼不動桿菌的鑒定基因blaOXA-51與16s-23s rRNA ITS基因的特異保守序列按照TwsitDX Inc公司提供的RPA引物與探針的設(shè)計原則設(shè)計一系列引物與探針,通過引物篩選,各選擇一套最優(yōu)的引物與探針分別進(jìn)行特異性與靈敏性評價。以銅綠假單胞菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌四種非鮑曼不動桿菌作為陰性對照菌,采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction PCR)、實時熒光定量PCR(Real... 

【文章來源】:西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:99 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 鮑曼不動桿菌概述
    1.2 鮑曼不動桿菌耐藥機(jī)制概述
    1.3 病原菌及耐藥性檢測方法概述
    1.4 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)概述
第二章 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速鑒定鮑曼不動桿菌
    第一部分 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)基于blaOXA-51基因鑒定鮑曼不動桿菌
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
    第二部分 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)基于16s-23s r RNA ITS基因鑒定鮑曼不動桿菌
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
第三章 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速檢測碳青霉烯類耐藥基因
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)的研究進(jìn)展(綜述)
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]應(yīng)用直接重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速檢測煙曲霉菌[J]. 王秋平,黃恩奇,楊銀梅,鐘志敏,陳斌.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2018(24)
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本文編號:3463710

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