目的:1.建立重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（Recombinase Polymerase Amplification RPA）15ul反應(yīng)體系（本文中簡稱RPA-15ul反應(yīng)體系）快速檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌的實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)方法,并同時(shí)進(jìn)一步檢測(cè)臨床分離株,以評(píng)估該方法的臨床實(shí)用性。2.選擇鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類耐藥基因中檢出率最高的bla_OXA-23基因作為檢測(cè)目的基因,建立實(shí)時(shí)熒光重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)15ul反應(yīng)體系快速檢測(cè)耐藥基因的方法,以期檢測(cè)細(xì)菌的同時(shí)完成耐藥基因的測(cè)定,指導(dǎo)臨床快速選擇敏感抗生素。方法:1.分別根據(jù)鮑曼不動(dòng)桿菌的鑒定基因bla_OXA-51與16s-23s rRNA ITS基因的特異保守序列按照TwsitDX Inc公司提供的RPA引物與探針的設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)一系列引物與探針,通過引物篩選,各選擇一套最優(yōu)的引物與探針分別進(jìn)行特異性與靈敏性評(píng)價(jià)。以銅綠假單胞菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌四種非鮑曼不動(dòng)桿菌作為陰性對(duì)照菌,采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction PCR）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 鮑曼不動(dòng)桿菌概述
    1.2 鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥機(jī)制概述
    1.3 病原菌及耐藥性檢測(cè)方法概述
    1.4 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)概述
第二章 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速鑒定鮑曼不動(dòng)桿菌
    第一部分 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)基于blaOXA-51基因鑒定鮑曼不動(dòng)桿菌
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
    第二部分 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)基于16s-23s r RNA ITS基因鑒定鮑曼不動(dòng)桿菌
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
第三章 重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)快速檢測(cè)碳青霉烯類耐藥基因
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)的研究進(jìn)展(綜述)
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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