目的研究Nrf2基因敲除對C57BL/6J小鼠放射性腸損傷的作用,并初步闡明Nrf2和NF-κB在放射性腸損傷中的作用機制。方法本研究采用13 Gy 137Cs γ射線腹部照射野生型和Nrf2基因敲除型C57BL/6J小鼠,建立放射性腸損傷模型;觀察小鼠照射后30天存活率,并記錄體重變化;測定小鼠的脾臟和胸腺等免疫器官指數和外周血細胞數量;通過堿性“彗星”實驗檢測外周血淋巴細胞DNA斷裂損傷程度;通過HE染色和TUNEL染色免疫熒光實驗檢測小腸上皮完整性;采用免疫組織化學實驗檢測小腸組織Lgr5+干細胞及其子細胞的數量;采用免疫組織化學實驗、蛋白免疫印跡實驗和實時定量PCR法檢測小腸組織部位NF-κBp65在細胞核內的磷酸化水平和NF-κB下游靶基因的表達水平。結果（1）存活率:與野生型小鼠相比,Nrf2基因敲除型小鼠腹部照射后30天存活率升高,全身照射后30天存活率降低。（2）免疫功能:腹部照射后Nrf2基因敲除型小鼠的胸腺指數和外周血淋巴細胞數高于野生型小鼠;Nrf2基因敲除型小鼠的外周血淋巴細胞DNA損傷程度輕于野生型小鼠。（3）小腸組織腸上皮完整性:腹部照射后野生型小鼠小腸組織... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?Ａ＾／２基因敲除后受照射小鼠的３０天存活率??Ａ．?基因敲除后腹部照射小鼠的３０天存活率??

??數及脾指數的變化。如圖２Ａ所示，基因敲除型小鼠和野生型小鼠在照射后各個??時間點的脾指數均無明顯差異。野生型小鼠的胸腺指數在照射后２ｄ內持續(xù)下降，在??照射后３．５?ｄ之后趨于平穩(wěn)；ｉＶ％基因敲除型小鼠的胸腺指數在照射后第Ｉｄ下降，在??照射后２ｄ以后趨于平穩(wěn)；基因敲除型小鼠的胸腺指數在照射后２ｄ、３．５?ｄ、４?ｄ??和５?ｄ各時間點明顯高于野生型小鼠（圖２Ｂ）。結果表明，基因敲除減輕了由腹??部照射引起的小鼠胸腺免疫器官的損傷。??Ａ?Ｂ??Ｉｆ５］?＊ＮｒｆＺ＾－?§?｜３ｎ?＊Ｎｒｆ２：＇??１?１?％?？?〇?１?＼?？?Ｎｒｆ２＾＋??Ｉ：??Ｓｔ，?ｉｌ１－??ｗ?－?〇Ｊ?????????？?＾?ＩＪ?．?，?，?，?

圖３?７Ｖ＾／２基因敲除后腹部照射小鼠外周血細胞的數量??Ａ．�；蚯贸蟾共空丈湫∈蟮陌准毎麛�??Ｂ．Ａ＾／２基因敲除后腹部照射小鼠的血小板數??Ｃ．?Ａ／（／２基因敲除后腹部照射小鼠的淋巴細胞百分數??注：＊＊＊Ｐ＜０．００１，Ａ＾／２基因敲除型小鼠ｖｓ野生型小鼠。??３．?ＴＶｒ／２基因敲除對腹部照射后小鼠外周血淋巴細胞ＤＮＡ損傷的影響??電離輻射可誘發(fā)ＤＮＡ發(fā)生單鏈斷裂和雙鏈斷裂。“彗星”實驗，又稱單細胞凝??膠電泳，是在單個細胞水平上有效檢測ＤＮＡ斷裂損傷程度的方法［３８－３９］。受到損傷??的細胞呈“彗星狀”拖尾，拖尾越嚴重表示ＤＮＡ發(fā)生的斷裂越嚴重�！板缧恰蔽膊�??ＤＮＡ含量、尾矩和Ｏｌｉｖｅ尾矩代表細胞發(fā)生ＤＮＡ斷裂的程度。本實驗觀察了小鼠在??接受１３?Ｇｙ腹部照射后小鼠外周血淋巴細胞ＤＮＡ的損傷。如圖４Ａ所示，腹部照射后??小鼠淋巴細胞均發(fā)生“彗星狀”拖尾，表明淋巴細胞ＤＮＡ受到損傷，野生型小鼠淋??巴細胞核ＤＮＡ的“彗星狀”拖尾較Ａ／設基因敲除型小鼠嚴重。野生型小鼠的尾部ＤＮＡ??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]慢性放射性腸炎并腸梗阻的腹腔鏡手術治療[J]. 王劍,李幼生,姚丹華,王薌端,申培培,黎介壽.  中華腔鏡外科雜志(電子版). 2013(01)
[3]Gastrointestinal radiation injury:Prevention and treatment[J]. Abobakr K Shadad,Frank J Sullivan,Joseph D Martin,Laurence J Egan.  World Journal of Gastroenterology. 2013(02)
[4]放射性腸損傷發(fā)病機制研究進展[J]. 李明,曹建平,張學光.  中華放射醫(yī)學與防護雜志. 2012 (04)
[5]營養(yǎng)支持在克羅恩病治療中的效果觀察[J]. 左小霞,王晶,張曄.  人民軍醫(yī). 2010(11)
[6]Significance of endothelial dysfunction in the pathogenesis of early and delayed radiation enteropathy[J]. Marjan Boerma,Martin Hauer-Jensen.  World Journal of Gastroenterology. 2007(22)



本文編號：3414286