第一部分:CAPE通過p38 MAPK/NF-κB通路抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化緩解神經(jīng)病理性疼痛目的:觀察咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）對(duì)慢性坐骨神經(jīng)縮窄性損傷（chronic constrictive injury,CCI）小鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞中p38MAPK/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、細(xì)胞活化和下游炎癥因子的影響,研究CAPE緩解神經(jīng)病理性疼痛的可能作用機(jī)制,為臨床的合理應(yīng)用提供依據(jù)。方法:選取雄性CD-1小鼠,6-8周齡,體重18-22g,采用CCI方法制備小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型,通過疼痛行為學(xué)評(píng)估指標(biāo)—小鼠機(jī)械性縮足反射閾值,觀察CAPE對(duì)小鼠神經(jīng)病理性疼痛行為學(xué)的影響;采用免疫印跡和免疫熒光法檢測(cè)CAPE對(duì)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化程度的影響;采用免疫印跡法檢測(cè)CAPE對(duì)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞中p38 MAPK及NF-κB p65的影響;采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)CAPE對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)促炎性細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果:CCI可誘導(dǎo)小鼠機(jī)械性縮足反射閾值的下降,上調(diào)脊髓中p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

不同劑量CAPE對(duì)CCI小鼠機(jī)械性縮足反射閾值的影響

圖 2 CAPE 抑制 CCI 小鼠脊髓中小膠質(zhì)細(xì)胞激活注：圖 2A 和圖 2B：腹腔內(nèi)注射 CAPE（25mg/kg）對(duì)小鼠脊髓中小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物 IBA-1表達(dá)水平的影響。圖 2C 和圖 2D：免疫熒光實(shí)驗(yàn)提示各組小鼠脊髓中小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物IBA-1 的表達(dá)情況。免疫熒光的定量表示為脊髓中的平均熒光像素。CCI+CAPE（25mg/kg）組在 CCI 術(shù)后第 15 天至第 21 天每天連續(xù)腹腔內(nèi)注射 CAPE（25mg/kg），最后一次給藥 60分鐘后收集腰椎（L1-L6）脊髓組織進(jìn)行分析，每組 4 例。與 sham 組比較，**P<0.01；與CCI 組比較，##P<0.01。3.CAPE 抑制 CCI 小鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞中 p38 MAPK 和 NF-κB p65 磷酸化研究表明小膠質(zhì)細(xì)胞中的 p38 MAPK 和 NF-κB p65 在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著重要作用，在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生和維持中也起著重要作用。因此，我們選用免疫印跡的實(shí)驗(yàn)方法，觀察 CAPE（25mg/kg）在 CCI 模型對(duì)脊髓中 p38 MAPK 的作用。研究結(jié)果如圖 3A 所示，與 sham 組比較，CCI 組小鼠脊髓中 p38 MAPK 磷酸化水平顯著升高，而連續(xù)給予 CAPE

南京醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文（25mg/kg）后顯著降低了 CCI 小鼠脊髓中 p38 MAPK 磷酸化水平。隨后觀察 CAPE 對(duì)小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化的影響。研究結(jié)果如圖3B 所示，與 sham 組比較，CCI 組小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化水平升高，而 CAPE 則降低了 CCI 小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化水平。此外，CAPE 單獨(dú)給藥對(duì) sham 組小鼠脊髓中 p38 MAPK 和 NF-κB p65 的含量水平及其磷酸化水平?jīng)]有明顯影響。


本文編號(hào)：3406749