大腸桿菌在自然界中分布廣泛,主要分為非致病及致病型大腸桿菌。典型的致病型大腸桿菌為Escherichia coli O157:H7,一旦感染了此菌,可對(duì)人們?cè)斐蓢?yán)重危害。傳統(tǒng)大腸桿菌檢測(cè)方法,存在檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、所需儀器復(fù)雜、對(duì)檢測(cè)人員要求高,成本高。因此,建立大腸桿菌的新型快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法具有重要意義。近年來(lái),由于分子生物學(xué)的高速發(fā)展,帶動(dòng)了新型病原菌檢測(cè)方法的革新,為其提供了更多方便快捷、靈敏特異的檢測(cè)手段。其中顯色及試紙條作為生物監(jiān)測(cè)領(lǐng)域常見(jiàn)的信號(hào)輸出方式,具有裸眼可視、方便讀取等諸多優(yōu)點(diǎn)。因此,本研究基于免疫層析試紙條及顯色反應(yīng),結(jié)合不同分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù),成功建立了以下方法:（1）基于雙鏈特異性核酸酶及雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)合免疫層析試紙條用于大腸桿菌的可視化檢測(cè)本研究基于雙鏈特異性核酸酶（Duplex Specific Nuclease,DSN）及雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Hybridization Chain Reaction,HCR）,成功建立了一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏特異的新型大腸桿菌檢測(cè)方法。檢測(cè)原理為,利用DSN酶的只切DNA-RNA雙鏈核酸中的DNA鏈,保留RNA鏈的特性,反復(fù)利用檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鏈置換反應(yīng)結(jié)合電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)方法原理圖

1-1 鏈置換反應(yīng)結(jié)合電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)方法原理圖gram of chain displacement reaction combined withdetection method光法的檢測(cè)方法n 等人運(yùn)用鏈置換技術(shù)結(jié)合熒光法，成功檢測(cè)了特異性較好[38]。原理如圖 1-2 所示，a 作為檢測(cè)會(huì)成功的被靶標(biāo)核酸打開(kāi)，被打開(kāi)的短鏈核酸會(huì)的探針結(jié)合，導(dǎo)致熒光基團(tuán)的猝滅，發(fā)生信號(hào)的測(cè)靶標(biāo)核酸。

1-3 鏈置換反應(yīng)結(jié)合色度法的檢測(cè)原理圖[am of chain displacement reaction combined w的優(yōu)勢(shì)理為：利用人工設(shè)計(jì)的核酸引物間的競(jìng)爭(zhēng)能酸片段被競(jìng)爭(zhēng)能力相對(duì)較強(qiáng)的核酸片段被替酸反應(yīng)相比，鏈置換反應(yīng)可將 RNA 信號(hào)直程，達(dá)到信號(hào)傳遞的作用。同時(shí)，鏈置換反如此多的優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)，已被不同領(lǐng)域所應(yīng)。ybridization Chain Reaction, HCR）技術(shù)的應(yīng)bridization Chain Reaction，HCR）是 Dirks常溫即可進(jìn)行，無(wú)需傳統(tǒng) PCR 的變溫過(guò)程

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Simultaneous Detection of 13 Key Bacterial Respiratory Pathogens by Combination of Multiplex PCR and Capillary Electrophoresis[J]. JIANG Lu Xi,REN Hong Yu,ZHOU Hai Jian,ZHAO Si Hong,HOU Bo Yan,YAN Jian Ping,QIN Tian,CHEN Yu.  Biomedical and Environmental Sciences. 2017(08)
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本文編號(hào)：3377103