目的 建立一種液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）方法檢測(cè)人體血清和尿液中醛固酮（Aldosterone,ALD）的方法并對(duì)基于不同方法學(xué)的ALD檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)及比較。方法 方法學(xué)建立及評(píng)價(jià)。血清以及酸解后尿樣本用硫酸鋅除蛋白,離心取上清,使用陰離子固相柱萃取,收集洗脫液,上機(jī)檢測(cè)。以氘代同位素為內(nèi)標(biāo)。在負(fù)離子模式下,經(jīng)電噴霧電離,多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下檢測(cè)血清或尿液中的ALD,以標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)ALD進(jìn)行定量。評(píng)價(jià)ALD的同分異構(gòu)體潑尼松龍、可的松的干擾,對(duì)不同ALD濃度水平的血清、尿液及伯樂(lè)質(zhì)控連續(xù)5天進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),每個(gè)水平每天重復(fù)測(cè)定四次,考察方法的精密度。同時(shí)評(píng)價(jià)方法的檢測(cè)限、回收率及血尿ALD樣本的穩(wěn)定性。比較血清血漿樣本ALD的濃度。檢測(cè)80例患者尿液和血清中ALD的含量,評(píng)估血尿ALD的相關(guān)性。通過(guò)分析ALD與肌酐、尿素、胱抑素C及eGFR的相關(guān)性探討ALD與腎功能的關(guān)系。收集2017年8月份在北京協(xié)和醫(yī)院申請(qǐng)ALD檢測(cè)（放射免疫法,RIA）的261例患者剩余血清,同時(shí)應(yīng)用本研究建立的LC-MS/MS方法和Diasorin、IDS以及安圖生物（分別以B、C、D代... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１醛固酮的合成途徑??

圖３－１?ＡＬＤ的二級(jí)碎片離子峰??同時(shí)嘗試在ＥＳＩ正離子模式下對(duì)相同濃度的ＡＬＤ進(jìn)行質(zhì)譜條件優(yōu)化，結(jié)果發(fā)??現(xiàn)ＡＬＤ在ＥＳＩ正離子模式下基質(zhì)干擾較大（見(jiàn)圖３－２），在相同濃度相同出峰時(shí)間??處，ＥＳＩ正離子模式下的信噪比為８０４，而ＥＳＩ負(fù)離子模式下信噪比為２１３．０２，因??此最終選用ＥＳＩ負(fù)離子模式。??１８??

３．２尿液ＡＬＤ?ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法建立過(guò)程??３．２．１尿液樣本的酸解及酸解條件的摸索??ＡＬＤ以結(jié)合形式的１８葡萄糖醛酸醛固酮（分子結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖３－３，??ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｃｈｅｍｉｃａｌｂｏｏｋ．ｃｏｍ）隨尿排出，在酸性環(huán)境下，與１８－葡萄糖醛酸結(jié)合的??ＡＬＤ能分離開(kāi)，因此測(cè)定尿ＡＬＤ必須先經(jīng)過(guò)酸解的步驟。本研宄從酸解溫度、鹽??酸濃度及酸解時(shí)間３方面考察酸解的最佳條件。根據(jù)酸解溫度將樣本分為室溫（約??２〇°Ｃ）酸解組和３７°Ｃ酸解組。�。担啊玻矗枘驑颖炯尤氚财势�，分別加入２５〇ｙ?０．２Ｍ、??０．４Ｍ、０．６Ｍ及０．８Ｍ的鹽酸溶液，震蕩混勻密封后置于室溫及３７°Ｃ溫箱進(jìn)行孵育??酸解，觀察室溫條件下酸解?２ｈ、４ｈ、６ｈ、１６ｈ、２４ｈ、３０ｈ、４０ｈ、４８ｈ、５４ｈ、６４ｈ、??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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