放射性腦損傷（Radiation brain injury,RBI）指頭頸部惡性腫瘤放療后一種嚴(yán)重的并發(fā)癥,目前尚缺乏有效的治療方法。海帶多糖（Laminaria japonica polysaccharides,LJP）是海帶中分離提取的生物活性多糖,具有提高免疫力、抗腫瘤、防輻射等作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)LJP能改善RBI的記憶功能障礙,然而其機制尚未清楚。鑒于此,本項目通過體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞、腦血管內(nèi)皮細(xì)胞,建立放射損傷的神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞模型,從細(xì)胞和分子水平觀察LJP對放射損傷的神經(jīng)細(xì)胞和腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響,揭示LJP在放射誘導(dǎo)腦損傷中的作用機制。1.第一部分:SD乳鼠神經(jīng)細(xì)胞、腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離、原代培養(yǎng)和鑒定清潔級12h內(nèi)新生的SD乳鼠,取腦皮質(zhì),分離和培養(yǎng)皮質(zhì)中的神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,在倒置顯微鏡下觀察不同培養(yǎng)時間的細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量變化,體外培養(yǎng)至細(xì)胞成熟后利用NSE、GFAP、vWF抗體分別標(biāo)記神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及腦血管內(nèi)皮細(xì)胞,進行免疫熒光染色鑒定,結(jié)果表明:（1）神經(jīng)元細(xì)胞:培養(yǎng)4-5 h,大部分細(xì)胞貼壁,胞體呈圓形,少數(shù)細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)小的突... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元細(xì)胞生長的情況

神經(jīng)元細(xì)胞的評估鑒定，NSE 細(xì)胞免疫熒光染色（2 Assessment of neurons, immunofluorescence stainin細(xì)胞的原代培養(yǎng)較好的折光性，貼壁情況良好，部分細(xì)第 2d 顯微鏡下觀察無法貼壁的死亡細(xì)多數(shù)膠質(zhì)細(xì)胞開始長出了細(xì)小的胞突大部分細(xì)胞呈多角形，偽足變大、增多細(xì)胞間的邊緣難以辨認(rèn)。傳代的神經(jīng)膠凈，均勻貼壁，生長良好。

圖 1-3 皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生長情況。A.接種 24h 換液后;B.接種第 3d;C.接種第 5d;D.接種第胞狀態(tài);E 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞傳代第 1dFig.1- 3 Growth of cortical glial cells.A. inoculation of 24h after inoculation; B. Inoculation of Inoculation of 5d; D. inoculation of the cell state of 7d; E neuroglial cells were transferred to 1d.

【參考文獻】：
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博士論文
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碩士論文
[1]三株不同海洋環(huán)境來源微生物胞外多糖的結(jié)構(gòu)研究[D]. 陳成龍.中國海洋大學(xué) 2015



本文編號：3348535