目的:銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）是一種革蘭陰性非發(fā)酵菌,是臨床常見的條件致病菌,可以引起呼吸道、泌尿道、皮膚、腹腔和血液等多個(gè)部位的感染。且PA在抗生素的影響下可以通過突變等機(jī)制產(chǎn)生獲得性耐藥,使臨床治療面臨極大的困境。而質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥基因水平轉(zhuǎn)移是PA產(chǎn)生耐藥性的重要機(jī)制。細(xì)菌在生長過程中向周圍釋放特定的信號(hào)分子,以感知菌群密度變化,當(dāng)信號(hào)分子隨著細(xì)菌密度增加而積累到一定濃度,達(dá)到特定閾值時(shí),信號(hào)分子會(huì)與受體蛋白相結(jié)合,使受體蛋白構(gòu)象或基團(tuán)發(fā)生變化,啟動(dòng)一系列基因表達(dá),進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)菌的群體行為,這種現(xiàn)象被稱為群體感應(yīng)（Quorum sensing,QS）。在革蘭陰性桿菌中存在以�；呓z氨酸內(nèi)酯（acyl homoserine lactone,AHL）類物質(zhì)作為信號(hào)分子的QS系統(tǒng),AHL可以與細(xì)菌的LuxR類蛋白受體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)下游一系列基因的調(diào)控。有些細(xì)菌例如大腸埃希菌、霍亂弧菌等基因組內(nèi)不含有QS系統(tǒng),不能產(chǎn)生AHL類信號(hào)分子,但是卻表達(dá)LuxR類蛋白同源分子—SdiA蛋白,可以與周圍環(huán)境中的AHL結(jié)合,同時(shí)SdiA也是轉(zhuǎn)錄因子,可以通過Sdi... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

平板篩選法檢測接合反應(yīng)模型示意圖

抗生素作用下群體感應(yīng)系統(tǒng)及其相關(guān) sRNA 對(duì)接合的調(diào)控研究 檢驗(yàn)分析只有兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的組間差異的顯著性，采用單因素的方差分析檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組的組間差異的顯著性。所有統(tǒng)計(jì)分析具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的檢驗(yàn)標(biāo)05。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.3.1 藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果四株菌的藥敏結(jié)果見圖 1-2，Gm 對(duì) PAO1、PAO1ΔlasI、PAO1ΔrhlI 最低抑為 2μg/mL（三株菌結(jié)果相同，圖 1-2 只顯示 PAO1 的藥敏結(jié)果），Gm 對(duì) EC6菌濃度為 4μg/mL（肉眼觀察的結(jié)果與酶標(biāo)儀測量的結(jié)果一致）。根據(jù) 2017 年，四株菌均為 Gm 敏感株。

圖 1-2 受體菌 Gm 藥敏結(jié)果.3.2 抗生素干預(yù)濃度確定及其對(duì)接合效率的影響不同濃度抗生素的干預(yù)下 PAO1、EC600 生長情況見圖 1-3。可以看到將 Gm 的.125μg/mL 提高至 0.25μg/mL 時(shí) PAO1 的濃度呈斷崖式下降，而當(dāng) Gm 的濃μg/mL 提高至 2μg/mL 時(shí) EC600 的濃度亦呈斷崖式下降。本次接合實(shí)驗(yàn)是為外界的抗生素的對(duì)受體菌形成生存壓力時(shí)，是否會(huì)對(duì)接合效率產(chǎn)生影響。因選擇能抑制大部分 PAO1 生長的 Gm 濃度即 0.3μg/mL，作為 SM10λπ-PAO1πΔsdiA-PAO1 接合體系中實(shí)驗(yàn)組的抗生素干預(yù)濃度，選擇能抑制大部分受00 生長的 Gm 濃度即 2μg/mL，作為 SM10λπ-EC6OO 接合體系中實(shí)驗(yàn)組的抗?jié)舛取?


本文編號(hào)：3345682