研究目的:本研究利用腎盂內(nèi)高壓致膿毒性休克動物（兔）模型,以蛋白質(zhì)組學及質(zhì)譜技術(shù)分離和鑒定膿毒性休克動物模型血液中差異表達的蛋白質(zhì),研究差異蛋白質(zhì)與早期膿毒性休克的關(guān)系。動物模型結(jié)合臨床樣本篩選早期診斷尿源性膿毒癥的新指標。研究方法:1.10只雌性新西蘭兔隨機分成對照組和實驗組,兩組均結(jié)扎一側(cè)輸尿管上段,實驗組及對照組均按2ml/kg劑量分別向腎盂注射9.0 ×108cfu/ml濃度標準大腸桿菌和生理鹽水,隨后監(jiān)護心率、血壓,兔腎盂內(nèi)高壓致膿毒性休克模型及對照組模型建立。2.術(shù)后2h、4h、6h時間點于股動脈或兔耳正中動脈抽血（血量統(tǒng)一）,注入等容量生理鹽水+肝素。離心后,取上清液保存。血上清液標本隨后進行分組蛋白質(zhì)組學實驗。實驗結(jié)束處死兔子,將其肝、肺、腎組織進行病理學檢查。3.將血清樣品低豐度蛋白進行富集、洗脫,再將洗脫的蛋白質(zhì)用胰酶消化成肽段。然后使用三組11-plex TMT穩(wěn)定同重同位素標記來標記所有樣品,標記后,將每個11plex組中的肽混合物合并,分離肽段,收集的肽段合并為10個餾分,完全干燥后,將得到的肽段在納升液相系統(tǒng)進行分離。最后采用質(zhì)譜檢測技術(shù)進行鑒定,采集的RA... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．３：分離右側(cè)左側(cè)股動脈

過前期充分的預實驗，該法可引起明顯腎盂內(nèi)高壓并使動物出現(xiàn)膿毒性休克。??＾?；?Ｐ??圖２．１：新西蘭兔稱重圖２．２：麻醉成功后，固定至手術(shù)臺??圖２．３：分離右側(cè)左側(cè)股動脈。圖２．４：留置股動脈穿刺針。??６??

義?Ｍｉ?１??圖２．５：縫合固定股動脈留置針，備用。圖２．６：也可穿刺兔耳中動脈進行監(jiān)護。??Ｌ?薩０??圖２．７：分離右腎及右輸尿管，予結(jié)扎右輸尿管。圖２．８：腎盂內(nèi)注射實驗濃度細菌。??｜，鐘??Ｃ，?：ｉ?ｍ－ｌｌ??圖２．９：縫合右側(cè)腹部切口。圖２．１０：生理監(jiān)護儀進行監(jiān)護。??７??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3294730