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基于核酸分子機(jī)器編碼的探針用于病原菌檢測

發(fā)布時間:2021-07-08 09:20
  病原菌是病原微生物的一種,存在與于人體、水、食以及空氣等中的病原菌能夠引起多種疾病的爆發(fā),它會誘發(fā)人體感染細(xì)菌并因此產(chǎn)生嚴(yán)重的病癥,例如敗血癥等,嚴(yán)重的威脅到了人的生命。傳統(tǒng)的病原菌檢測方法在靈敏度、特異性、檢測速度、耗費(fèi)、以及細(xì)菌高通量檢測分析方面都有一定的局限性。因此亟需發(fā)現(xiàn)新型靈敏度好,特異性高,易于操作,高通量的細(xì)菌檢測技術(shù)。為此,我們利用核酸分子機(jī)器編碼的納米探針成功開發(fā)了三種病原菌的檢測方法,這些方法無論在檢測效率、通量上都優(yōu)于傳統(tǒng)的病原菌檢測方法。首先我們設(shè)計了一種基于核酸分子機(jī)器的熒光探針,當(dāng)加入待測細(xì)菌后,會觸發(fā)核酸分子機(jī)器運(yùn)動,在核酸分子的驅(qū)動下,熒光探針表面的熒光素會逐步從納米材料表面脫落下來,游離在待測溶液中,使得待測溶液的整體熒光強(qiáng)度增強(qiáng),通過測定待測溶液反應(yīng)前后的熒光強(qiáng)度變化,可超靈敏的實(shí)現(xiàn)單細(xì)菌檢測,該方法檢測靈敏度高,整體檢測時間小于六小時。其次為了進(jìn)一步提高核酸分子機(jī)器的作用效率,降低檢測成本,我們進(jìn)一步設(shè)計了一種雙核酸分子機(jī)器檢測系統(tǒng),當(dāng)加入病原菌后,會觸發(fā)雙核酸分子機(jī)器運(yùn)動,通過比色法比較輸出信號的變化,可靈敏的實(shí)現(xiàn)溶液中病原菌檢測,特異性好,由于... 

【文章來源】:華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 傳統(tǒng)細(xì)菌檢測方法
    1.2 生物傳感技術(shù)
    1.3 生物傳感器的應(yīng)用
        1.3.1 在食品加工、監(jiān)控、質(zhì)量和安全方面的應(yīng)用
        1.3.2 在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.3 環(huán)境分析方面的應(yīng)用
    1.4 Aptamer生物傳感技術(shù)
    1.5 液滴微流控及其應(yīng)用
        1.5.1 液滴微流控概述
        1.5.2 液滴微流控的應(yīng)用
    1.6 研究意義及主要研究內(nèi)容
        1.6.1 研究目的及意義
        1.6.2 主要研究內(nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第二章 基于核酸分子機(jī)器的超靈敏耐藥細(xì)菌檢測
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 基于核酸分子機(jī)器編碼的熒光探針用于耐藥細(xì)菌的檢測原理
        2.3.2 基于核酸分子機(jī)器編碼的熒光探針性能研究
        2.3.3 基于核酸分子機(jī)器的熒光探針用于病原菌特異性研究
        2.3.4 基于核酸分子機(jī)器的熒光探針用于病原菌靈敏度研究
        2.3.5 基于核酸分子機(jī)器的熒光探針用于人工樣品中病原菌特異性研究
    2.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于病原菌檢測
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 儀器與試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于病原菌檢測原理
        3.3.2 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于病原菌檢測可行性驗(yàn)證
        3.3.3 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于病原菌特異性研究
        3.3.4 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于病原菌靈敏度研究
        3.3.5 基于核酸分子機(jī)器的比色法用于人工模擬樣品中的病原菌檢測
    3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 隨機(jī)核酸分子機(jī)器編碼的液滴用于病原菌高通量分析
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 儀器與試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 隨機(jī)核酸分子機(jī)器編碼的液滴用于病原菌高通量分析檢測原理
        4.3.2 隨機(jī)核酸分子機(jī)器編碼的液滴用于病原菌高通量分析可行性研究
        4.3.3 隨機(jī)核酸分子機(jī)器編碼的液滴用于細(xì)菌的特異性及超靈敏檢測
        4.3.4 多色核酸分子機(jī)器編碼的液滴條形碼用于病原菌高通量檢測
        4.3.5 多色及強(qiáng)度調(diào)控的液滴用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)文庫
        4.3.6 多色及強(qiáng)度編碼的液滴用于混合細(xì)菌檢測
        4.3.7 多色及強(qiáng)度編碼的單液滴用于人工樣品中的混合病原菌高通量分析鑒定
        4.3.8 流式細(xì)胞儀用于多色及強(qiáng)度編碼的單液滴高通量分析
    4.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 結(jié)論
附錄:攻讀碩士期間的科研成果
致謝



本文編號:3271295

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