目的針對引起下呼吸道感染的20種常見病原微生物,建立一種基于多重PCR和第二代高通量測序技術(shù)的快速、高通量檢測方法 AC-seq。方法經(jīng)生物信息學(xué)分析,設(shè)計(jì)20種下呼吸道感染常見病原微生物特異性引物并通過PCR評估引物的敏感性和特異性。建立可進(jìn)行第二代高通量測序技術(shù)的多重PCR擴(kuò)增體系。采集34例臨床肺泡灌洗液標(biāo)本,對檢測方法進(jìn)行初步測試,并與臨床培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行對比評估檢測效果。結(jié)果所有引物均具有良好的敏感性和特異性。在臨床標(biāo)本檢測中AC-seq共檢出13種病原微生物,培養(yǎng)法檢出8種;AC-seq檢測陽性率為79.41%,培養(yǎng)法為32.35%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。AC-seq檢測靈敏度為100%,與培養(yǎng)法的一致率為50%。檢測時(shí)間比培養(yǎng)法縮短至少1d。結(jié)論基于多重PCR和第二代高通量測序技術(shù),成功建立了一種檢測下呼吸道感染20種常見病原微生物的快速、高通量的方法。 

【文章來源】：國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2020,41(17)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 一般資料
    1.2 儀器與試劑
    1.3 方法
        1.3.1 病原微生物培養(yǎng)與核酸提取
        1.3.2 引物設(shè)計(jì)
        1.3.3 引物驗(yàn)證
        1.3.4 AC-Seq法檢測方程
        1.3.5 靈敏度檢測
        1.3.6 臨床標(biāo)本鑒定
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 引物敏感性和特異性驗(yàn)證
    2.2 靈敏度檢測
    2.3 AC-Seq法檢測臨床標(biāo)本結(jié)果
    2.4 臨床標(biāo)本兩種方法檢測結(jié)果比較
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]下呼吸道感染病原體檢測方法研究進(jìn)展[J]. 賈雪洋,任紅宇,聶旭冬,秦天,李建國.  中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2019(03)
[2]2013—2016年某大型綜合性醫(yī)院呼吸道感染常見菌的耐藥性分析[J]. 郭靜,李從榮.  公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué). 2018(06)
[3]WHO公布全球十大死亡原因[J]. 宋昕.  中華災(zāi)害救援醫(yī)學(xué). 2018(11)
[4]2013-2016年14383例呼吸道感染患者9種病原體IgM抗體檢測結(jié)果分析[J]. 王麗,周光,王磊利,褚佳琪,陳剛,葉麗艷,羅燕萍.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2018(17)
[5]某院住院患者下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析[J]. 顧國忠,侯衍修,才立萍,白艷玲,馬權(quán),王春媛,李穎.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2018(14)
[6]2017年CHINET中國細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪復(fù),蔣曉飛,徐英春,張小江,張朝霞,季萍,謝軼,康梅,王傳清,王愛敏,徐元宏,沈繼錄,孫自鏞,陳中舉,倪語星,孫景勇,褚云卓,田素飛,胡志東,李金,俞云松,林潔,單斌,杜艷,郭素芳,魏蓮花,鄒鳳梅,張泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,蘇丹虹,汪瑞忠,房華,俞碧霞,趙勇,龔萍,郭大文,趙金英,劉文恩,李艷明,金炎,邵春紅,溫開鎮(zhèn),張貽榮,徐雪松,鄢超,喻華,黃湘寧,王山梅,楚亞菲,張利俠,馬娟,周樹平,周艷,朱鐳,孟晉華,董芳,鄭紅艷,沈瀚,周萬青,賈偉,李剛,吳勁松,盧月梅.  中國感染與化療雜志. 2018(03)
[7]宏基因組學(xué)在傳染病防控中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 李沛翰,李鵬,宋宏彬.  生物技術(shù)通報(bào). 2018(03)
[8]下呼吸道感染真菌的分離鑒定及藥敏分析[J]. 周詠梅,桂炳東,胡曉彥,賈坤如,胡龍華,夏惠芬,章白苓.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2011(19)



本文編號：3171128