發(fā)布時間：2021-04-22 07:22

　　目的:本研究通過收集符合入組要求的外陰陰道念珠菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）的臨床病例,探討我國VVC致病菌的分布特點。對病原菌進行抗真菌藥物的敏感性檢測,為臨床合理用藥提供線索。了解致病菌的基因型分布,初步探討疾病發(fā)生以及耐藥性與基因型之間的關(guān)系。方法:收集臨床擬確定為VVC患者的陰道分泌物,將收集到樣本通過芽管厚壁孢子試驗、科馬嘉顯色培養(yǎng)基、質(zhì)譜法（MALDI-TOF MS）以及分子生物學(xué)四種方法進行菌種鑒定;同時收集調(diào)查問卷中患者的相關(guān)信息,統(tǒng)計并分析VVC患者相關(guān)臨床數(shù)據(jù)。參照美國國家臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（The Clinical Laboratory Standards Institute,CLSI）推薦的方案M27-A3的相關(guān)要求,采用酵母菌微量稀釋法藥物敏感性試驗方法檢測收集的菌株對氟康唑,伊曲康唑,伏立康唑,泊沙康唑,制霉菌素,兩性霉素B,卡泊芬凈和特比萘芬等8種藥物的體外敏感性。通過采用微衛(wèi)星基因分型技術(shù)對鑒定為白念珠菌的菌株進行基因分型,用熒光標(biāo)記的引物進行擴增,純化后的產(chǎn)物進行毛細管電泳掃板,使用Genescan軟件對片段的大... 

【文章來源】：電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 危險因素
    1.2 病原菌
    1.3 致病機制
    1.4 藥物治療
    1.5 基因分型技術(shù)
    1.6 本研究的主要內(nèi)容及其重要意義
第二章 外陰陰道念珠菌病致原菌的分離及鑒定
    2.1 主要儀器與耗材
        2.1.1 主要實驗儀器
        2.1.2 主要實驗試劑及培養(yǎng)基制備
    2.2 臨床標(biāo)本收集與分類
        2.2.1 標(biāo)本收集
        2.2.2 臨床資料收集
    2.3 病原菌的分離與鑒定
        2.3.1 病原菌的分離培養(yǎng)與純化
        2.3.2 菌株的凍存
        2.3.3 病原菌的鑒定
            2.3.3.1 芽管及厚壁孢子實驗
            2.3.3.2 科馬嘉實驗
            2.3.3.3 質(zhì)譜法
            2.3.3.4 分子生物學(xué)方法菌種鑒定
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 菌株鑒定結(jié)果
        2.4.2 外陰陰道念珠菌病病種分布
            2.4.2.1 臨床樣本菌種分布
            2.4.2.2 年齡與妊娠分析結(jié)果
            2.4.2.3 妊娠VVC患者
            2.4.2.4 單因素和多因素Logistic回歸分析
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 外陰陰道念珠菌病致病菌藥物敏感性研究
    3.1 主要儀器與試劑
        3.1.1 主要儀器與耗材
        3.1.2 主要試劑及配制
    3.2 體外藥敏試驗方法
        3.2.1 藥物母液的配制
        3.2.2 菌懸液的配制
        3.2.3 質(zhì)控
            3.2.3.1 質(zhì)控株的選擇
            3.2.3.2 質(zhì)控的頻率
        3.2.4 無菌藥敏96 孔板的配制
            3.2.4.1 藥液的稀釋
            3.2.4.2 加入菌懸液
        3.2.5 結(jié)果判讀
        3.2.6 結(jié)果統(tǒng)計與分析
    3.3 藥敏結(jié)果
        3.3.1 白念珠菌藥敏結(jié)果
        3.3.2 非白念珠菌藥敏結(jié)果
        3.3.3 復(fù)發(fā)VVC和嚴(yán)重VVC的MIC值分布
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第四章 白念珠菌基因型與疾病和耐藥性相關(guān)研究
    4.1 主要儀器與試劑
        4.1.1 主要儀器與耗材
        4.1.2 主要試劑及培養(yǎng)基配制
    4.2 試驗方法
        4.2.1 菌株活化
        4.2.2 提取DNA
        4.2.3 微衛(wèi)星法基因分型
            4.2.3.1 PCR擴增
            4.2.3.2 PCR產(chǎn)物純化
            4.2.3.3 掃板
        4.2.4 統(tǒng)計與分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 PCR擴增結(jié)果
        4.3.2 基因型結(jié)果
            4.3.2.1 白念珠菌基因型分布
            4.3.2.2 妊娠VVC白念珠菌基因型分布
            4.3.2.3 單純VVC和復(fù)雜VVC白念珠菌基因型分布
            4.3.2.4 復(fù)發(fā)性VVC和嚴(yán)重VVC白念珠菌基因型分布
        4.3.3 耐藥菌株與基因型的關(guān)系
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第五章 全文結(jié)論與展望
    5.1 全文總結(jié)
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀碩期間的研究成果



本文編號：3153380