目的:腫瘤是由多種細(xì)胞組成的復(fù)雜組織,其中CAF是腫瘤間質(zhì)細(xì)胞中最主要的組成部分。本研究擬觀察腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（Cancer associated fibroblast,CAF）的糖代謝變化及其對(duì)腫瘤¹⁸F-FDG PET顯像的影響,并探索其在臨床應(yīng)用中的價(jià)值。方法:1.使用qRT-PCR及Western Blot方法比較NAF與CAF之間,以及CAF作用下的腫瘤細(xì)胞與原始腫瘤細(xì)胞之間的糖代謝相關(guān)分子表達(dá)差異。2.使用?計(jì)數(shù)儀及GO試劑盒分析比較兩者¹⁸F-FDG攝取及葡萄糖消耗的差異。3.使用CCK-8方法比較3-BrP對(duì)CAF與NAF的毒性差異。4.使用micro-PET/CT及放射自顯影的方法,在皮下移植瘤及AOM/DSS自發(fā)腸癌動(dòng)物模型中觀察CAF對(duì)¹⁸F-FDG攝取的影響。5.回顧性分析126例術(shù)前行¹⁸F-FDG PET/CT的結(jié)直腸癌患者的臨床病理及影像資料。6.篩選30例臨床病理特征匹配的高、低代謝組患者,取其腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行FSP-1免疫組化染色,使用inForm圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

CAF與NAF的糖代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平Figure1ThemRNAexpressionlevelsofHK2,GLUT-1andHIF-1α

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士畢業(yè)論文圖 2 CAF 與 NAF 的糖代謝相關(guān)蛋白表達(dá)水平Figure 2 The protein levels analyzed by Western Blot注：左側(cè)為 PDGF 細(xì)胞因子（PDGF-induced）及 HCT116 結(jié)腸癌細(xì)胞上清液（CM-induced）誘導(dǎo)的 CAF 細(xì)胞與 NAF 細(xì)胞比較，誘導(dǎo) CAF 細(xì)胞的 CAF 特異性蛋白 FSP-1/FAP 高表達(dá)，且 HK2、GLUT-1 表達(dá)升高；右側(cè)為結(jié)腸癌新鮮標(biāo)本中分離的 CAF 與 NAF之間比較，表達(dá) FSP-1 的 CAF 細(xì)胞 HK2 表達(dá)顯著增強(qiáng)。2.3 CAF 對(duì)腫瘤細(xì)胞糖代謝相關(guān)基因 mRNA 表達(dá)及蛋白表達(dá)水平的影響我們進(jìn)一步研究 CAF 對(duì)于腫瘤細(xì)胞糖代謝的影響，我們用證實(shí)被 PDGF 誘導(dǎo)活化的 CAF 細(xì)胞上清液培養(yǎng) HCT116 結(jié)腸癌細(xì)胞，應(yīng)用 qRT-PCR 及 WesternBlot 的方法比較其與親代細(xì)胞之間的糖代謝相關(guān)基因表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn) CAF 作用后的 HCT116 細(xì)胞的 HK2 表達(dá)顯著下降，其 mRNA 水平為原始細(xì)胞的 0.75 ±0.019，p = 0.015（圖 3），其 HK2 的蛋白表達(dá)同樣顯著降低。

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士畢業(yè)論文倍， p = 0.0002；HCT116 上清液誘導(dǎo) CAF 的18F-FDG 攝取為 NAF 的 1.188 ±0.86 倍，p = 0.0046。同時(shí)我們進(jìn)一步用 GO 的方法進(jìn)行了葡萄糖檢測(cè)，發(fā)現(xiàn) NAF 剩余的葡萄糖更多，也就意味著 CAF 伴隨著 FDG 的攝取增多，24 小時(shí)消耗的葡萄糖同樣增加。其中 PDGF 誘導(dǎo) CAF 的葡萄糖消耗為 NAF 的 1.353 ±1.978 倍，p =0.0006；HCT116 上清液誘導(dǎo) CAF 的葡萄糖消耗為 NAF 的 1.553 ±8.71 倍，p =0.0049。（圖 4A）


本文編號(hào)：3023046