目的:膿毒癥是由感染導致的全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）,病死率較高。急性肺損傷（ALI）是其常見的致命性并發(fā)癥之一,治療效果差。血紅素氧合酶1（HO-1）是血紅素代謝的關(guān)鍵酶和限速酶,在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮抑制炎癥和免疫調(diào)節(jié)的功能。細胞自噬是細胞重要的生物學行為,其通過對代謝有害產(chǎn)物和受損細胞器的吞噬以起到維持細胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的作用。本課題組前期研究已發(fā)現(xiàn)誘導HO-1表達和增強自噬均能夠抑制膿毒癥小鼠的炎癥反應(yīng),降低肺損傷程度,但兩者之間存在何種關(guān)聯(lián)尚不十分清楚。本實驗將在前期研究的基礎(chǔ)上進一步探討HO-1在膿毒癥小鼠肺損傷中對細胞自噬的影響與機制,并進行臨床觀察,分析感染及非感染的重癥手術(shù)患者體內(nèi)HO-1與細胞自噬水平的變化,及其與預(yù)后的相關(guān)性。方法:第一部分:HO-1介導細胞自噬對膿毒癥小鼠肺損傷的影響6⁸周齡健康雄性C57BL/6小鼠,SPF級,體重20²5 g,隨機分為假手術(shù)組（SH組）、膿毒癥組（CLP組）、HO-1激動劑Hemin+膿毒癥組（Hemin+CLP組）和HO-1抑制劑SnPP+膿毒癥組（SnPP+CLP組）。采用盲腸結(jié)扎穿孔（C... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

小鼠TNF-α、IL-1β和IL-10ELISA試劑盒標準品配制方法

置搖床上洗膜 5 次，每次 5min。⑼ 條帶顯色：遮光條件下，將超敏 ECL 化學發(fā)光試劑盒中的顯色液 B 等體積混勻，均勻滴注于膜蛋白面上，立即曝光，并進檢測。1.1.1.3.10 統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用 SPSS 19.0 統(tǒng)計學軟件進行分析，生存率用百分Fisher 確切概率法進行組間對比，計量資料以均數(shù)±標準差（ x s比較采用單因素方差分析，P < 0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。1.1.2 結(jié)果1.1.2.1 Hemin 及 SnPP 對膿毒癥小鼠生存率的影響膿毒癥小鼠 CLP 術(shù)后 1d 生存率為 80%，3d 生存率為 35%，5d7d 生存率為 0%。給予 Hemin 預(yù)處理，膿毒癥小鼠的生存率明顯升1d 生存率為 90%，3d 生存率為 55%，5d 生存率為 40%，7d 生存予 SnPP 預(yù)處理，小鼠生存率與 CLP 組相比無明顯變化，見圖 1-

16 1-3. SH 組、CLP 組、Hemin+CLP 組和 SnP較（n = 6, x s）：A. 肺組織病理學變化 HE ×400；B. 肺組. 肺組織氧合指數(shù) PaO2/FiO2。與 SH 組比較，.05；與 Hemin+CLP 組比較，cP＜0.05.1.2.3 不同時間點 Hemin 及 SnPP 對膿毒癥小響本研究通過對各組小鼠術(shù)后 6h、12h 和 24hL-1β 和抗炎因子 IL-10 水平變化的觀察中得出因子 TNF-α 和 IL-1β 釋放增加（P＜0.05），且.05），其中促炎因子在術(shù)后 6h 表達最高，隨時4h 內(nèi)逐漸增量。Hemin 預(yù)處理，使膿毒癥小鼠

【參考文獻】：
期刊論文
[1]自噬對膿毒癥小鼠急性肺損傷的內(nèi)源性保護作用與炎性反應(yīng)的關(guān)系[J]. 邊映雪,陳紅光,謝克亮,董艾莉,王妍妍,于泳浩.  中華麻醉學雜志. 2016 (05)
[2]自噬在膿毒癥小鼠肺損傷中的作用[J]. 董艾莉,陳紅光,謝克亮,于泳浩.  中華麻醉學雜志. 2015 (09)



本文編號：3020811