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不動桿菌屬分子生物學(xué)菌種鑒定技術(shù)及其臨床應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2021-01-23 11:04
  目的:探索建立可對不動桿菌屬臨床分離株進行準(zhǔn)確菌種鑒定的分子生物學(xué)檢測技術(shù),揭示非鮑曼不動桿菌臨床分離株的種屬分布狀態(tài)、臨床流行情況和耐藥性,為開展不動桿菌屬的臨床防治和流行病學(xué)研究提供可靠的檢測手段。方法:收集2017年1月至2017年12月深圳地區(qū)醫(yī)院住院患者各類標(biāo)本通過理化方法分離出的不動桿菌共268株,采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜檢測技術(shù)(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-time Of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)和bla OXA-51-like基因片段擴增篩查鮑曼不動桿菌、多重PCR擴增gyr B基因鑒定鮑曼不動桿菌復(fù)合體、PCR擴增rpo B、gyr B相關(guān)基因片段及其測序分析鑒定非鮑曼不動桿菌種屬,結(jié)合臨床病例資料揭示非鮑曼不動桿菌臨床分離株的種屬分布特征、季節(jié)流行狀態(tài)和耐藥性。結(jié)果:1、采用MALDI-TOF MS和bla OXA-51-like基因兩種方法鑒定268株不動桿菌,98.89%(265/268)的鑒定結(jié)果一致;其中228株為鮑曼不動桿菌,37株為... 

【文章來源】:南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

不動桿菌屬分子生物學(xué)菌種鑒定技術(shù)及其臨床應(yīng)用研究


深圳市地區(qū)各臨床科室不動桿菌分布圖

標(biāo)本,不動桿菌,深圳市


深圳市地區(qū)不動桿菌分離標(biāo)本及所占比例

標(biāo)本,樣本,菌種


圖 2.4 編號 A36 標(biāo)本復(fù)蘇DI-TOF MS 自動鑒定菌種-TOF MS 自動鑒定菌種的原理為:由于不同病原體的核糖異性,將其解離后可產(chǎn)生不同片段大小物質(zhì),在磁場作用,通過信號輸出產(chǎn)生特異性峰譜,將其特異性峰譜與數(shù)據(jù)從而進行鑒定,圖譜最相近所得分值最高者為最終鑒定菌:號與其在 MALDI 靶位上相應(yīng)的樣本位置確認(rèn)并記錄。菌接種環(huán),用其尖端沾取血平板中單個菌落的少量菌種,LDI 靶板上。樣本的 MALDI 靶位與所有樣本跟蹤方案相對應(yīng)。D HCCA 基質(zhì)溶液仔細(xì)涂敷在每個樣本上(注意:樣本晾

【參考文獻】:
期刊論文
[1]2005-2014年CHINET中國細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)5種重要臨床分離菌的耐藥性變遷[J]. 胡付品,F.-P.Hu,Y.Guo,D.-M.Zhu,F.Wang,X.-F.Jiang,Y.-C.Xu,X.-J.Zhang,C.-X.Zhang,P.Ji,Y.Xie,M.Kang,C.-Q.Wang,A.-M.Wang,Y.-H.Xu,J.-L.Shen,Z.-Y.Sun,Z.-J.Chen,Y.-X.Ni,J.-Y.Sun,Y.-Z.Chu,S.-F.Tian,Z.-D.Hu,J.-Li,Y.-S.Yu,J.Lin,B.Shan,Y.Du,Y.Han,S.Guo,L.-H.Wei,L.Wu,H.Zhang,J.Kong,Y.-J.Hu,X.-M.Ai,C.Zhuo,D.-H.Su,Q.Yang,B.Jia,W.Huang.  中國感染與化療雜志. 2017(01)
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[3]鮑曼不動桿菌外膜蛋白與亞胺培南耐藥性的研究進展[J]. 楊杰,多麗波.  中國抗生素雜志. 2016(12)
[4]基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時間質(zhì)譜對臨床常見細(xì)菌和酵母菌的鑒定能力評價[J]. 嚴(yán)立,徐繡宇,張莉萍.  生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2015(02)
[5]16S rRNA基因序列分析法鑒定病原細(xì)菌[J]. 朱飛舟,陳利玉,陳漢春.  中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(10)
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碩士論文
[1]碳青霉烯耐藥鮑曼不動桿菌對多粘菌素B耐藥機制研究[D]. 蔣顏.浙江大學(xué) 2010



本文編號:2995107

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