發(fā)布時間：2021-01-18 18:42

　　Cas9是CRISPR/Cas9系統(tǒng)中RNA引導(dǎo)的可切割雙鏈DNA的核酸酶,野生型Cas9可通過基因剪切直接導(dǎo)致目的基因表達(dá)沉默。將Cas9蛋白D10A和H840A位點突變,可獲得失去切割活性但仍保留與DNA結(jié)合能力的dCas9,其與轉(zhuǎn)錄激活因子連接后結(jié)合到DNA特定位點可實現(xiàn)轉(zhuǎn)錄激活;若dCas9直接與靶基因特定位點結(jié)合則可阻礙目的基因的轉(zhuǎn)錄。將光可調(diào)節(jié)物質(zhì)引入CRISPR/Cas9可設(shè)計成光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)。此系統(tǒng)在藍(lán)光（470 nm）誘導(dǎo)下作用于靶DNA可實現(xiàn)人為可控的基因表達(dá)激活和抑制。本文主要介紹了光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)的特性及其在基因表達(dá)調(diào)控中的運用。 

【文章來源】：國際藥學(xué)研究雜志. 2017,44(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 CRISPR技術(shù)簡介
2 傳統(tǒng)的基因誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)及其缺陷
3 光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)
    3.1 光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)激活轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
    3.2 光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)激活轉(zhuǎn)錄的特性
        3.2.1 可同時激活多個基因
        3.2.2 在時空上控制轉(zhuǎn)錄
        3.2.3 對基因的激活具有可重復(fù)性和可逆性
    3.3 光誘導(dǎo)CRISPR/Cas9系統(tǒng)抑制基因表達(dá)
        3.3.1 通過基因敲除使目的基因表達(dá)沉默
        3.3.2 通過影響基因轉(zhuǎn)錄活動使目的基因表達(dá)沉默
4 結(jié)語


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CRISPR/Cas9系統(tǒng)在基因表達(dá)調(diào)控中的應(yīng)用[J]. 魏澤輝,賈存靈,張智英.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2014(09)
[2]四環(huán)素誘導(dǎo)調(diào)控表達(dá)系統(tǒng)的研究與應(yīng)用[J]. 陳皓,夏海濱.  生命的化學(xué). 2011(02)



本文編號：2985450