目的:探討阻斷C5a/C5aR治療慢性移植物抗宿主�。╟GVHD）的療效,為cGVHD的免疫治療提供新的實驗依據(jù)。方法:1.采集異基因造血干細(xì)胞移植后cGVHD患者、無cGVHD患者及供者靜脈血標(biāo)本,流式細(xì)胞術(shù)檢測三組外周血淋巴細(xì)胞及CD14+單核細(xì)胞中C5aR的表達(dá)及CD4+4D25+Foxp3+ Tregs細(xì)胞的比例,并進(jìn)行相關(guān)性分析。2.流式細(xì)胞術(shù)檢測遺傳背景相同的C5aR敲除及野生型BALB/c小鼠脾細(xì)胞中CD4+CD25+Foxp3+Tregs細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例;體外培養(yǎng)小鼠脾細(xì)胞,分為C5aR-/-組、野生型組、RmC5a蛋白刺激組（分為100ng/mL及500ng/mLRmC5a+野生型脾細(xì)胞兩組）,分別采用ELISA檢測各組培養(yǎng)上清中TGF-β1的分泌水平及流式細(xì)胞術(shù)檢測各組CD4+CD25+Foxp3+Tregs細(xì)胞的比例。3.分選C5aR敲除及野生型BALB/c小鼠脾細(xì)胞中的CD4+T細(xì)胞,設(shè)C5aR-R-組及BALB/c組,通過CD3、CD28、IL-2、TGF-β1等細(xì)胞因子誘導(dǎo)Tregs細(xì)胞分化3天后,檢測2組CD4+T細(xì)胞中CD4+CD25+Foxp... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２．?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞在造血干細(xì)胞移植術(shù)后患者及健康供者外周血淋巴細(xì)??＊＊

ｉ??ｉ：ｌｌ１１１??Ｃｏｎ?Ｎｏｎ－ＧＶＨＤ?ＧＶＨＤ??圖１－２．?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞在造血干細(xì)胞移植術(shù)后患者及健康供者外周血淋巴細(xì)??胞中的表達(dá)比例（＊＊＞＜０．０似）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?Ｔｈｅ?ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ?ｏｆ?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋?Ｔｒｅｇ?ｃｅｌｌｓ（＊＊＊，Ｐ＜ｆｔ００７）??１．２．３顏干細(xì)胞移植術(shù)后ｃＧＶＨＤ患者Ｃ５ａＲ的表達(dá)與Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞表達(dá)的相關(guān)??性分析（圖１－３Ａ和１－３Ｂ）??根據(jù)我們的研究結(jié)果顯示，造血干細(xì)胞移植術(shù)后ｃＧＶＨＤ患者外周血淋巴??細(xì)胞中Ｃ５ａＲ的表達(dá)比例與ＣＤ４＋Ｔ細(xì)胞中Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞的表達(dá)比例呈顯著的負(fù)性相??關(guān)（Ｒ＝－０．６０３，Ｐ＜０．０１），如圖１－３Ａ；而對造血干細(xì)胞移植術(shù)后ｃＧＶＨＤ患者外??周血ＣＤ１４＋單核細(xì)胞中Ｃ５ａＲ的表達(dá)與ＣＤ４＋?Ｔ細(xì)胞中Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞表達(dá)比例進(jìn)行??相關(guān)性分析尚無顯著差異（Ｒ＝－０．３７８，?Ｐ＞０．０５），如圖１－３Ｂ。??Ａｎ?Ｂ??Ｒ?＝?－０．６０３，?ｐ?＝?０．００８?１０５１?Ｒ?＝?－０．３７８，?ｐ?＝?０．１２１??０?ｃ．?％?ｃ??Ｓ?Ｉ?１００■?？??１?Ｉ?？?？??％?＾?＾??Ｕ

表達(dá)顯著降低，明顯低于野生型ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾細(xì)胞組（Ｐ＜０．００１）；而ＲｍＣ５ａ??（１００ｎｇ／ｍＬ）組及ＲｍＣ５ａ?（５００ｎｇ／ｍＬ）組間Ｔｒｅｇｓ細(xì)胞的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意??義（Ｐ＞０．０５）。具體表達(dá)見圖２－２Ａ及２－２Ｂ。??２５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Biology of chronic graft-vs-host disease:Immune mechanisms and progress in biomarker discovery[J]. Richard B Presland.  World Journal of Transplantation. 2016(04)
[2]C3a、C5a受體缺失減輕IgA腎病腎損傷[J]. 晏現(xiàn)麗,張穎,鄭立運,任凌燕,周雅麗,權(quán)松霞,邢國蘭.  中國免疫學(xué)雜志. 2015(09)



本文編號：2983637