第一章:對(duì)核酸適配體的篩選技術(shù)和特點(diǎn)、毛細(xì)管電泳法和熒光分析法作了簡(jiǎn)要介紹,闡述了本論文的立題背景,所研究的主要內(nèi)容和創(chuàng)新點(diǎn)。第二章:我們采用四甲基羅丹明（TMR）標(biāo)記的含有29個(gè)堿基的適配體作為探針,詳細(xì)研究了采用激光誘導(dǎo)熒光毛細(xì)管電泳法（CE-LIF）檢測(cè)凝血酶體系當(dāng)中,樣品緩沖液中的金屬離子(如Na⁺,Mg²⁺和K⁺)對(duì)適配體-凝血酶復(fù)合物峰面積的影響,并且在優(yōu)化的條件下,實(shí)現(xiàn)了凝血酶的靈敏檢測(cè),檢出限為0.1 nM,本方法具有很好的選擇性,并且可以實(shí)現(xiàn)復(fù)雜基質(zhì)中凝血酶的定量檢測(cè)。第三章:我們建立了TMR標(biāo)記的適配體作為親和探針的CE-LIF檢測(cè)人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（HNE）的方法。在CE-LIF分析中,HNE-適配體復(fù)合物與未結(jié)合的適配體探針可以很好的分離。我們?cè)贖NE適配體的不同位點(diǎn)上修飾單個(gè)TMR染料,修飾位點(diǎn)包括5’末端,3’末端或適配體內(nèi)部的T堿基。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在第40個(gè)T堿基上標(biāo)記有TMR的適配體形成了較大的復(fù)合物峰。同時(shí),我們研究了樣品緩沖液中金屬陽(yáng)離子對(duì)CE-LIF檢測(cè)HNE的影響。高濃度的K

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

SELEX示意圖

目前，一些與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)特異性并且被廣泛應(yīng)用于生命分析的各個(gè)領(lǐng)域。ombin）是由 308 個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為 3酸蛋白酶，在生理和病理的凝血過(guò)程中起著非常重板的聚集，以及纖維蛋白原和纖維蛋白單體之間的海默病，帕金森病，糖尿病和癌癥等疾病的發(fā)生和，常用的凝血酶的 DNA 適配體有兩種，分別是9 個(gè)堿基的 Ap29[29]。其結(jié)構(gòu)如圖 1.2 所示。首先T TGG TGT GGT TGG-3’，它與凝血酶的纖維蛋白為 100 nM[28]，而 Apt29 （5’-AGT CCG TGG TA’）與凝血酶的肝素結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，具有更高的親 的親和力高出 200 倍。利用適配體與凝血酶的高發(fā)展出多種檢測(cè)凝血酶的新方法，如熒光分析法、20]。

適配體毛細(xì)管電泳法與熒光開(kāi)關(guān)法檢測(cè)為 17 nM[39]。利用適配體與 HNE些 HNE 的檢測(cè)方法[40-42]。unoglobulin E, IgE）是由兩條相同成的四肽鏈結(jié)構(gòu)（圖 1.3），它是滋病等疾病密切相關(guān)[43-48]。目前構(gòu)如圖 1.4 所示，是一個(gè)發(fā)夾結(jié)構(gòu) CCT AGT GGC GTG CCC C-3’，力，其已經(jīng)被應(yīng)用于多種形式的細(xì)管電泳法等[4, 9, 20, 51-59]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 王永利,張江偉,王立華,敖登高娃,黃慧婷,李美紅.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2011(12)
[2]毛細(xì)管電泳在核酸適配體研究及核酸適配體篩選中的應(yīng)用[J]. 屈鋒,劉允,任肖敏,趙新穎,張經(jīng)華.  化學(xué)進(jìn)展. 2009(Z2)
[3]毛細(xì)管電泳技術(shù)及其在環(huán)境分析領(lǐng)域中的應(yīng)用[J]. 戴婷婷,莢榮,鄭志俠.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(06)
[4]毛細(xì)管電泳在生物分析化學(xué)上的應(yīng)用及進(jìn)展[J]. 董捷.  山東環(huán)境. 1998(03)



本文編號(hào)：2982497