第一章:對核酸適配體的篩選技術和特點、毛細管電泳法和熒光分析法作了簡要介紹,闡述了本論文的立題背景,所研究的主要內(nèi)容和創(chuàng)新點。第二章:我們采用四甲基羅丹明（TMR）標記的含有29個堿基的適配體作為探針,詳細研究了采用激光誘導熒光毛細管電泳法（CE-LIF）檢測凝血酶體系當中,樣品緩沖液中的金屬離子(如Na⁺,Mg²⁺和K⁺)對適配體-凝血酶復合物峰面積的影響,并且在優(yōu)化的條件下,實現(xiàn)了凝血酶的靈敏檢測,檢出限為0.1 nM,本方法具有很好的選擇性,并且可以實現(xiàn)復雜基質(zhì)中凝血酶的定量檢測。第三章:我們建立了TMR標記的適配體作為親和探針的CE-LIF檢測人中性粒細胞彈性蛋白酶（HNE）的方法。在CE-LIF分析中,HNE-適配體復合物與未結合的適配體探針可以很好的分離。我們在HNE適配體的不同位點上修飾單個TMR染料,修飾位點包括5’末端,3’末端或適配體內(nèi)部的T堿基。實驗發(fā)現(xiàn),在第40個T堿基上標記有TMR的適配體形成了較大的復合物峰。同時,我們研究了樣品緩沖液中金屬陽離子對CE-LIF檢測HNE的影響。高濃度的K

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

SELEX示意圖

目前，一些與疾病相關的蛋白質(zhì)特異性并且被廣泛應用于生命分析的各個領域。ombin）是由 308 個氨基酸殘基組成，分子量為 3酸蛋白酶，在生理和病理的凝血過程中起著非常重板的聚集，以及纖維蛋白原和纖維蛋白單體之間的海默病，帕金森病，糖尿病和癌癥等疾病的發(fā)生和，常用的凝血酶的 DNA 適配體有兩種，分別是9 個堿基的 Ap29[29]。其結構如圖 1.2 所示。首先T TGG TGT GGT TGG-3’，它與凝血酶的纖維蛋白為 100 nM[28]，而 Apt29 （5’-AGT CCG TGG TA’）與凝血酶的肝素結合位點結合，具有更高的親 的親和力高出 200 倍。利用適配體與凝血酶的高發(fā)展出多種檢測凝血酶的新方法，如熒光分析法、20]。

適配體毛細管電泳法與熒光開關法檢測為 17 nM[39]。利用適配體與 HNE些 HNE 的檢測方法[40-42]。unoglobulin E, IgE）是由兩條相同成的四肽鏈結構（圖 1.3），它是滋病等疾病密切相關[43-48]。目前構如圖 1.4 所示，是一個發(fā)夾結構 CCT AGT GGC GTG CCC C-3’，力，其已經(jīng)被應用于多種形式的細管電泳法等[4, 9, 20, 51-59]。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2982497