人類社會的不斷發(fā)展提高了人們的物質(zhì)生活水平,然而,人們養(yǎng)成了越來越多的不良的生活習(xí)慣,也嚴(yán)重破壞了地球的環(huán)境,直接或間接地導(dǎo)致了癌癥、心血管疾病、遺傳性疾病和神經(jīng)性疾病等重大疾病的快速蔓延。這些疾病往往難以治愈,嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命�；虔煼ㄗ鳛橐环N在靶細胞中引入治療性基因的方法,很有希望從根本上治好這些棘手的病癥�；虔煼ǖ年P(guān)鍵是設(shè)計和制備安全高效的基因傳遞系統(tǒng)——包括病毒類載體和非病毒類載體。由于病毒類載體的安全性問題一直以來難以克服,故而越來越多的研究重點被集中在非病毒類載體上,而其中的陽離子聚合物在近幾十年中得到了快速的發(fā)展。本論文針對陽離子載體在傳遞基因過程中遇到的障礙,提出了系列基于聚甲基丙烯酸縮水甘油酯的基因載體,并用體外和/或體內(nèi)的表征驗證了它們的性能,為基因療法的發(fā)展提供了重要,有利的信息。星狀陽離子聚合物基因載體因為具有較好的柔性而受到關(guān)注。β-環(huán)糊精（β-CD）的良好的可化學(xué)修飾性和極好的生物相容性,為制備星狀聚陽離子提供了有利的條件�？紤]到哌嗪（PP）、N-氨乙基哌嗪（AEPP）和N-（3-氨丙基）-2-吡咯烷酮（APP）可能引入的生物學(xué)功能,我們以β-C... 

【文章來源】：北京化工大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ＤＮＡ被聚陽離子壓縮后形成的復(fù)合物為有序的結(jié)構(gòu)，如球體

在篩選聚合物類基因載體時，細胞毒性是被優(yōu)先考慮的一個重要因素。ＣＤ－ＰＧＰＰｓ、??ＣＤ－ＰＧＡＥＰＰｓ、ＣＤ－ＰＧＡＰＰｓ?和?ＰＥＩ，在?ＨＥＫ２９３、ＣＯＳ７?和?ＨｅｐＧ２?細胞系中的體外??ＭＴＴ試驗的結(jié)果被顯示于圖２－６中。通常情況下，聚陽離子／ｐＤＮＡ復(fù)合物的細胞存??活率隨著Ｎ／Ｐ比和氨基密度的增大而減小。在較高的Ｎ／Ｐ比下，游離的（不參與絡(luò)合??作用）陽離子聚合物的數(shù)量上升，引起細胞毒性增加。在同一個Ｎ／Ｐ比下，細胞存活??率與聚陽離子的臂長有關(guān)。ＣＤ－ＰＧＰＰ－３、ＣＤ－ＰＧＡＥＰＰ－３和ＣＤ－ＰＧＡＰＰ－３具有最長的??臂長，它們的毒性最高。一般，更高的分子量引起更大的聚陽離子的細胞毒性［１４６，１４７］。??與以ＣＤ為核的聚陽離子／ｐＤＮＡ復(fù)合物相比，含陽性對照物ＰＥＩ的復(fù)合物顯示出更高??的細胞毒性。ＰＥＩ具有大量的伯、仲和叔胺。ＣＤ－ＰＧＰＰ、ＣＤ－ＰＧＡＥＰＰ和ＣＤ－ＰＧＡＰＰ??

?第二章系列新型的高性能星狀聚陽離子基因載體???則具有豐富的無毒的親水的羥基，這些基團很好地減弱了陽離子聚合物載體的正電性??［１４６，１４７１，從而降低了載體的毒性。此外，生物相容性的ＣＤ核的引入不僅降低了氨基??的相對密度（高的氨基密度導(dǎo)致高毒性）［１４＆１４９１，同時為陽離子聚合物載體提供了一??定的生物相容性。我們也觀察到，在相同的Ｎ／Ｐ比下和細胞系中，臂長相同的ＣＤ－ＰＧＰＰ、??ＣＤ－ＰＧＡＥＰＰ和ＣＤ－ＰＧＡＰＰ載體表現(xiàn)出來的毒性之間沒有顯著的差別。??


本文編號：2978459