目前,癌癥已經(jīng)成為威脅人類健康和導致人類死亡最嚴重的疾病之一。傳統(tǒng)的腫瘤治療手段,如手術(shù)切除或者化學藥物治療等,治療效率低且副作用大,已不能滿足當前癌癥患者的治療需求。基因治療是一種新型的腫瘤治療手段,它利用載體,將外源DNA轉(zhuǎn)入到體內(nèi),進行人工表達,以彌補內(nèi)源基因的缺陷,其具有許多傳統(tǒng)治療方法沒有的優(yōu)點。但是,目前臨床常見的基因治療載體多為病毒載體,具有免疫原性、潛在毒性等未知風險。將治療基因安全的遞送到腫瘤細胞內(nèi),使其有效表達是目前研究的主要瓶頸。熒光探針作為一種目前研究發(fā)展火熱的檢測技術(shù),具有一些特有的優(yōu)勢,如靈敏度高、選擇性好、具有良好的細胞膜滲透性等。本課題將熒光探針通過人工修飾,構(gòu)建一種新型靶向遞送系統(tǒng),用以裝載治療基因,可以使其發(fā)揮其本身的檢測能力的同時,還能達到遞送藥物治療的目的。本研究基于熒光探針的結(jié)構(gòu),構(gòu)建了一種稀土上轉(zhuǎn)換發(fā)光的納米熒光探針,用以靶向遞送小干擾RNA,并考察了稀土納米顆粒的最佳使用條件,顆粒與RNA的最佳N/P比,最后用PCR與Western Blot檢測該探針遞送RNA的遞送效率,與蛋白質(zhì)表達效果。結(jié)果表明,稀土上轉(zhuǎn)換納米顆粒NaYF4:Yb3+,... 

【文章來源】：河南科技大學河南省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

siRNA干擾的分子機制示意圖

圖 1-1 siRNA 干擾的分子機制示意圖Fig. 1-1 Schematic diagram of molecular mechanism of siRNA interference在 RNA 干擾研究中涉及到了一種可特異性識別 dsRNA 的酶，它就NaselII 型家族中的 Dicer 蛋白酶[9]，它可以識別以各種方式進入到細胞內(nèi)的 dsRNA，并以一種能量消耗的方式逐步切割這些外源導入的 dsRNA，將長NA 切割成具有 19-21 bp 的雙鏈 RNA。2001 年，在研究 RNA 干擾機制的過，Bemstein 等人開始對果蠅 S2 細胞裂解液進行詳細研究，并首次發(fā)現(xiàn)icer 酶。他們從已經(jīng)發(fā)生 RNA 干擾的果蠅細胞中提取了一種核酸酶即 Dicer酶，并從中分離出了具有 21～23bp 長度的 dsRNA 片段。2. siRNA 的結(jié)構(gòu)siRNA 一般由內(nèi)源產(chǎn)生或化學合成，其結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為雙鏈 dsRNA，長度在t 左右，目前常用的 siRNA 結(jié)構(gòu)[15]如下圖 1-2 所示。

河南科技大學碩士學位論文擇性，其在環(huán)境檢測、分子催化和生物熒光成像等方面有人們廣泛關(guān)注[22]。作為一個實用工具能廣泛應(yīng)用于目標分析物的檢測是由于易操作和靈敏度高等優(yōu)勢[23]。一個理想的熒光探針需要受體對應(yīng)的目標物須具有較強的親和性，即選擇性強[24的基礎(chǔ)上，熒光信號要能避免外界環(huán)境的干擾，如光漂白度、目標分析物周圍溫度、pH、光照、氧化還原電勢、極主要由三個重要的元件構(gòu)成[25]，如圖 1-4 所示：

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2971752