核纖層蛋白B2通過細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白3調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞血管新生
發(fā)布時(shí)間:2021-01-04 11:50
目的探討核纖層蛋白B2(LMNB2)在血管內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的血管新生中的作用及其調(diào)控方式。方法人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)購自美國典型菌種保藏中心(ATCC)。利用LMNB2的短發(fā)夾RNA(shRNA)質(zhì)粒在HUVEC細(xì)胞中下調(diào)LMNB2的表達(dá),檢測對內(nèi)皮細(xì)胞體外成管的影響,統(tǒng)計(jì)單視野管狀結(jié)構(gòu)長度及節(jié)點(diǎn)數(shù)目;通過噻唑藍(lán)(MTT)、細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測LMNB2對內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移的影響;蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測細(xì)胞增殖及遷移相關(guān)標(biāo)志物,包括細(xì)胞核增殖抗原(Ki-67)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的表達(dá);實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)檢測細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白3(CDCA3)的mRNA表達(dá);熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)及CHIP實(shí)驗(yàn)檢測LMNB2對CDCA3的調(diào)控作用。采用Student’st檢驗(yàn)進(jìn)行分析。結(jié)果在HUVEC細(xì)胞中,下調(diào)LMNB2會抑制內(nèi)皮細(xì)胞血管新生,單視野平均管狀結(jié)構(gòu)總長由(6.45±0.63) mm下降至(2.61±0.52) mm,下降59.5%(t=4.709,P<0.01),節(jié)點(diǎn)數(shù)量下降由...
【文章來源】:中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2020年07期 北大核心
【文章頁數(shù)】:4 頁
本文編號:2956714
【文章來源】:中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2020年07期 北大核心
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