人細(xì)小病毒B19（Human parvovirus B19,B19V）和人細(xì)小病毒4（Human parvovirus 4,PARV4）可以感染人類,且可經(jīng)血液及血液制品傳播。我國捐獻(xiàn)血液/血漿時(shí)未對其中的B19V和PARV4進(jìn)行檢驗(yàn),我國血液制品企業(yè)在生產(chǎn)血液制品時(shí)也未對它們進(jìn)行篩查,且常規(guī)的病毒去除/滅活技術(shù)難以有效地將人細(xì)小病毒去除/滅活。血源性人細(xì)小病毒（B19V和PARV4）的存在對我國捐獻(xiàn)的血液/血漿和我國血液制品的使用存在著不可忽視的安全隱患。因此,B19V和PARV4對臨床用血和血液制品的潛在威脅越來越引起人們的關(guān)注。為了更好地保障我國臨床用血和血液制品的病毒安全性,我們有必要對我國獻(xiàn)血/獻(xiàn)漿人群中的B19V和PARV4進(jìn)行分子流行病學(xué)分析。因此,在本研究的第一部分,我們使用B19V-PARV4雙重核酸檢測體系對我國西安地區(qū)3200例單人份獻(xiàn)血者血漿和我國某血液制品企業(yè)54份混合原料血漿進(jìn)行了B19V和PARV4的核酸檢測。為了解B19V不同基因型的分布狀況,本研究基于B19V基因組中NS1-VP1u區(qū)的核苷酸序列或基因組近全長序列進(jìn)行克隆測序后,經(jīng)多重序列比對,最后基... 

【文章來源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

19V 的三種基因型代表毒株的核苷酸序列進(jìn)行1a 亞型的 Au 株（GenBank NO.M13178.1）、1064）、2 型的 A6 株（GenBank NO.AY064475）亞型的 V9 株（GenBank NO.AX003421）和 3234.1）。中的 neighbor-joining method 對 B19V 不同基因型進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析，并構(gòu)建進(jìn)化樹。中 B19V 和 PARV4 的核酸陽性率的結(jié)果判定方法為：3 個(gè)復(fù)孔均為陽性者，判定為疑似陽性。使用巢式 PCR 擴(kuò)增目的片段，若不擴(kuò)增出目的片段，則判定為陽性。僅 1 個(gè)或 0 個(gè)者血漿中，B19V核酸陽性的樣品有12份（陽性（陽性率為 0.13%）。

光定量 PCR 檢測混合原料血漿中的 B19V 和基因片段的克隆及鑒定段的巢式 PCR 擴(kuò)增 B19V 核酸陽性樣品經(jīng)巢式 PCR 擴(kuò)增其 N糖凝膠電泳。從結(jié)果圖 4 可以看到，無模板

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人細(xì)小病毒B19基因組編碼蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定[J]. 鐘亞迪,賈俊婷,范瑞,馬麗敏,馬玉媛,章金剛.  生物技術(shù)通訊. 2017(05)
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[7]GFP-LC3真核表達(dá)載體構(gòu)建、定位及膠質(zhì)瘤U87穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系篩選[J]. 李昊文,劉麗,任遠(yuǎn),郭安臣,王雅杰.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(21)
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本文編號：2922860