病原細(xì)菌是病原微生物的一種,存在于食品、水和環(huán)境中的病原細(xì)菌能夠引起多種疾病的爆發(fā)。準(zhǔn)確、快速的檢測(cè)病原細(xì)菌對(duì)控制疾病爆發(fā)、預(yù)防疾病的流行具有重要的意義。有關(guān)病原細(xì)菌的檢測(cè)方法主要包括微生物培養(yǎng)法、抗原抗體免疫法、分子生物學(xué)方法及生物傳感器的方法。在這些方法中,微生物培養(yǎng)法是臨床檢驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是整個(gè)檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣,所需要的檢測(cè)時(shí)間也較長(zhǎng),對(duì)突發(fā)事件中的樣品檢測(cè)無(wú)法及時(shí)獲得分析結(jié)果。免疫學(xué)的方法以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ),通過(guò)免疫反應(yīng)識(shí)別靶分子進(jìn)行檢測(cè),其優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高、檢測(cè)速度快。但在實(shí)際應(yīng)用中獲得相應(yīng)抗體的過(guò)程需要較長(zhǎng)時(shí)間,且其特異性易受抗體來(lái)源的影響。分子生物學(xué)的方法以核酸分析為基礎(chǔ),通過(guò)體外合成探針對(duì)病原細(xì)菌體內(nèi)的特異性DNA或者RAN進(jìn)行識(shí)別和檢測(cè),其中以放大反應(yīng)為基礎(chǔ)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（PCR）,具有高靈敏性、準(zhǔn)確性的特點(diǎn),對(duì)核酸的檢測(cè)能達(dá)到痕級(jí),針對(duì)低含病原細(xì)菌的檢測(cè)具有重要意義。但其所需放大引物的設(shè)計(jì)過(guò)程復(fù)雜,檢測(cè)過(guò)程繁瑣,對(duì)人員的技術(shù)要求也較高。基于各類生物傳感器的方法,特別是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的核酸適配體技術(shù)在病原細(xì)菌的檢測(cè)中越來(lái)越受到重視。電感耦合等離子體質(zhì)譜（IC... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)地質(zhì)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【部分圖文】：

致病菌檢測(cè)的文獻(xiàn)中應(yīng)用的主要領(lǐng)域分布圖

圖 1.2 李斯特菌的分離、鑒定、分型步驟[4]Fig. 1.2 Overview of isolation, identification and typing methods for Listeria and L.monocytogenes[4]1.2.1 傳統(tǒng)的培養(yǎng)法傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)檢測(cè)法是根據(jù)病原細(xì)菌所具有的繁殖特性，在培養(yǎng)基中篩選和分離細(xì)菌，再根據(jù)形態(tài)學(xué)特征（如染色及顯微鏡下觀察形態(tài)）和生理學(xué)（如在給定培養(yǎng)基上的繁殖情況）、生化學(xué)特性（如膜脂質(zhì)組成）對(duì)病原細(xì)菌實(shí)行鑒定。傳統(tǒng)培養(yǎng)法通過(guò)單個(gè)細(xì)菌增殖成多個(gè)菌落獲得放大的檢測(cè)細(xì)菌信號(hào)建立而來(lái)，至今仍被認(rèn)為是最可靠最準(zhǔn)確的病原細(xì)菌檢測(cè)手段。近年來(lái)利用培養(yǎng)法檢測(cè)的細(xì)菌種類種類很多[5-8]。這些檢測(cè)手段要求樣品中具備較高濃度的被測(cè)病原細(xì)菌，且因依賴于臨床檢驗(yàn)人員的 驗(yàn)和技術(shù)水平而具有一定的主觀性[6, 9]，而且耗時(shí)較長(zhǎng)，檢測(cè)周期一般為 6～7 天，過(guò)程繁瑣，在富集、培養(yǎng)條件、定 以及快速檢測(cè)等方面存在一定局限性，無(wú)法滿足檢測(cè)要求[10, 11]。另外，現(xiàn)有方法大多 次只能對(duì)單

中國(guó)地質(zhì)大學(xué)博士學(xué)位論文 進(jìn)行快速檢測(cè)，都獲得了較高的準(zhǔn)確率。感器的方法器的發(fā)展最早起源于上世紀(jì)六十年代，最早的傳感器的設(shè)物傳感器是酶電極。近年來(lái)，各類生物傳感器技術(shù)以其快速低消耗等特點(diǎn)，不斷地被開(kāi)發(fā)利用。生物傳感器以酶[41]、抗細(xì)胞[46]、組織、DNA 等生物活性物質(zhì)作為識(shí)別材料（識(shí)別元?jiǎng)e元件發(fā)生生化反應(yīng)，利用物理化學(xué)儀器監(jiān)測(cè)與待測(cè)物綁定的可定 的物理、化學(xué)信號(hào)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)和監(jiān)控件、物理化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化裝置以及被測(cè)物本身三部分構(gòu)成了生要素，如圖 1.3 所示。


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