【目的】文獻(xiàn)報導(dǎo),全身性類膿毒癥樣反應(yīng)是心臟驟停及心肺復(fù)蘇后一個重要的病理生理變化。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠心肺復(fù)蘇模型,觀察復(fù)蘇后心功能不全中炎性反應(yīng)的變化,并探討腦腸肽是否對復(fù)蘇后心肌組織炎性改變具有調(diào)控作用以及是否對復(fù)蘇后大鼠的心功能具有保護(hù)作用。【方法】實(shí)驗(yàn)一,250-300g健康SD大鼠經(jīng)皮電刺激心外膜制備心臟驟停模型后予以小動物呼吸機(jī)輔助通氣,胸外按壓成功復(fù)蘇后,分別在1小時,3小時,6小時,24小時處死大鼠,并利用生理信號記錄監(jiān)測大鼠室顫前及ROSC后各時間點(diǎn)心電圖及血流動力學(xué)指標(biāo)。取心臟進(jìn)行western blot實(shí)驗(yàn),分析NLRP3炎癥通路關(guān)鍵蛋白(ASC、NLRP3和Casepase1)的表達(dá)趨勢。實(shí)驗(yàn)二,250-300g健康SD大鼠隨機(jī)分為3組:(1)空白對照組(sham組);(2)NS+CPR組(NS組);(3)Ghrelin+CPR組(GH組)。成功建立心臟驟停及心肺復(fù)蘇模型后,ROSC后6小時,通過TTC法測量大鼠心肌壞死面積(3只/組);通過HE染色和TUNEL染色觀察ROSC后大鼠心肌受損情況和凋亡情況(3只/組);其余大鼠留取心臟及血清標(biāo)本:(1)通過ELISA法檢測各組血清中心肌酶的含量(c Tn I、LDH);(2)通過ELISA法檢測心肌組織中炎癥因子水平(IL-1β,IL-18,TNF-α);(3)通過試劑盒檢測各組心肌組織中髓過氧化物酶(MPO)含量;(4)利用試劑盒檢測各組心肌組織中丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;(5)利用western blot和免疫組化檢測各組心肌組織中炎性通路ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表達(dá)情況�！窘Y(jié)果】實(shí)驗(yàn)一,成功復(fù)蘇大鼠后,在復(fù)蘇成功后6小時內(nèi),大鼠的血流動力學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)呈加重趨勢,24小時后,各組之間大鼠心功能無明顯差異。心肌組織中,ASC、NLRP3和casepase1的表達(dá)在ROSC后6小時內(nèi)持續(xù)增加,24小時有所下降。實(shí)驗(yàn)二,(1)各組心臟TTC染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),sham組心肌無明顯缺血灶,NS組和GH組心臟標(biāo)本均有不同程度的缺血灶,而GH組心臟缺血灶面積百分比明顯低于NS組;(2)HE染色和TUNEL染色發(fā)現(xiàn),sham組心肌組織結(jié)構(gòu)比較完整,排列整齊,而GH和NS組心肌組織有不同程度的損傷,其中GH組相較于NS組,心肌損傷較輕且凋亡細(xì)胞明顯少于NS組(P0.05)。和與sham組相比,NS組和GH組血清中心肌酶均有升高(P0.05),且GH明顯降低了心肌酶的釋放(P0.05);(3)與sham組相比,NS組和GH組炎癥因子水平(IL-1β,IL-18,TNF-α)明顯升高(P0.05),與NS組相比,GH組炎癥因子水平顯著降低(P小于0.05);(4)與sham組比,NS組和GH組心肌組織中MPO明顯增多(P0.05),與NS組相比,GH組心肌組織中MPO則顯著降低(P0.05);(5)與sham組相比,NS組和GH組MDA活性增加,SOD活性下降(P0.05),而與NS組比較,GH組MDA活性下降,SOD活性上升(P0.05)。(6)WB檢測發(fā)現(xiàn),與sham組比較,NS和GH組ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表達(dá)均有不同程度的增強(qiáng)(P0.05),而GH組ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表達(dá)則有不同程度的下降(P0.05)�！窘Y(jié)論】本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了炎癥反應(yīng)參與調(diào)控了大鼠復(fù)蘇后心功能不全,并探討了腦腸肽在心肺復(fù)蘇領(lǐng)域中的運(yùn)用。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了腦腸肽可以抑制復(fù)蘇后心肌組織中的炎性改變,改善復(fù)蘇后的心功能不良,并減少心肌組織損傷和凋亡,這一作用可能與其抑制復(fù)蘇后心肌組織炎性改變有關(guān)。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R459.7
【部分圖文】：

171.4.2 監(jiān)測 GH 對大鼠血流動力學(xué)的影響1.實(shí)驗(yàn)分組 本實(shí)驗(yàn)分三組，Sham 組（空白對照組）、NS 組（鹽水組）、GH組，每組 5 只。2.給藥管理 用生理鹽水將 GH 溶解（1mg/ml）后，于-80℃冰箱內(nèi)分裝保存。在每次使用前，將 GH 溶液以生理鹽水稀釋 20 倍。當(dāng)大鼠 ROSC 后，立即以 80μg/mg 劑量經(jīng)股靜脈推入。NS 組在同一時間點(diǎn)推入等劑量生理鹽水。3. 血流動力學(xué)指標(biāo)及監(jiān)測時間點(diǎn) 分別在大鼠誘導(dǎo)室顫前和 ROSC 后

各?

22由表 1-2 及圖 1-7 系列可知，在 ROSC 后，NS 組和 GH 組在各時間點(diǎn)的大鼠心率與 Sham 組差異不明顯（P＞0.05），且 NS 組和 GH 組之間也無明顯差異（P＞0.05）；NS 組和 GH 組大鼠在 6h 內(nèi)，各時間點(diǎn) MAP、+Dp/Dtmax 及-Dp/Dtmax均明顯低于 Sham 組；在 1h 處，NS 組與 GH 組上述指標(biāo)無明顯差異（P＞0.05）；而 GH 組在 3h、6h 的 MAP、+Dp/Dtmax 及-Dp/Dtmax 值均明顯高于 NS 組。而三組大鼠在 24h 時，血流動力學(xué)指標(biāo)均無明顯差異（P＞0.05）。圖 1-7 系列中 表示與 SHAM 組相比，P＜0.05； 表示與 SHAM 組相比，P＜0.01； 表示與 SHAM 組相比，P＜0.001；﹟表示與 GH 組相比，P＜0.01；＊表示與 GH 組相比，P＜0.05。
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本文編號：2871061