【摘要】：第一部分載氧脂質(zhì)微泡聲學(xué)顯像效果及體內(nèi)遞送途徑的篩選目的對比觀察自制載氧脂質(zhì)微泡OLM與市售SonoVue、自制氟碳脂質(zhì)微泡的體內(nèi)增強(qiáng)效果,并觀察經(jīng)靜脈注射或經(jīng)瘤體注射兩種方式對OLM在乳腺癌瘤體內(nèi)及瘤旁組織的顯像效果的影響,探討OLM成為體內(nèi)傳送氧氣的可超聲介導(dǎo)的載體的可行性。方法不同造影劑聲學(xué)顯像對比實驗,3只正常兔經(jīng)耳緣靜脈依次團(tuán)注3種造影劑(OLM、SonoVue及C_3F_8Ms)0.5 ml,注射前后啟動造影CNTI模式,進(jìn)行超聲實時動態(tài)監(jiān)測兔肝造影增強(qiáng)效果,各自采集動態(tài)顯影圖5 min,應(yīng)用DFY-??型超聲圖像分析儀對肝造影過程做定量分析,觀察達(dá)峰時間TTP、峰值強(qiáng)度PI。瘤內(nèi)氧氣遞送途徑選擇實驗,4只裸鼠乳腺癌模型分為2組,經(jīng)尾靜脈或瘤體團(tuán)注OLM(0.1 ml)后即刻啟動造影CNTI模式,動態(tài)觀察腫瘤及瘤旁組織增強(qiáng)顯像情況,連續(xù)動態(tài)采集圖像3 min,定量比較腫瘤及瘤旁組織回聲強(qiáng)度(EI)。結(jié)果3種造影劑的部分重要物理化學(xué)性質(zhì)相似,兔肝造影達(dá)峰時間TTP(40 s~45 s)相近,OLM對兔肝的增強(qiáng)效果及持續(xù)增強(qiáng)與C_3F_8Ms相似,但C_3F_8Ms增強(qiáng)效果更好。OLM的PI比造影前增強(qiáng)了6.7倍,持續(xù)造影后5 min后仍較造影前增強(qiáng)了3.8倍(P0.001)。而SonoVue的PI值最高,是OLM的1.3倍。裸鼠瘤體造影實驗顯示,造影后20 s~25s,兩種注射方式的瘤體回聲均達(dá)峰值強(qiáng)度PI,瘤內(nèi)注射后瘤體PI約為靜脈注射后的1.4倍,而靜脈注射后瘤旁組織回聲強(qiáng)度是瘤內(nèi)注射后的2倍。結(jié)論OLM具有良好的聲學(xué)顯像性能,在體內(nèi)能被超聲可視化監(jiān)測并傳遞氧氣至靶組織。與靜脈注射相比,為增加瘤內(nèi)的氧氣量并減少對周圍組織的損傷,瘤內(nèi)注射是下一步放療增敏實驗更適合的體內(nèi)微泡遞送途徑。第二部分超聲靶向破壞OLM提高瘤體氧飽和度的實驗研究目的觀察靜脈注射OLM在VX2乳腺癌瘤體的造影增強(qiáng)效果,探討經(jīng)靜脈注射OLM攜帶氧氣到達(dá)瘤體組織的穩(wěn)定性及有效性;觀察超聲實時監(jiān)控及靶向定點爆破OLM提高腫瘤組織氧分壓的效果,探討UTMD聯(lián)合OLM改善瘤體組織氧飽和度的能力。方法建立兔VX2乳腺移植瘤動物模型6只,分為2組,每組3只,第1組進(jìn)行OLM瘤體造影顯像的觀察,經(jīng)耳緣靜脈團(tuán)注OLM(0.02ml/kg),注射前后進(jìn)行超聲實時動態(tài)監(jiān)測造影增強(qiáng)效果,應(yīng)用DFY-??型超聲圖像分析儀對瘤體顯影過程做定量分析,觀察達(dá)峰時間TTP、峰值強(qiáng)度PI;第2組觀察UTMD聯(lián)合OLM局部定點釋放氧氣后的組織氧分壓,經(jīng)耳緣靜脈依次團(tuán)注微泡(0.5 ml)及超聲輻照施加順序為:C3F8Ms、C3F8Ms+US、OLM、OLM+US,應(yīng)用氧電極法進(jìn)行瘤體組織實時氧分壓檢測并比較,計算氧飽和度。結(jié)果兔VX2乳腺移植瘤造影成功顯像,持續(xù)增強(qiáng)及增強(qiáng)回聲較均質(zhì),造影后20 s(TTP)達(dá)峰值強(qiáng)度PI(115.85±34.83 d B),為造影前(14.03±3.00 d B)的8倍,顯著增強(qiáng)造影可持續(xù)達(dá)5 min,造影后5min回聲強(qiáng)度EI為造影前的3.7倍。靶向瘤體釋放氧氣實驗顯示,超聲輻照OLM 1 min的p O2值較其他組顯著增高(P0.05),爆破后p O2值(364.37±80.48 mm Hg)較前(54.49±12.05 mm Hg)提高了約6.7倍,超聲爆破后氧飽和度較爆破前約增高了197%。結(jié)論OLM經(jīng)靜脈注射后,在瘤體持續(xù)增強(qiáng)可達(dá)5 min,超聲能實時監(jiān)控及局部靶向爆破,能瞬時提高腫瘤組織的氧飽和度,證實了UTMD聯(lián)合OLM具有短時間顯著改善瘤體組織氧飽和度的能力,并具有增敏放療的潛能。第三部分超聲靶向破壞OLM促進(jìn)腫瘤放療增敏的實驗研究目的觀察超聲靶向破壞OLM聯(lián)合放療對裸鼠乳腺癌瘤體的治療效果,探討超聲靶向破壞OLM協(xié)同放療的能力及機(jī)制。方法成功建立裸鼠乳腺癌動物模型30只,分為6組,RT組、RT+OLM組、RT+OLM+US組、RT+C3F8Ms+US組、RT+US組及空白對照組,經(jīng)瘤內(nèi)注射各微泡造影劑原液0.1 ml,注射完畢即刻啟用超聲輻照瘤體1 min后即刻,實施單次放療一次(劑量:2Gy)。放射輻照結(jié)束后24小時采集標(biāo)本進(jìn)行免疫組化測定(HIF-1α及Caspase-3)及TUNEL檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果超聲靶向腫瘤爆破OLM經(jīng)單次低劑量放射輻照后24小時,HIF-1α陽性表達(dá)顯著減少(P0.05),較RT組減少了49%,而Caspase-3陽性表達(dá)顯著增高(P0.05),約為RT組的1.8倍,但RT+OLM組、RT+C3F8Ms+US組的Caspase-3陽性表達(dá)亦顯著增高,3組間差異無顯著性(P0.05),TUNEL檢測瘤細(xì)胞的凋亡指數(shù)可高達(dá)60%,約為單純放療凋亡指數(shù)(30%)的2倍,而超聲爆破C3F8Ms聯(lián)合放療的凋亡指數(shù)可達(dá)50%。結(jié)論超聲靶向破壞OLM可顯著增強(qiáng)低劑量放療療效,具有額外遞送的氧逆轉(zhuǎn)腫瘤乏氧誘發(fā)的放療抵抗及影響腫瘤血管的雙重增效的可能機(jī)制,有望成為低劑量放療的協(xié)同治療新策略。
【圖文】：

圖 1-1 OLM 的物理性質(zhì) （a）光鏡下(×200)OLM 均勻分布；（b）OLM 溶液外觀；（c）制備 1d OLM粒徑分布圖Fig. 1-1 Physical characteristics of OLM. (a) Light microscopy images of OLM (×200).(b) The appearanceof OLM,(c) Size distribution plot of OLM 1 day after preparation.圖 1-2 兔肝及荷乳腺癌裸鼠瘤體彩色多普勒血流圖

圖 1-1 OLM 的物理性質(zhì) （a）光鏡下(×200)OLM 均勻分布；（b）OLM 溶液外觀；（c）制備 1d OLM粒徑分布圖Fig. 1-1 Physical characteristics of OLM. (a) Light microscopy images of OLM (×200).(b) The appearanceof OLM,(c) Size distribution plot of OLM 1 day after preparation.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R445.1;R730.55

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 肖歡;楊春江;唐毅;王蕎;王冬;高洋;陳鏡宇;高惠;王瑩;;載氧脂質(zhì)微泡體外釋氧效果[J];中國介入影像與治療學(xué);2013年08期

2 肖歡;唐毅;楊春江;李攀;高洋;李奇林;;新型載氧超聲微泡的制備及其基本特性研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2013年17期

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 肖歡;載氧脂質(zhì)微泡的制備及體外實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號：2685452