【摘要】：目的:在軀體感覺中,傷害性感受器激活所介導(dǎo)的疼痛是機(jī)體的一個(gè)重要保護(hù)機(jī)制。隨著TRP通道的發(fā)現(xiàn),傷害性感受器介導(dǎo)疼痛的分子機(jī)制才有了更加深入研究,然而內(nèi)臟感覺的研究由于客觀的因素進(jìn)展緩慢,特別是迷走神經(jīng)在其中的作用及機(jī)制,其是否參與傷害性感覺的傳導(dǎo)至今尚有爭(zhēng)論。本文旨在對(duì)迷走神經(jīng)上的胃腸道傷害性感受器基本特征進(jìn)行鑒定,并研究了6-姜烯酚對(duì)其產(chǎn)生的作用及機(jī)制,探討了6-姜烯酚抑制化療后惡心嘔吐的外周機(jī)制。方法:(1)通過(guò)改進(jìn)已有的食管-迷走神經(jīng)分離方法,建立了小鼠胃食管-迷走神經(jīng)的分離和灌注系統(tǒng);(2)對(duì)迷走神經(jīng)節(jié)進(jìn)行免疫熒光組織化學(xué)染色,分析TRPV1的表達(dá)情況;(3)利用我們課題組新構(gòu)建的基因工程鼠Pirt-GCa MP6s小鼠,使用雙光子共焦激光掃描熒光顯微鏡進(jìn)行實(shí)時(shí)的鈣成像技術(shù),研究神經(jīng)元對(duì)各種傷害性刺激的反應(yīng)以及功能變化;(4)利用經(jīng)典電生理技術(shù),即細(xì)胞外單個(gè)神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢挥涗?對(duì)各種傷害性刺激的反應(yīng)以及功能變化;(5)結(jié)合雙光子共焦激光掃描熒光顯微鏡實(shí)時(shí)鈣成像技術(shù)和細(xì)胞外單個(gè)神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢挥涗浀姆椒?研究6-姜烯酚對(duì)迷走神經(jīng)上胃腸道傷害性感受器的作用及相關(guān)機(jī)制;(6)構(gòu)建化療所致惡心嘔吐的模型,探討6-姜烯酚是否可以通過(guò)迷走神經(jīng)發(fā)揮抗嘔吐的作用及相關(guān)機(jī)制。結(jié)果:(1)我們成功構(gòu)建了小鼠胃食管-迷走神經(jīng)的分離和灌注系統(tǒng),經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,至少可以維持組織和神經(jīng)的保持活性8小時(shí)以上;(2)迷走神經(jīng)上胃食管傷害性感受器的傳導(dǎo)速度均1 m/s;免疫熒光結(jié)果顯示TRPV1通道蛋白在迷走神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元上高表達(dá);均屬于無(wú)髓鞘C纖維的特征;(3)迷走神經(jīng)末梢可以感受胃腸道的傷害性刺激,如傷害性的機(jī)械刺激、酸、α,β-methylene-ATP、AITC以及Capsaicin等化學(xué)性刺激;(4)生姜中的重要活性成分6-姜烯酚能直接激活迷走神經(jīng)上食管和胃的傷害性感受器,而這個(gè)作用主要是由TRPA1通道所介導(dǎo);(5)經(jīng)6-姜烯酚作用后,迷走神經(jīng)末梢脫敏,對(duì)再次的化學(xué)刺激反應(yīng)(自身、AITC和Cap)減輕;(6)VCR治療可以引起小鼠進(jìn)食減少,胃排空減慢;(7)VCR可以激活胃腸道上的迷走神經(jīng)末梢;(8)5-羥色胺3受體抑制劑帕洛諾司瓊、TRPA1通道抑制劑HC-030031和6-姜烯酚都能抑制VCR的激活作用。結(jié)論:(1)迷走神經(jīng)節(jié)上存在大量的胃食管傷害性感受器,其末梢分布在食管、胃腸等組織上。與絕大多數(shù)的軀體傷害性感受器一樣,神經(jīng)傳導(dǎo)速度較慢,屬于無(wú)髓鞘C纖維,并且也能感受并傳導(dǎo)來(lái)自靶器官上的各種傷害刺激,如機(jī)械刺激、酸和各種化學(xué)性刺激。(2)生姜中的重要活性成分6-姜烯酚,能通過(guò)TRPA1激活迷走神經(jīng)上的食管和胃?jìng)π愿惺芷鳌＝?jīng)6-姜烯酚作用后導(dǎo)致的神經(jīng)脫敏作用與生姜能鎮(zhèn)痛、緩解惡心、嘔吐等癥狀密切相關(guān),其作用靶點(diǎn)TRPA1通道,未來(lái)可能可以為新的止吐藥開發(fā)或內(nèi)臟疼痛的治療提供一個(gè)思路。(3)VCR可以刺激胃腸道上的迷走神經(jīng)末梢,經(jīng)6-姜烯酚作用后的迷走神經(jīng)末梢產(chǎn)生脫敏作用,進(jìn)而可以抑制VCR對(duì)迷走神經(jīng)的作用,可能是生姜能緩解CINV的潛在機(jī)制。
【圖文】：

華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文個(gè)神經(jīng)回路的完整。圖 1.2B 和 C 分別是 TPLSM 和 ECR 實(shí)驗(yàn)的模擬圖；圖 1.2D 分別是 TPLSM 和 ECR 實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況，通過(guò)這個(gè)系統(tǒng)我們得以開展后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

的傳導(dǎo)速度：支配胃的迷走神經(jīng)的 C 為 0.33±0.03 m/s(n=21)，兩者的傳導(dǎo)速管傷害性感受器對(duì)機(jī)械刺激的反應(yīng)器對(duì)不同壓力機(jī)械刺激的反應(yīng)，在g，1mmHg，，2mmHg，3mmHg，4m0mmHg 十種不同壓力刺激食管壁， Hz，8.58±2.14Hz，13.0±2.77 Hz，16z，29.1±4.3Hz，31.5±4.3 Hz，35.9±害性感受器的反應(yīng)越劇烈，放電頻直觀并同時(shí)觀察到更多對(duì)機(jī)械刺激的轉(zhuǎn)基因小鼠 Pirt-GCaMP6s 小鼠,的反應(yīng)，圖 1.5 A-D 顯示隨著機(jī)械
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R402

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2 胡三覺,翁志成;刺激皮膚感受野對(duì)大鼠多覺型傷害性感受器誘發(fā)放電的影響[J];生理學(xué)報(bào);1988年05期

3 胡三覺,朱軍;交感傳出對(duì)多覺型傷害性感受器持續(xù)放電的易化效應(yīng)[J];生理學(xué)報(bào);1989年06期

4 胡三覺;朱軍;;交感神經(jīng)易化多覺型傷害性感受器的持續(xù)放電[J];針刺研究;1989年Z1期

5 朱軍;胡三覺;范謹(jǐn)之;;交感神經(jīng)對(duì)多元型傷害性感受器的調(diào)制作用[J];針刺研究;1989年Z1期

6 胡三覺,胡家俊,劉弟模;針刺對(duì)傷害性感受器的傳出抑制作用及其與交感神經(jīng)的關(guān)系[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1981年01期

7 ;針刺對(duì)人皮膚C纖維傷害性感受器活動(dòng)的激發(fā)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè));1996年03期

8 胡三覺 ,朱軍 ,李之源;交感傳出對(duì)多覺型傷害性感受器持續(xù)放電的易化效應(yīng)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1990年02期

9 陸悅;;疼痛[J];護(hù)士進(jìn)修雜志;2010年07期

10 ;灸刺激誘發(fā)血管擴(kuò)張和C纖維傷害性感受器以及皮膚交感神經(jīng)活動(dòng)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè));1998年06期

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2 張婷;王旭

本文編號(hào)：2658408