【摘要】：目的驗(yàn)證創(chuàng)面持續(xù)恒溫加熱敷料有利于創(chuàng)面愈合,探討創(chuàng)面持續(xù)恒溫加熱敷料對于創(chuàng)面修復(fù)的作用及相關(guān)機(jī)制。方法將40只C57BL/6小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法均分為2組,即實(shí)驗(yàn)組和對照組,每組20只。兩組均構(gòu)建直徑10mm圓形的抗收縮全層皮膚缺損模型。實(shí)驗(yàn)組持續(xù)加熱維持創(chuàng)面恒定36℃并持續(xù)記錄溫度數(shù)據(jù),對照組持續(xù)關(guān)閉敷料加熱開關(guān)并持續(xù)記錄創(chuàng)面溫度數(shù)據(jù)。于術(shù)后第7d、10d、14d,每組分別隨機(jī)取4只處死,在對創(chuàng)面進(jìn)行大體觀拍照后計(jì)算創(chuàng)面愈合率;取創(chuàng)面組織,行蘇木素-伊紅染色觀察組織病理學(xué)情況;免疫組織化學(xué)染色觀察CD31、α-SMA的表達(dá)分布;實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測創(chuàng)面組織中CD31、α-SMA、VEGF、collagen I、collagenⅢ、IL-6、IL-10 的 mRNA 表達(dá);蛋白質(zhì)印跡法檢測 CD31、α-SMA、VEGF、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、IL-6、IL-10的蛋白表達(dá)。對數(shù)據(jù)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性分析后,各時(shí)間點(diǎn)兩組間比較行Student-t檢驗(yàn)。結(jié)果(1)大體觀結(jié)果顯示,術(shù)后第10d、14d,實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面面積小于對照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。術(shù)后第7d、10d、14d,實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面愈合率顯著高于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(2)蘇木素/伊紅(HE)染色結(jié)果顯示,在術(shù)后10d、14d,實(shí)驗(yàn)組再生的上皮組織和肉芽組織較對照組厚,成纖維細(xì)胞、新生血管和膠原沉積明顯多于對照組。(3)對照CD31與α-SMA免疫組化染色結(jié)果及血管計(jì)數(shù)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后第10d、14d的新生血管和成熟血管計(jì)數(shù)多于對照組(p0.05或p0.01)。qRT-PCR檢測兩組小鼠創(chuàng)面中的CD31、α-SMA、VEGF的mRNA的相對分子表達(dá)量都隨著術(shù)后時(shí)間的增加而逐步增加;術(shù)后第7d,實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面α-SMA、VEGF的mRNA相對表達(dá)量高于對照組(p0.05);術(shù)后第10d,兩組創(chuàng)面CD31、α-SMA、VEGF的mRNA相對表達(dá)量均高于對照組(p0.05或p0.01);術(shù)后第14d,實(shí)驗(yàn)組的CD31、α-SMA相對表達(dá)量高于對照組(p0.05或p0.01)。蛋白電泳結(jié)果與免疫組化及qRT-PCR檢測的結(jié)果基本相一致。(4)兩組創(chuàng)面collagen I、collagen Ⅲ的mRNA的相對表達(dá)量都隨著術(shù)后時(shí)間的增加而逐步升高。術(shù)后第7d、14d,實(shí)驗(yàn)組collagen I、collagen Ⅲ的mRNA相對表達(dá)量高于對照組(p0.05或p0.01);術(shù)后第10d,實(shí)驗(yàn)組collagen I的mRNA表達(dá)量高于對照組(P＜0.01)。兩組術(shù)后第7d、10d、14d的collagenI、collagen Ⅲ的蛋白表達(dá)水平,隨著時(shí)間的延長,兩組collagen I、collagen Ⅲ、的蛋白表達(dá)量均逐漸增加,各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組的蛋白表達(dá)量增加均高于對照組。(5)在術(shù)后第7、10、14d,兩組小鼠創(chuàng)面組織中的IL-6mRNA的相對表達(dá)量均隨著術(shù)后時(shí)間增加而逐步減少。術(shù)后第7d,實(shí)驗(yàn)組IL-6的mRNA相對表達(dá)量少于對照組(p0.01);術(shù)后第14d,實(shí)驗(yàn)組IL-6的mRNA的相對表達(dá)量顯著低于對照組(p0.05)。在術(shù)后第7、10、14d,兩組的IL-10的mRNA的相對表達(dá)量都隨著術(shù)后時(shí)間的增加而逐步地減少,實(shí)驗(yàn)組的相對表達(dá)量均高于對照組(p0.05)。Westernblot檢測兩組創(chuàng)面術(shù)后第7d、10d、14d的IL-6、IL10蛋白水平表達(dá)的變化,與qRT-PCR檢測的結(jié)果趨勢基本相一致。結(jié)論創(chuàng)面持續(xù)恒溫加熱敷料可促進(jìn)小鼠全層皮膚缺損創(chuàng)面愈合,其機(jī)制可能與促進(jìn)小鼠皮膚血管化、創(chuàng)面上皮化進(jìn)程、膠原沉積及抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。
【圖文】：

驗(yàn)組小鼠創(chuàng)面的溫度值（Ｂ）為３６．０３±０．０５°Ｃ。逡逑３．２動物實(shí)驗(yàn)大體觀察逡逑術(shù)后第３ｄ、５ｄ、７ｄ、１０ｄ、１４邋ｄ，創(chuàng)面拍照記錄，結(jié)果如圖３－２所示�？傮w上，逡逑隨著術(shù)后時(shí)間點(diǎn)的延長，兩組創(chuàng)面面積為逐漸減小的趨勢。通過軟件Ｉｍａｇｅ邋Ｊ測量逡逑創(chuàng)面面積，得到如表３－１所示的數(shù)據(jù)，術(shù)后第３ｄ、５ｄ、７ｄ，實(shí)驗(yàn)俎創(chuàng)面面積小于逡逑對照組，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＞０．０５）；在術(shù)后第１０ｄ、１４ｄ，實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面面積逡逑１１逡逑

邐１５逡逑術(shù)后時(shí)間（天）逡逑圖３－１術(shù)后０ｄ—１４ｄ對照組小鼠創(chuàng)面的溫度值（Ａ）為３１．４９±１．１８°Ｃ；實(shí)逡逑驗(yàn)組小鼠創(chuàng)面的溫度值（Ｂ）為３６．０３±０．０５°Ｃ。逡逑３．２動物實(shí)驗(yàn)大體觀察逡逑術(shù)后第３ｄ、５ｄ、７ｄ、１０ｄ、１４邋ｄ，創(chuàng)面拍照記錄，結(jié)果如圖３－２所示�？傮w上，逡逑隨著術(shù)后時(shí)間點(diǎn)的延長，，兩組創(chuàng)面面積為逐漸減小的趨勢。通過軟件Ｉｍａｇｅ邋Ｊ測量逡逑創(chuàng)面面積，得到如表３－１所示的數(shù)據(jù)，術(shù)后第３ｄ、５ｄ、７ｄ，實(shí)驗(yàn)俎創(chuàng)面面積小于逡逑對照組，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＞０．０５）；在術(shù)后第１０ｄ、１４ｄ，實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面面積逡逑１１逡逑
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R473.6

【參考文獻(xiàn)】

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1 梁超英;錢志余;;人體組織傳熱及應(yīng)用研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2007年02期

本文編號：2612530