本文關(guān)鍵詞：刺激響應(yīng)型陽離子脂質(zhì)基因載體研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：基因治療為許多先天性遺傳和后天獲得性疾病的治療提供了良好的應(yīng)用前景,其關(guān)鍵在于高效、低毒的基因載體的合成。陽離子脂質(zhì)體因其良好的生物兼容性、無免疫原性以及設(shè)計合成的便利性使其成為最有研究前景的基因載體。通過研究脂質(zhì)體的載體結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞毒性之間的關(guān)系,對于構(gòu)建理想的脂質(zhì)基因載體具有重要意義。本文第一章概述了陽離子脂質(zhì)的研究進展以及基因傳遞的細(xì)胞內(nèi)外障礙及其解決方法。第二章,我們設(shè)計合成了兩個含有生育酚疏水基團的還原敏感型氨基酸陽離子脂質(zhì)2-4a和2-4b。這兩個脂質(zhì)形成的脂質(zhì)體表現(xiàn)出了較強的DNA結(jié)合能力,可包裹壓縮DNA形成穩(wěn)定的復(fù)合物。以組氨酸為頭部的脂質(zhì)體2-4a的轉(zhuǎn)染效率高于賴氨酸為頭部的脂質(zhì)2-4b,這可能與陽離子脂質(zhì)2-4a較弱的DNA結(jié)合能力有關(guān)。同時,陽離子脂質(zhì)2-4a的轉(zhuǎn)染效率與商品化試劑Lipofectamine 2000相當(dāng)。此外,脂質(zhì)體2-4a有較好的血清相容性,10%血清條件下的轉(zhuǎn)染效率為聚乙烯亞胺bPEI-25K的4.3倍。第三章,在前期的基礎(chǔ)上,設(shè)計合成了基于二肽親水頭部的還原敏感型陽離子脂質(zhì)體。這些脂質(zhì)都表現(xiàn)出了不同的DNA結(jié)合能力,且具有良好的生物兼容性。陽離子脂質(zhì)3-2f在最優(yōu)條件下轉(zhuǎn)染效率為聚乙烯亞胺bPEI 25k的100倍。第四章,我們設(shè)計合成了一系列酯酶響應(yīng)的電荷轉(zhuǎn)換型氨基酸陽離子脂質(zhì)。結(jié)果表明親水頭部對轉(zhuǎn)染效率有較大的影響。以苯丙氨基酸為頭部的陽離子脂質(zhì)4-4c的轉(zhuǎn)染效率最高,其在10%血清存在下的轉(zhuǎn)染效率為聚乙烯亞胺bPEI 25k的2.1倍。
【關(guān)鍵詞】：非病毒載體 陽離子脂質(zhì) 刺激響應(yīng) 氨基酸
【學(xué)位授予單位】：西南民族大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R450
【目錄】：

• 摘要2-3
• ABSTRACT3-8
• 第一章 陽離子脂質(zhì)作為非病毒載體研究進展8-20
• 1.1 基因治療及基因載體簡介8-9
• 1.2 陽離子脂質(zhì)基因載體9-13
• 1.2.1 脂質(zhì)體簡介9
• 1.2.2 陽離子脂質(zhì)分類9-13
• 1.3 陽離子脂質(zhì)基因載體傳遞的一般過程13
• 1.4 基因轉(zhuǎn)染過程中的各種障礙13-14
• 1.4.1 細(xì)胞外的障礙13
• 1.4.2 細(xì)胞內(nèi)的障礙13-14
• 1.5 刺激響應(yīng)型陽離子脂質(zhì)研究14-19
• 1.5.1 pH-響應(yīng)的陽離子脂質(zhì)研究14-16
• 1.5.2 酶響應(yīng)型陽離子脂質(zhì)研究16-17
• 1.5.3 還原響應(yīng)型陽離子脂質(zhì)研究17-18
• 1.5.4 多重刺激型陽離子脂質(zhì)研究18-19
• 1.6 論文的研究思路和主要內(nèi)容19-20
• 第二章 基于氨基酸頭部的還原敏感陽離子脂質(zhì)20-42
• 2.1 引言20
• 2.2 結(jié)果與討論20-33
• 2.2.1 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的合成20-21
• 2.2.2 酸堿滴定實驗21-22
• 2.2.3 脂質(zhì)體與DNA的作用22-26
• 2.2.4 細(xì)胞毒性實驗26-27
• 2.2.5 體外基因轉(zhuǎn)染實驗27-33
• 2.3 小結(jié)33
• 2.4 實驗部分33-42
• 2.4.1 合成實驗33-37
• 2.4.2 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的性質(zhì)實驗37-42
• 第三章 氨基酸二肽陽離子脂質(zhì)的合成及基因轉(zhuǎn)染研究42-65
• 3.1 引言42-43
• 3.2 結(jié)果與討論43-57
• 3.2.1 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的合成43-45
• 3.2.2 脂質(zhì)體與DNA的作用以及脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的特性45-48
• 3.2.3 細(xì)胞毒性實驗48-50
• 3.2.4 體外基因轉(zhuǎn)染實驗50-57
• 3.3 小結(jié)57
• 3.4 實驗部分57-65
• 3.4.1 合成實驗57-63
• 3.4.2 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的性質(zhì)實驗63-65
• 第四章 電荷轉(zhuǎn)換型陽離子脂質(zhì)的合成及基因轉(zhuǎn)染研究65-83
• 4.1 引言65-66
• 4.2 結(jié)果與討論66-76
• 4.2.1 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的合成66-68
• 4.2.2 脂質(zhì)體與DNA的作用以及脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的特性68-71
• 4.2.3 細(xì)胞毒性實驗71
• 4.2.4 體外基因轉(zhuǎn)染實驗71-75
• 4.2.5 陽離子脂質(zhì)內(nèi)吞和胞內(nèi)行為75-76
• 4.3 小結(jié)76
• 4.4 實驗部分76-83
• 4.4.1 合成實驗76-82
• 4.4.2 目標(biāo)陽離子脂質(zhì)的性質(zhì)實驗82-83
• 總結(jié)83-84
• 參考文獻84-89
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況89-90
• 致謝90-91

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁光熙;文又武;朱代華;;新型基因載體—聚酰胺-胺樹狀大分子聚合物[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年13期

2 李瀟;金屬納米棒用作基因治療中的基因載體[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2004年02期

3 白晶;徐宇虹;;原子力顯微鏡研究陽離子脂質(zhì)基因載體的結(jié)構(gòu)表征[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報;2007年05期

4 要e

本文編號：254321