【摘要】：背景:隨著細(xì)胞技術(shù)的提高,使得干細(xì)胞移植研究延伸到包括輸血相關(guān)急性肺損傷在內(nèi)的各個領(lǐng)域。目的:探討痰熱清注射液聯(lián)合人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植對輸血相關(guān)急性肺損傷小鼠的保護作用及機制。方法:選取80只BALB/C雄性小鼠,隨機分為對照組、模型組、痰熱清注射液組、人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組及聯(lián)合治療組。除對照組外,其他4組制備輸血相關(guān)急性肺損傷模型。經(jīng)尾靜脈注入痰熱清注射液和人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞懸液干預(yù)24 h后,鏡下觀察各組小鼠肺組織病理形態(tài),計算肺組織濕干質(zhì)量比,ELISA測定各組小鼠支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞介素10、白細(xì)胞介素1β、腫瘤壞死因子α水平,RT-PCR、Western blot檢測肺損傷小鼠肺組織KGF-1基因和蛋白表達,TUNEL法檢測肺組織細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)模型組小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡間隔增厚、肺泡內(nèi)纖維蛋白浸潤、肺泡內(nèi)出血、支氣管壁增厚等病理變化,肺組織濕干質(zhì)量比增高,人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組以上病理變化較模型組略輕,肺組織濕干質(zhì)量比低于模型組(P0.05),聯(lián)合治療組肺組織濕干質(zhì)量比明顯低于模型組(P0.01);(2)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組小鼠肺泡灌洗液中白細(xì)胞介素10、白細(xì)胞介素1β、腫瘤壞死因子α水平均低于模型組(P0.05);聯(lián)合治療組上述各因子水平明顯低于模型組(P0.01),仍高于正常對照組(P0.05);(3)聯(lián)合治療組KGF-1基因和蛋白的表達高于人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組(P0.05),人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組高于模型組(P0.05);(4)聯(lián)合治療組凋亡細(xì)胞數(shù)低于人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組,人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植組和痰熱清注射液組低于模型組;(5)結(jié)果表明,痰熱清注射液聯(lián)合人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞移植能提高輸血相關(guān)急性肺損傷小鼠肺組織中KGF-1的表達,減輕肺部炎癥反應(yīng)及組織病理學(xué)損傷程度,減少肺組織細(xì)胞凋亡,對肺損傷具有保護作用。
[Abstract]:Background: with the development of cell technology, stem cell transplantation has been extended to various fields, including transfusion-related acute lung injury. Objective: to investigate the protective effect and mechanism of Tanreqing injection combined with human amniotic mesenchymal stem cell transplantation on transfusion-associated acute lung injury mice. Methods: 80 male BALB/C mice were randomly divided into control group, model group, Tanreqing injection group, human amniotic mesenchymal stem cell transplantation group and combined treatment group. In addition to the control group, the other four groups were used to establish the model of acute lung injury associated with blood transfusion. After injection of Tanreqing injection and human amniotic mesenchymal stem cell suspension through tail vein for 24 h, the pathological morphology of lung tissue in each group was observed under microscope, and the wet / dry mass ratio of lung tissue was calculated. The levels of interleukin-10 (IL-10), interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽) in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were measured by ELISA and the expression of KGF-1 gene and protein in lung tissue of mice with lung injury were detected by RT-PCR,Western blot. Apoptosis of lung tissue was detected by TUNEL method. Results and conclusion: (1) in the model group, the alveolar septum thickening, intraalveolar fibrin infiltration, alveolar hemorrhage, bronchial wall thickening and lung wet / dry mass ratio increased. The pathological changes were slightly lighter in the human amniotic mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group than in the model group, and the wet / dry ratio of lung tissue was lower than that in the model group (P0.05). The wet / dry weight ratio of lung tissue in the combined treatment group was significantly lower than that in the model group (P0.01). (2) the levels of IL-10, IL-1 尾, TNF- 偽 in alveolar lavage fluid of mice in human amniotic membrane mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group were lower than those in model group (P0.05); The level of the above factors in the combined treatment group was significantly lower than that in the model group (P0.01) and still higher than that in the normal control group (P0.05). (3) the expression of KGF-1 gene and protein in combined treatment group was higher than that in human amniotic mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group (P0.05). Human amniotic membrane mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group were higher than model group (P0.05). (4) the number of apoptotic cells in the combined treatment group was lower than that in the human amniotic membrane mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group, but lower in the human amniotic membrane mesenchymal stem cell transplantation group and Tanreqing injection group than in the model group. (5) the results showed that Tanreqing injection combined with human amniotic mesenchymal stem cell transplantation could increase the expression of KGF-1 in the lung tissue of mice with acute lung injury associated with blood transfusion, and alleviate the degree of lung inflammation and histopathological injury. It has protective effect on lung injury by reducing apoptosis of lung tissue.
【作者單位】： 周口市中醫(yī)院輸血科;
【分類號】：R457.1

【參考文獻】

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