AdeABC外排泵系統(tǒng)與鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥物耐藥的關(guān)系
本文選題:鮑曼不動桿菌 + 外排泵AdeABC系統(tǒng); 參考:《中南大學學報(醫(yī)學版)》2017年04期
【摘要】:目的:探討外排泵AdeABC系統(tǒng)與鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥物耐藥的關(guān)系。方法:采用美羅培南多步法體外誘導敏感鮑曼不動桿菌獲得對碳青霉烯類藥物耐藥的菌株;采用E-test法定量檢測誘導前后菌株的敏感性;羰基氰化物間氯苯腙(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone,CCCP)抑制試驗篩查外排泵;PCR及測序分析誘導前后AdeABC系統(tǒng)的調(diào)控基因adeS,adeR及主要碳青霉烯酶基因的變化;熒光定量PCR檢測誘導前后adeA,adeB,adeR和adeS基因m RNA的表達量。結(jié)果:親代敏感菌株S25595和S7257的美羅培南最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration,MIC)分別為0.38和0.25μg/m L,誘導后MIC均32μg/m L;與親代敏感株相比,誘導耐藥株adeA,adeB,adeR和adeS基因的m RNA表達量上升2.45~9.44倍,但調(diào)控基因adeS和adeR沒有基因突變或插入序列。結(jié)論:外排泵AdeABC系統(tǒng)高表達與鮑曼不動桿菌對美羅培南耐藥密切相關(guān),其表達水平升高不是由調(diào)控基因adeS和adeR序列中基因突變或插入序列引起,可能存在其他機制。
[Abstract]:Objective: to investigate the relationship between the AdeABC system of efflux pump and the resistance of Acinetobacter baumannii to carbapenems. Methods: Acinetobacter baumannii was induced by meropenem multistep method in vitro to obtain carbapenem resistant strains, and E-test method was used to detect the sensitivity of the strains before and after induction. Carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazoneuridine (CCCP) inhibition test was used to screen exudation pump PCR and sequencing to analyze the changes of AdeABC regulatory gene adeSadeR and major carbapenem enzyme genes before and after induction, and fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of adeAde BadeR and adeS gene mRNA before and after induction. Results: the minimum inhibitory concentrations (minimal inhibitory) of meropenem were 0.38 and 0.25 渭 g / mL, respectively, in parent sensitive strains S25595 and S7257, respectively, and the mics were 32 渭 g / mL after induction, and the mRNA expression of the genes of adeAde BadeR and adeS increased by 2.459.44 times compared with the susceptible strains of parental strain S25595 and S7257, and the results showed that the minimal inhibitory concentration of meropenem was 0.38 渭 g / mL and 0.25 渭 g / mL, respectively. However, the regulatory genes adeS and adeR had no mutation or insertion sequence. Conclusion: the high expression of AdeABC system in efflux pump is closely related to the resistance of Acinetobacter baumannii to meropenem, and the increased expression level of AdeABC is not caused by gene mutation or insertion sequence in the regulatory gene adeS and adeR, and there may be other mechanisms.
【作者單位】: 中南大學湘雅醫(yī)院檢驗科;
【基金】:湖南省自然科學基金(14JJ7003) 湖南省2012年科技基本建設投資計劃(湘發(fā)改高技[2012]1493號) 中南大學中央高校基本科研業(yè)務費專項資金(2013zzts317)~~
【分類號】:R446.5
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,本文編號:2057642
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