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實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在侵襲性真菌感染診斷中的價(jià)值

發(fā)布時(shí)間:2018-06-11 15:49

  本文選題:侵襲性真菌感染 + RTFQ-PCR ; 參考:《寧夏醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文


【摘要】:目的:本研究將實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Real-time Flurescent Quantitive Polymerase Chain Reaction,RTFQ-PCR)應(yīng)用于侵襲性真菌感染(Invasive fungal infection IFI)的早期診斷,旨在評(píng)價(jià)RTFQ-PCR技術(shù)在IFI早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值,為早期診斷與治療IFI提供依據(jù)。方法:1、采集寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院及心腦血管病醫(yī)院ICU科2015年5月至2016年3月IFI高�;颊�102份血清,同時(shí)收集其相關(guān)臨床資料。2、送檢血培養(yǎng)、G試驗(yàn)。3、RTFQ-PCR檢測(cè):(1)提取白色念珠菌DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增出目的基因片段并回收,然后倍比稀釋,分別計(jì)算出拷貝數(shù),最后經(jīng)RTFQ-PCR檢測(cè),由軟件繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)提取IFI高�;颊哐逯械腄NA,進(jìn)行RTFQ-PCR檢測(cè),收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。4、根據(jù)“重癥患者IFI的診斷和治療指南(2007年)”制定的診斷標(biāo)準(zhǔn),將納入的研究對(duì)象分為:確診IFI、臨床診斷IFI、擬診IFI及非IFI。將“2007年指南”作為金標(biāo)準(zhǔn),以確診和臨床診斷病例作為感染組,非IFI病例作為非感染組,將感染組和非感染組分別作為陽(yáng)性對(duì)照病例和陰性對(duì)照病例,計(jì)算RTFQ-PCR和G試驗(yàn)的敏感度(Sensitivity Se)、特異度(Specificity Sp)、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(Positive predictive value PPV)、陰性預(yù)測(cè)值(Negative predictive value NPV),分析評(píng)價(jià)RTFQ-PCR在IFI早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值。5、以血培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn),將血培養(yǎng)陽(yáng)性作為陽(yáng)性對(duì)照病例,血培養(yǎng)陰性做為陰性對(duì)照病例,計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值。結(jié)果:1、本次研究收集了102份標(biāo)本,最終共納入99份標(biāo)本做為研究對(duì)象,其中,確診IFI病例2例,臨床診斷IFI病例20例,擬診IFI病例28例,非IFI病例49例。以“2007年指南”作為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度為50%,特異度為96%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為82%,陰性預(yù)測(cè)值為84%;G試驗(yàn)的敏感度為54%,特異性為92%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為76%,陰性預(yù)測(cè)值為80%;聯(lián)合應(yīng)用RTFQ-PCR和G試驗(yàn)的敏感度為78%,特異度為88%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為70%,陰性預(yù)測(cè)值為91%。2、以血培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度為100%,特異度為88%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為15%,陰性預(yù)測(cè)值為100%。結(jié)論:1、真菌RTFQ-PCR檢測(cè)技術(shù)可以作為重癥患者IFI早期診斷的一種有效手段,在臨床上對(duì)IFI的早期診斷中具有一定的價(jià)值。2、RTFQ-PCR和G實(shí)驗(yàn)的聯(lián)合應(yīng)用,綜合診斷價(jià)值較高,可以改善IFI的早期診斷率。
[Abstract]:Objective: in this study, Real-time Flurescent quantitative Polymerase chain reaction (RTFQ-PCR) was applied to the early diagnosis of invasive fungal infection IFI, in order to evaluate the value of RTFQ-PCR in the early diagnosis of IFI and provide evidence for early diagnosis and treatment of IFI. Methods: from May 2015 to March 2016, 102 IFI high risk patients were collected from ICU department of Ningxia Medical University General Hospital and Cardiovascular and Cerebrovascular Disease Hospital. At the same time, the relevant clinical data. 2. Blood culture test. RTFQ-PCR was used to extract the DNA of Candida albicans. The target gene fragment was amplified by PCR and recovered, then the copy number was calculated by double dilution, and finally detected by RTFQ-PCR. Drawing out the standard curve by software, extracting the DNA from the serum of IFI high risk patients, detecting it by RTFQ-PCR, collecting the experimental data .4. according to the diagnostic criteria of "guidelines for the diagnosis and treatment of IFI in severe patients (2007)". The subjects were divided into four groups: confirmed IFI, clinical IFI, IFI and non IFI. The 2007 guidelines were used as the gold standard, with confirmed and clinically diagnosed cases as the infected group, non-IFI cases as the non-infected group, and the infected and non-infected groups as the positive control cases and the negative control cases, respectively. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of RTFQ-PCR and G test were calculated to evaluate the sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of RT FQ-PCR and G test. The value of RTFQ-PCR in the early diagnosis of IFI was evaluated. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of RTFQ-PCR were calculated. Results in this study, 102 specimens were collected and 99 specimens were included in the study. Among them, 2 cases were confirmed IFI cases, 20 cases were clinically diagnosed IFI cases, 28 cases were IFI cases, 49 cases were non-IFI cases. Using the 2007 Guide as the gold standard, The sensitivity of RTFQ-PCR is 50, the specificity is 96, the positive predictive value is 82, the negative predictive value is 84g, the sensitivity is 54, the specificity is 92, the positive predictive value is 76and the negative predictive value is 80. The sensitivity of the combination of RTFQ-PCR and G test is 78. The specificity is 88. The positive predictive value is 70. The negative predictive value is 91. 2. Blood culture is the gold standard. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of RTFQ-PCR were 100, 88, 15 and 100, respectively. Conclusion the detection of fungal RTFQ-PCR can be used as an effective method for the early diagnosis of IFI in severe patients. It has a certain value in the early diagnosis of IFI. The combined use of RTFQ-PCR and G test is of great value in the clinical diagnosis of IFI, and the comprehensive diagnostic value is higher. It can improve the early diagnosis rate of IFI.
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R440;R519

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本文編號(hào):2005835

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