發(fā)布時(shí)間：2018-06-07 17:49

  本文選題：金黃色葡萄球菌 + 綠膿桿菌��； 參考：《中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年05期

【摘要】：目的建立金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌和肺炎克雷伯桿菌多重PCR檢測(cè)方法,為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)菌檢測(cè)提供快速、靈敏、簡(jiǎn)便的方法。方法根據(jù)金黃色葡萄球菌nuc基因、綠膿桿菌Las I基因、肺炎克雷伯桿菌Pho E基因和細(xì)菌通用16S rRNA基因設(shè)計(jì)出特異性引物;經(jīng)過(guò)多重PCR引物濃度和退火溫度的優(yōu)化,特異性和敏感性的檢測(cè),建立多重PCR體系。應(yīng)用該P(yáng)CR體系對(duì)人工感染標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物糞便樣本進(jìn)行驗(yàn)證檢測(cè),與傳統(tǒng)檢測(cè)方法對(duì)比。結(jié)果多重PCR分別擴(kuò)增出金黃色葡萄球菌(153 bp)、綠膿桿菌(600 bp)、肺炎克雷伯桿菌(368 bp)和通用(520 bp)的目的條帶。多重敏感性為10 pg,特異性檢測(cè)未從其他細(xì)菌中檢測(cè)出目的條帶。應(yīng)用建立的多重PCR體系檢測(cè)出不同組合的人工感染標(biāo)本,從76只糞便檢測(cè)出綠膿桿菌陽(yáng)性1例,與傳統(tǒng)檢測(cè)方法結(jié)果一致。結(jié)論本文建立的多重PCR方法具有特異、靈敏、簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物的快速檢測(cè)提供了可靠的方法。
[Abstract]:Objective to establish a multiplex PCR method for the detection of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae. Methods specific primers were designed according to Staphylococcus aureus nuc gene, Pseudomonas aeruginosa Las I gene, Klebsiella pneumoniae Pho E gene and bacterial general 16s rRNA gene. A multiplex PCR system was established for the detection of specificity and sensitivity. The PCR system was used to verify and detect the samples of artificial infection and animal faeces, and compared with the traditional methods. Results the target bands of Staphylococcus aureus 153 BP, Pseudomonas aeruginosa 600 BP, Klebsiella pneumoniae 368 BP and General purpose 520 BP) were amplified by multiplex PCR. The multiplex sensitivity was 10 PG, and the target bands were not detected by specific detection from other bacteria. The multiplex PCR system was used to detect different combinations of artificially infected specimens. One case of Pseudomonas aeruginosa positive was detected from 76 feces, which was consistent with the traditional method. Conclusion the multiplex PCR method developed in this paper has the advantages of specificity, sensitivity, simplicity and rapidity, which provides a reliable method for the rapid detection of microbes in laboratory animals.
【作者單位】： 河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部;河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2015BAI07B02-05)
【分類(lèi)號(hào)】：R440

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳濟(jì)超;陳凱麗;梁國(guó)威;劉靜;席家寧;;肺炎克雷伯桿菌101株臨床分布與耐藥性分析[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年06期

2 潘慧瓊;;肺炎克雷伯桿菌臨床分布及敏感率分析[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2013年12期

3 邵怡;向戰(zhàn)蘭;;69株兒童呼吸道感染肺炎克雷伯桿菌藥敏結(jié)果分析[J];臨床合理用藥雜志;2014年08期

4 蔡篤運(yùn) ,賈杰,蘇林光,莫成錦;200株肺炎克雷伯桿菌耐藥性分析[J];海南醫(yī)學(xué);2002年10期

5 曹麗華,王慧玲,楊琳;肺炎克雷伯桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及耐藥性分析[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年03期

6 婁美萍;林平;;社區(qū)與醫(yī)院感染中肺炎克雷伯桿菌和大腸埃希菌耐藥性分析[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2012年02期

7 何紫琪;李從榮;楊艷兵;李娟;余華;;563株肺炎克雷伯桿菌臨床分布及耐藥性分析[J];海南醫(yī)學(xué);2012年07期

8 黃秋生;李璐;黃茂;;266例下呼吸道感染肺炎克雷伯桿菌的耐藥性分析[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年07期

9 鄒建話;祝愛(ài)霞;羅惠玲;麥光興;張修發(fā);;84株肺炎克雷伯桿菌耐藥性分析[J];中國(guó)婦幼保健;2006年03期

10 王運(yùn)鐸;范艷萍;張毅華;;產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯桿菌的基因型分型及耐藥分析[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2007年19期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 涂榮華;廖國(guó)祥;;37例肺炎克雷伯桿菌藥敏與臨床分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

2 陳泗虎;李昌崇;;兒童產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯桿菌耐藥基因分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國(guó)家級(jí)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

3 李亞清;嚴(yán)建平;呂火祥;胡慶豐;;連續(xù)4年對(duì)肺炎克雷伯桿菌耐藥性的監(jiān)測(cè)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸系病分會(huì)成立三十周年慶典活動(dòng)暨2008年呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

4 項(xiàng)龍;李鶯;柏振江;陶云珍;丁云芳;謝敏慧;;蘇州兒童重癥監(jiān)護(hù)病房呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎肺炎克雷伯桿菌耐藥分析[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會(huì)暨浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)、兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國(guó)家級(jí)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

5 顏碧清;殷穎杰;陶靜;;2008-2010年ICU內(nèi)肺炎克雷伯桿菌耐藥性監(jiān)測(cè)分析[A];首屆西湖重癥醫(yī)學(xué)論壇暨2011年浙江省重癥醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

6 蓋磊;顏碧清;江潔曙;王珊珊;殷穎杰;厲旭光;方晶晶;陶靜;;2008-2010年ICU內(nèi)肺炎克雷伯桿菌耐藥性監(jiān)測(cè)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一屆重癥心臟全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)暨第二屆西湖重癥醫(yī)學(xué)論壇、2013年浙江省重癥醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

7 黃永茂;劉恩芹;鐘利;林雁;史小玲;;產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯桿菌耐藥性及其CTX-M型ESBL檢測(cè)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 游雪甫;不控制細(xì)菌耐藥，可能無(wú)藥可用[N];人民日?qǐng)?bào);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 徐艷玲;耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯桿菌耐藥機(jī)制及同源性分析[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

2 黃金梅;臨床分離80株肺炎克雷伯桿菌的藥敏檢測(cè)及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶相關(guān)耐藥基因的檢測(cè)[D];川北醫(yī)學(xué)院;2016年

3 魏繁;中性粒細(xì)胞胞外陷阱在細(xì)菌性膿毒癥中的作用及體外形成的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2016年

4 李君杰;多重耐藥肺炎克雷伯桿菌耐藥機(jī)制及臨床特點(diǎn)研究[D];浙江大學(xué);2012年

5 林雪梅;重癥醫(yī)學(xué)科肺炎克雷伯桿菌耐藥性分析[D];浙江大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：1992161