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產KPC肺炎克雷伯菌檢測方法構建與耐藥機制

發(fā)布時間:2018-05-19 21:22

  本文選題:碳青酶烯酶 + 肺炎克雷伯菌; 參考:《安徽醫(yī)科大學學報》2017年08期


【摘要】:目的探討產肺炎克雷伯型碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌檢測方法以及肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制、可能的治療藥物。方法選取K-B法證實的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌36株納入本研究,使用改良Hodge試驗、Carba NP試驗對菌株進行驗證,隨后采用PCR擴增、產物瓊脂糖凝膠電泳實驗,并對電泳陽性條帶進行基因測序鑒定。結果 K-B法藥敏試驗顯示36株耐碳氫烯類肺炎克雷伯菌,隨后行Hodge驗證,33株(91.7%)是產KPC肺炎克雷伯菌,對碳氫烯類耐藥而對替加環(huán)素及米諾環(huán)素仍然敏感。對Hodge試驗陽性33株再行Carba NP試驗確證,其中27株(87.9%)陽性,6株(12.1%)陰性;對Hodge試驗陽性33株行PCR擴增及電泳實驗,共有27株出現(xiàn)目標條帶(340bp)提示陽性,與Carba NP試驗結果相一致。對出現(xiàn)目標條帶的27株肺炎克雷伯菌再進行KPC-2耐藥基因PCR擴增產物測序,均為KPC-2型耐藥基因。結論 K-B法藥敏試驗加隨后改良Hodge試驗驗證對于篩查、發(fā)現(xiàn)KPC肺炎克雷伯菌具有較高的符合度,為發(fā)現(xiàn)KPC肺炎克雷伯菌有效篩查方法。K-B法藥敏試驗證實對KPC肺炎克雷伯菌,替加環(huán)素等可能是有效治療的藥物之一。Hodge試驗檢測的KPC肺炎克雷伯菌,存在12.1%(6/33)的假陽性率。Carba NP試驗及PCR擴增檢測一致性好,具有確證產KPC肺炎克雷伯菌作用。隨后的測序研究結果表明檢測出的KPC肺炎克雷伯菌均為KPC-2,該型是引起肺炎克雷伯菌對碳青酶烯酶耐藥的主要機制。
[Abstract]:Objective to investigate the detection methods of Klebsiella pneumoniae (KPC) pneumonia and the mechanism of Klebsiella pneumoniae resistance to carbapenems, the possible therapeutic drugs. Methods 36 strains of Klebsiella pneumoniae resistant to carbapenem pneumonia confirmed by K-B method were selected, and the modified Hodge test and Carba NP test were used. The plant was verified by PCR amplification, agarose gel electrophoresis and gene sequencing of the electrophoresis positive bands. Results the K-B assay showed that 36 strains of Klebsiella pneumoniae resistant to carbenol, followed by Hodge, 33 (91.7%) were KPC pneumonia KK Lei Bojun, and carbenes were resistant to tetracycline and rice. The 33 strains of Hodge test were confirmed by Carba NP test, of which 27 (87.9%) positive and 6 (12.1%) negative, 33 strains of Hodge test positive for PCR amplification and electrophoresis test, 27 of the target bands (340bp) were positive, and the results were in accordance with the Carba NP test results. The 27 strains of Klebsiella pneumoniae appeared in the target band. Then the KPC-2 resistant gene PCR amplified products were sequenced and all were KPC-2 type resistance genes. Conclusion the K-B method of drug sensitivity test plus the subsequent improved Hodge test proved that the KPC pneumonia Klebsiella pneumoniae has a higher coincidence, and the effective screening method for the detection of Klebsiella pneumoniae of KPC pneumonia was found in the.K-B method drug sensitivity test for KPC pneumonia, which was proved to be a substitute for Klebsiella pneumoniae. KPC pneumonia Klebsiella pneumoniae, one of the drugs for effective treatment, was detected by.Hodge test. There was a false positive rate of 12.1% (6/33),.Carba NP test and PCR amplification test, which confirmed the effect of Klebsiella pneumoniae. The result of sequencing showed that all Klebsiella pneumoniae was KPC-2, and this type was The main mechanism of Klebsiella pneumoniae resistance to C - tase is caused by Klebsiella pneumoniae.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院呼吸內科;安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院檢驗科;安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院感染辦;
【基金】:國家自然科學基金(編號:81171618)
【分類號】:R446.5

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