本文關(guān)鍵詞： 碳青霉烯酶 改良Hodge試驗 Carba NP試驗 快速Carba NP試驗 改良碳青霉烯失活法 抑制劑增強(qiáng)改良碳青霉烯失活法　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:分析培養(yǎng)時間、培養(yǎng)基對受試菌株Carba NP試驗(CNP)的影響;研發(fā)快速Carba NP試驗(RCNP),對其檢測碳青霉烯酶的效果進(jìn)行評價,并同改良Hodge試驗(MHT)、Carba NP試驗、改良碳青霉烯失活法(m CIM)對比分析;研發(fā)“0.5+9h孵育模式”,對其在m CIM中的臨床應(yīng)用價值進(jìn)行評估;研發(fā)抑制劑增強(qiáng)改良碳青霉烯失活法(im CIM),對其在B類碳青霉烯酶檢測中的價值進(jìn)行探討,并同EDTA紙片增效試驗(EDPT)對比分析。以期在流行病學(xué)調(diào)查、院內(nèi)感染控制、耐藥基因分型方面為臨床實驗室提供多指標(biāo)分析研究。方法:1臨床分離的264株病原菌作為研究對象,其中肺炎克雷伯菌69株、大腸埃希菌60株、鮑曼不動桿菌68株、銅綠假單胞菌67株,使用血瓊脂平板培養(yǎng)6h、12h、24h及保存7d的菌株行Carba NP試驗。2受試菌株轉(zhuǎn)種于中國藍(lán)瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、MH平板、營養(yǎng)瓊脂平板、含鋅離子的營養(yǎng)瓊脂平板分別進(jìn)行培養(yǎng),行Carba NP試驗檢測碳青霉烯酶。3自制碳青霉烯酶檢測液,建立快速Carba NP試驗,采用研磨法代替孵育受試菌株,以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),并同改良Hodge試驗、Carba NP試驗及改良碳青霉烯失活法比較。4采用“0.5+9h孵育模式”行m CIM檢測碳青霉烯酶,采用im CIM和EDPT篩查B類碳青霉烯酶,應(yīng)用一致性檢驗、Mc Nemarχ2檢驗、Wilcoxon符號秩和檢驗及ROC曲線進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析。結(jié)果:1培養(yǎng)24h菌株行Carba NP試驗敏感度和特異度分別為95.1%(121/144)和96.7%(116/120)。6h和12h培養(yǎng)的菌株行Carba NP試驗敏感度分別為84.0%(121/144)和91.7%(132/144),相比24h培養(yǎng)的菌株敏感度有所下降,但其特異度仍為96.7%(116/120),與24h培養(yǎng)菌株無差別。所有菌株儲存7天后Carba NP試驗結(jié)果均無變化,與24h培養(yǎng)菌株的敏感度和特異度一致。6h、12h、24h培養(yǎng)的菌株Kappa值分別為0.796、0.878、0.916。2血瓊脂平板上分離菌株行Carba NP試驗敏感度和特異度分別為95.1%(137/144)、95.8%(115/120),Kappa值0.908;選擇培養(yǎng)基(中國藍(lán)瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板)的敏感度分別為87.5%(126/144)、83.3%(120/144),Kappa值分別為0.810、0.758;MH平板的敏感度和特異度分別為88.2%(127/144)、95.0%(114/120),Kappa值0.826;營養(yǎng)瓊脂平板的敏感度僅為79.9%(115/144),Kappa值0.714;含鋅離子的營養(yǎng)瓊脂平板敏感度有所提高,為93.8%(135/144),Kappa值0.855。3改良Hodge試驗敏感度和特異度分別為75.0%(108/144)、87.5%(105/120),Kappa值0.616;Carba NP試驗敏感度和特異度分別為91.7%(132/144)、97.5%(117/120),Kappa值0.886;改良碳青霉烯失活法敏感度和特異度分別為94.5%(136/144)、97.5%(117/120),Kappa值0.916;快速Carba NP試驗敏感度和特異度分別為89.6%(129/144)、99.2%(119/120),Kappa值0.879。采用Mc Nemarχ2檢驗對CNP、CIM及RCNP進(jìn)行比較,其χ2值分別為244.58、218.51,P值均0.01。4采用“0.5+9h孵育模式”行m CIM對A、B類碳青霉烯酶有較高的檢出率,im CIM敏感度和特異度分別為85.71%(66/77)和97.86%(183/187),Kappa值0.859;EDPT敏感度和特異度分別為66.23%(51/77)和88.77%(166/187),Kappa值0.561。im CIM抑菌圈差值(Δdim CIM)與EDPT抑菌圈差值(Δd EDPT)有差別,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。im CIM與EDPT的ROC曲線下面積分別為0.988(95%CI:0.977~0.999)、0.936(95%CI:0.909~0.963)。結(jié)論:1 Carba NP試驗對于產(chǎn)A類碳青霉烯酶的菌株,培養(yǎng)6h、12h及保存7d的菌株同培養(yǎng)24h無差別,在1個工作日內(nèi)即可明確菌株是否產(chǎn)酶,但對產(chǎn)B、D類碳青霉烯酶菌株的檢出率有一定影響。2采用血瓊脂平板上生長的菌株行Carba NP試驗?zāi)軌驕?zhǔn)確、快速的檢測出產(chǎn)碳青霉烯酶菌株,采用麥康凱瓊脂平板、中國藍(lán)瓊脂平板、MH平板、營養(yǎng)瓊脂平板上生長的菌株行Carba NP試驗檢測碳青霉烯酶易導(dǎo)致假陰性。3快速Carba NP試驗通過用研磨法代替孵育受試菌株,15min內(nèi)即可發(fā)現(xiàn)產(chǎn)酶菌株,較Carba NP試驗更為快速,提高了院內(nèi)感染監(jiān)測的時效性,有利于大批量的流行病學(xué)調(diào)查。4 Carba NP試驗相比改良Hodge試驗操作簡單、分析速度快、適用范圍廣、敏感度和特異度高,有利于及時準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)產(chǎn)碳青霉烯酶菌株,并對B類碳青霉烯酶有較高的檢出率。5改良碳青霉烯失活法是一種廉價、高效、穩(wěn)定的碳青霉烯酶檢測方法,有助于提高產(chǎn)碳青霉烯酶菌株的檢出率,在醫(yī)院感染監(jiān)控中有重要價值。6改良碳青霉烯失活法“0.5+9h孵育模式”的建立可為早期院感控制提供依據(jù),im CIM較EDPT用于檢測B類碳青霉烯酶敏感度、特異度較高,結(jié)果易于觀察判斷,且其步驟簡單,易于操作,適合在臨床工作中開展。
[Abstract]:Objective : To analyze the effect of culture time and culture medium on Carba NP assay ( CNP ) of the tested strain , develop fast Carba NP test ( RCNP ) , evaluate the effect of Carba NP assay ( RCNP ) , and compare it with modified Hodge test ( MHT ) , Carba NP test and modified C - penienem - loss method ( m CIM ) . The results showed that the sensitivity and specificity of Carba NP were 95.1 % ( 121 / 144 ) and 91.7 % ( 132 / 144 ) respectively . The results showed that the sensitivity and specificity of Carba NP were 95.7 % ( 121 / 144 ) and 97.7 % ( 132 / 144 ) respectively . The sensitivity and specificity of CIM and EDPT were 85.71 % ( 66 / 77 ) and 97.86 % ( 183 / 187 ) , Kappa value 0.859 , EDPT sensitivity and specificity were 66.23 % ( 51 / 77 ) and 88.77 % ( 166 / 187 ) , Kappa value 0.561 . im CIM bacteriostatic ring difference ( 螖dim CIM ) was 0.988 ( 95 % CI : 0.977 ~ 0.999 ) , 0.9936 ( 95 % CI : 0.909 ~ 0.9963 ) , respectively . Conclusion : 1 Carba NP assay is a cheap , efficient and stable method for the detection of Carbapenem - producing strains .

【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R446.5

【參考文獻(xiàn)】

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2 鐘敏;黃文芳;;耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌產(chǎn)OXA酶的研究進(jìn)展[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2013年01期

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本文編號：1450552