發(fā)布時(shí)間：2018-01-03 18:12

  本文關(guān)鍵詞：氟化多肽嵌段共聚物的合成及其基因傳遞性能研究　出處：《中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：基因治療已經(jīng)得到廣泛地關(guān)注與研究�；蛑委熗ㄟ^將外源的正�；�?qū)氚屑?xì)胞,來治療一系列因基因缺陷或異常而引起的疾病,比如遺傳性疾病、綜合性免疫缺陷癥和癌癥等。裸露的基因不能直接進(jìn)入靶細(xì)胞,因?yàn)樗鼤?huì)被生物體內(nèi)的核酸酶分解,所以尋求安全高效的基因傳遞載體是該領(lǐng)域科學(xué)研究中的關(guān)鍵問題。陽離子聚合物因其安全性高并且設(shè)計(jì)靈活易于制備等優(yōu)點(diǎn)被廣泛地用作基因載體。陽離子聚合物可以通過靜電作用結(jié)合帶負(fù)電的基因形成復(fù)合物納米粒子并將其運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)。但是在人的生理環(huán)境下,由于血清蛋白和鹽的吸附作用,形成的復(fù)合物納米粒子容易聚集和降解,導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)染效率較低并引起較高的毒性,而且傳統(tǒng)的陽離子聚合物進(jìn)入細(xì)胞后會(huì)增加細(xì)胞內(nèi)的活性氧濃度使細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激,導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)染效率降低。因此設(shè)計(jì)合成具有良好生理穩(wěn)定性和生物相容性的基因傳遞系統(tǒng)尤為重要。本論文設(shè)計(jì)合成了用聚乙二醇和全氟碳鏈修飾的生物還原性聚賴氨酸基因載體,并研究了其生理穩(wěn)定性和抗血清能力;還構(gòu)建了樹枝硫醚修飾的響應(yīng)性聚乙烯亞胺基因載體,研究了其活性氧自清除效果和基因轉(zhuǎn)染能力。具體研究工作如下:通過伯氨基引發(fā)氨基酸環(huán)內(nèi)酸酐(NCA)開環(huán)聚合合成了一種新的聚乙二醇-聚賴氨酸-聚半胱氨酸三嵌段共聚物,并且利用聚半胱氨酸側(cè)鏈的巰基通過二硫鍵交換反應(yīng)接枝部分全氟碳鏈。聚賴氨酸嵌段的氨基帶有正的電荷,能很好地與帶負(fù)電的基因結(jié)合(在N/P比為2的條件下即可完全結(jié)合)并形成復(fù)合物的核,聚乙二醇在復(fù)合物核外形成一種冠狀外殼增加了復(fù)合物的抗血清能力,并且全氟碳鏈的引入增加了該聚合物與基因的復(fù)合物的細(xì)胞內(nèi)吞并且顯著提高了復(fù)合物的生理穩(wěn)定性。復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞后,在細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的作用下,聚合物上的二硫鍵斷裂促進(jìn)了基因的釋放。研究表明此聚合物與基因的復(fù)合物有良好的生理穩(wěn)定性并且在50%的血清含量下仍然具有較高的基因轉(zhuǎn)染效率(293T細(xì)胞,35%),并且該聚合物細(xì)胞毒性較低并有良好的生物相容性。還設(shè)計(jì)了用二硫鍵連接的支化聚乙烯亞胺和樹枝硫醚聚合物,該聚合物可以組裝成納米膠束,并且疏水的樹枝硫醚部分具有活性氧響應(yīng)性,該納米膠束有很好的DNA結(jié)合能力(在N/P比為1的條件下即可完全結(jié)合)和活性氧自清除能力,實(shí)現(xiàn)了更高的基因轉(zhuǎn)染效率(293T細(xì)胞,約90%)。
[Abstract]:Gene therapy has been widely used as gene carrier by introducing exogenous normal gene into target cell to treat a series of diseases caused by gene defect or abnormality , such as hereditary diseases , comprehensive immunodeficiency syndrome and cancer .

【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R450;O631

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本文編號：1375007