本文關(guān)鍵詞：自感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞對(duì)腹外側(cè)視前區(qū)的突觸傳遞及腹外側(cè)視前區(qū)的微環(huán)路功能研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的鑒定腹外側(cè)視前區(qū)(ventrolaterol preoptic nucleus, VLPO)神經(jīng)元的類(lèi)型,揭示不同類(lèi)型VLPO神經(jīng)元晝夜發(fā)放的規(guī)律；研究自感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(intrinsically photosensitive retinal ganglion cells,ipRGCs)對(duì)VLPO投射的突觸傳遞方式；研究VLPO區(qū)域內(nèi)不同類(lèi)型神經(jīng)元間的微環(huán)路功能連接。方法1.VLPO區(qū)域神經(jīng)元的鑒定及其晝夜發(fā)放4-6周齡野生型小鼠新鮮腦片,根據(jù)形態(tài)、對(duì)藥物去甲腎上腺素的響應(yīng)及電特性對(duì)VLPO腦區(qū)的神經(jīng)元進(jìn)行鑒定；膜片鉗方式記錄VLPO區(qū)域的神經(jīng)元在白天的11：00～16：00以及夜間的22：00～02：00動(dòng)作電位的發(fā)放；采用t檢驗(yàn)對(duì)神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏陌l(fā)放頻率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.ipRGCs對(duì)VLPO的突觸傳遞研究1.2月齡opn4-cre;Rosa-lsl-ChR2-eYFP(Ai32)小鼠新鮮腦片,用470 nm藍(lán)光激發(fā)iPRGCs在VLPO區(qū)域的突觸末梢,電壓鉗或電流鉗模式下記錄SCN及VLPO區(qū)域神經(jīng)元的突觸后電流或電壓；3.VLPO區(qū)域內(nèi)的微環(huán)路連接研究4-6周齡Galanin-cre;Rosa-TDT小鼠新鮮腦片,同時(shí)分別鉗制1個(gè)不同類(lèi)型VLPO區(qū)域神經(jīng)元,即中間神經(jīng)元與促睡眠神經(jīng)元,電流鉗模式下刺激促睡眠神經(jīng)元使其產(chǎn)生動(dòng)作電位,電壓鉗模式下觀察中間神經(jīng)元的響應(yīng)。結(jié)果1.在VLPO鑒定出兩類(lèi)神經(jīng)元,一類(lèi)形態(tài)為多極三角形,其閾值有LTS(low-threshold spike)特性的去甲腎上腺素抑制性神經(jīng)元；一類(lèi)形態(tài)呈兩極梭形,其閾值無(wú)LTS特性的去甲腎上腺素興奮性神經(jīng)元。在記錄的59個(gè)VLPO神經(jīng)元中，有LTS特性的神經(jīng)元有44個(gè),無(wú)LTS特性的有15個(gè)；t檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)具有LTS特性的去甲腎上腺素抑制神經(jīng)元白天AP的發(fā)放頻率明顯高與夜間AP的發(fā)放頻率(P0.01)；無(wú)LTS特性的去甲腎上腺素興奮神經(jīng)元白天AP的發(fā)放頻率也明顯高于夜晚AP的發(fā)放頻率(P0.05)；2.在記錄的30個(gè)VLPO神經(jīng)元中,對(duì)470 nm藍(lán)光刺激有直接響應(yīng)的神經(jīng)元數(shù)量為2個(gè),根據(jù)神經(jīng)元的電特性及對(duì)藥物的響應(yīng),發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)神經(jīng)元都是促睡眠神經(jīng)元,并且藍(lán)光激發(fā)的iPRGCs突觸末梢遞質(zhì)的釋放對(duì)促睡眠神經(jīng)元的作用是興奮性的；3.應(yīng)用雙電極膜片鉗方式觀察的25對(duì)VLPO神經(jīng)元中,未檢測(cè)到相互之間有功能連接的神經(jīng)元。結(jié)論1. VLPO腦區(qū)存在兩類(lèi)神經(jīng)元,這兩類(lèi)神經(jīng)元的白天AP發(fā)放頻率皆高于夜間AP發(fā)放頻率,提示兩類(lèi)神經(jīng)元都參與了晝夜節(jié)律的調(diào)控；2. ipRGCs與VLPO之間有直接的功能連接,藍(lán)光可能通過(guò)直接興奮VLPO區(qū)域的促睡眠神經(jīng)元參與睡眠與覺(jué)醒的調(diào)控,為臨床光治療睡眠障礙提供了功能學(xué)證據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R740

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本文編號(hào)：1327528