本文關鍵詞：自感光神經節(jié)細胞對腹外側視前區(qū)的突觸傳遞及腹外側視前區(qū)的微環(huán)路功能研究　出處：《安徽醫(yī)科大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的鑒定腹外側視前區(qū)(ventrolaterol preoptic nucleus, VLPO)神經元的類型,揭示不同類型VLPO神經元晝夜發(fā)放的規(guī)律；研究自感光神經節(jié)細胞(intrinsically photosensitive retinal ganglion cells,ipRGCs)對VLPO投射的突觸傳遞方式；研究VLPO區(qū)域內不同類型神經元間的微環(huán)路功能連接。方法1.VLPO區(qū)域神經元的鑒定及其晝夜發(fā)放4-6周齡野生型小鼠新鮮腦片,根據形態(tài)、對藥物去甲腎上腺素的響應及電特性對VLPO腦區(qū)的神經元進行鑒定；膜片鉗方式記錄VLPO區(qū)域的神經元在白天的11：00～16：00以及夜間的22：00～02：00動作電位的發(fā)放；采用t檢驗對神經元動作電位的發(fā)放頻率進行統(tǒng)計學分析。2.ipRGCs對VLPO的突觸傳遞研究1.2月齡opn4-cre;Rosa-lsl-ChR2-eYFP(Ai32)小鼠新鮮腦片,用470 nm藍光激發(fā)iPRGCs在VLPO區(qū)域的突觸末梢,電壓鉗或電流鉗模式下記錄SCN及VLPO區(qū)域神經元的突觸后電流或電壓；3.VLPO區(qū)域內的微環(huán)路連接研究4-6周齡Galanin-cre;Rosa-TDT小鼠新鮮腦片,同時分別鉗制1個不同類型VLPO區(qū)域神經元,即中間神經元與促睡眠神經元,電流鉗模式下刺激促睡眠神經元使其產生動作電位,電壓鉗模式下觀察中間神經元的響應。結果1.在VLPO鑒定出兩類神經元,一類形態(tài)為多極三角形,其閾值有LTS(low-threshold spike)特性的去甲腎上腺素抑制性神經元；一類形態(tài)呈兩極梭形,其閾值無LTS特性的去甲腎上腺素興奮性神經元。在記錄的59個VLPO神經元中，有LTS特性的神經元有44個,無LTS特性的有15個；t檢驗分析發(fā)現具有LTS特性的去甲腎上腺素抑制神經元白天AP的發(fā)放頻率明顯高與夜間AP的發(fā)放頻率(P0.01)；無LTS特性的去甲腎上腺素興奮神經元白天AP的發(fā)放頻率也明顯高于夜晚AP的發(fā)放頻率(P0.05)；2.在記錄的30個VLPO神經元中,對470 nm藍光刺激有直接響應的神經元數量為2個,根據神經元的電特性及對藥物的響應,發(fā)現這兩個神經元都是促睡眠神經元,并且藍光激發(fā)的iPRGCs突觸末梢遞質的釋放對促睡眠神經元的作用是興奮性的；3.應用雙電極膜片鉗方式觀察的25對VLPO神經元中,未檢測到相互之間有功能連接的神經元。結論1. VLPO腦區(qū)存在兩類神經元,這兩類神經元的白天AP發(fā)放頻率皆高于夜間AP發(fā)放頻率,提示兩類神經元都參與了晝夜節(jié)律的調控；2. ipRGCs與VLPO之間有直接的功能連接,藍光可能通過直接興奮VLPO區(qū)域的促睡眠神經元參與睡眠與覺醒的調控,為臨床光治療睡眠障礙提供了功能學證據。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R740

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