本文關(guān)鍵詞：人凝血因子Ⅸ-R338A高活性突變體在畢赤酵母中的表達(dá)及活性測(cè)定

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【摘要】：目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人類內(nèi)源性凝血過(guò)程中起著非常重要的作用。hFⅨ表達(dá)量絕對(duì)或相對(duì)不足會(huì)導(dǎo)致B型血友病。本研究用畢赤酵母生產(chǎn)重組高活性突變體hFⅨ-R338A。方法首先構(gòu)建pPICZaA-hFⅨ-R338A酵母分泌表達(dá)載體,其次將其用電轉(zhuǎn)化入畢赤酵母SMD1168中,再次利用G418抗藥性的能力篩選表達(dá)量高的單克隆重組菌株,培養(yǎng)并將表達(dá)產(chǎn)物純化,稀釋后檢測(cè)其凝血活性。結(jié)果通本研究獲得的重組SMD1168-hFⅨ-R338A表達(dá)量達(dá)到(90-120)mg/L;比活力約為人血中野生型hFⅨ凝血活性的(38.93±5.1)%,比野生型的酵母重組hFⅨ高6.85倍。結(jié)論人凝血因子Ⅸ高活性突變體R338A是潛在的天然凝血因子替代品。
【作者單位】： 山東省交通醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【分類號(hào)】：R440
【正文快照】： B型血友病是1種凝血因子Ⅸ異常的X染色體連鎖的遺傳病,其原因是凝血因子Ⅸ絕對(duì)或相對(duì)缺乏,導(dǎo)致不同程度的出血傾向[1]。在內(nèi)源性凝血機(jī)制中凝血因子Ⅸ水解成由輕鏈和重鏈組成的h FⅨa。h FⅨa可以綁定凝血因子Ⅷ和其他因子共同激活凝血因子Ⅹ從而啟動(dòng)下游的凝血反應(yīng)。因此,在

【相似文獻(xiàn)】

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1 李朝霞,王宏偉,王寧遂,盧大儒,邱信芳,薛京倫;人凝血因子 Ⅸ cDNA 在 C_2C_(12) 細(xì)胞中的表達(dá)[J];中華兒科雜志;1998年06期

2 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：1280739