本文關(guān)鍵詞：聚吡咯差異修飾的納米材料應(yīng)用于血清中不同類型標(biāo)志物檢測的傳感器研究

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【摘要】：導(dǎo)電聚合物(conducting polymer)又稱導(dǎo)電高分子材料,它是指通過復(fù)合或摻雜等手段得到的一類具有良好導(dǎo)電性能的聚合物。在導(dǎo)電聚合物中,聚吡咯(PPy)由于具有優(yōu)良的導(dǎo)電性,成膜性,穩(wěn)定性和杰出的生物相容性,目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于電化學(xué)傳感器的構(gòu)建。而電化學(xué)傳感器相對于傳統(tǒng)的分析方法而言,其具有操作簡單,成本低,無毒環(huán)保,檢測限低,靈敏度高等優(yōu)勢�；诖�,本研究根據(jù)人血清標(biāo)志物分子結(jié)構(gòu)的差異,利用導(dǎo)電聚合物聚吡咯為基礎(chǔ)設(shè)計了兩類傳感器,一類是根據(jù)羧基聚吡咯的功能化表面構(gòu)建的免疫傳感器,另一類是利用合金聚吡咯的電催化活性構(gòu)建的生物傳感器。具體研究工作如下:1.多壁碳納米管表面原位聚合羧酸吡咯的SAA免疫傳感器的構(gòu)建與應(yīng)用本研究選擇用離子液(IL)和殼聚糖(Chit)分散的多壁碳納米管(MWCNTS)作為電極的基底材料,其不但能夠大大提升該傳感器的導(dǎo)電性能而且能夠解決MWCNTS本身溶解性差、易于團聚的缺點。之后在均勻分散的mwcnts表面采用循環(huán)伏安法(cv)原位聚合吡咯,采用cv方式聚合,能夠控制ppy在電極表面的聚合厚度同時避免衡電壓聚合導(dǎo)致的膜表面粗糙。最后為了成功固定抗體在生物膜表面,我們用衡電壓法聚合羧酸吡咯,使其ppy表面功能化帶有大量的羧基官能團,根據(jù)羧基和氨基的酰氨反應(yīng),成功固定人血清淀粉樣蛋白a(saa)抗體。本研究通過掃描電鏡(sem)表征了ppy修飾在mwcnts表面后的一系列變化,包括修飾了羧基官能團后形貌的改變以及固定了抗體之后的進一步變化。此外,我們還通過傅里葉紅外光譜技術(shù)(ftir)證明了羧基官能團的成功修飾。本研究通過條件的優(yōu)化,實現(xiàn)了該免疫傳感器的低檢測限和高靈敏度。從實驗結(jié)果來看,在0.001ngml~(-1)到900ngml~(-1)范圍內(nèi),該免疫傳感器線性良好,檢測限低至0.3ngml~(-1)(s/n=3)。該工作和市面上主流的saa檢測方法elisa結(jié)果進行比較,準(zhǔn)確度有良好的一致性,但靈敏度和檢測范圍更好。表明該研究能夠為臨床工作快速靈敏的檢測炎癥標(biāo)志物帶來便利。2.基于雙金屬聚吡咯/葡萄糖氧化酶修飾的電化學(xué)傳感器的構(gòu)建及血清中唾液酸化聚糖的檢測本實驗利用吡咯單體的還原特性,用化學(xué)合成的方法,成功還原氯金酸和氯鉑酸,制得雙金屬聚吡咯。該納米復(fù)合膜不僅具備聚吡咯本身優(yōu)良的導(dǎo)電性和成膜性,并且由于金鉑雙金屬的存在使其具有電催化活性。之后為了增強電化學(xué)信號,用葡萄糖氧化酶(gox)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的封閉劑—牛血清蛋白(bsa),在葡萄糖和氧氣存在的條件下,GOx能夠催化葡萄糖生成葡萄糖醛酸,從而放大電化學(xué)信號。在檢測靶標(biāo)方面,我們利用接骨木凝集素(SNA)與α2,6-唾液酸化聚糖的特異性識別,對血清中α2,6-唾液酸化聚糖實現(xiàn)了靈敏檢測。整個檢測體系在磷酸緩沖鹽溶液(PBS)中完成,通過滴加含有葡萄糖和過氧化氫的PBS溶液來定量。在最優(yōu)的實驗條件下,該電化學(xué)傳感器在0.01 pg mL~(-1)到800 ng mL~(-1)濃度范圍內(nèi)對α2,6-唾液酸化聚糖有較好的線性響應(yīng),最低檢測限達(dá)到0.003 pg mL~(-1)(S/N=3)。該電化學(xué)傳感器的成功構(gòu)建,為臨床上簡便、快捷的檢測α2,6-唾液酸化聚糖提供了可能。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.1;TP212

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6 閆長領(lǐng);劉t

本文編號：1264000