本文關(guān)鍵詞：基于突變阻滯擴(kuò)增系統(tǒng)的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)檢測(cè)幽門螺桿菌23S rRNA基因突變及其評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： 突變阻滯擴(kuò)增系統(tǒng) 實(shí)時(shí)熒光PCR 基因突變

【摘要】：目的探索突變阻滯擴(kuò)增系統(tǒng)(ARMS)聯(lián)合實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)用于檢測(cè)幽門螺桿菌23S rRNA基因突變的可行性。方法以幽門螺桿菌23S rRNA基因2143位點(diǎn)的兩種基因型(野生型為AAA,突變型為AGA)質(zhì)粒DNA為研究模型,設(shè)計(jì)ARMS引物同時(shí)對(duì)實(shí)時(shí)熒光PCR體系進(jìn)行優(yōu)化,對(duì)突變阻滯擴(kuò)增系統(tǒng)聯(lián)合實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)的基因分型特異性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果在與模板匹配的ARMS引物3'端附近故意引入錯(cuò)配堿基,降低該ARMS引物濃度和鎂離子濃度,并采用兩步PCR循環(huán)的反應(yīng)程序,使ARMS引物的特異性增強(qiáng),能夠得到清晰的基因分型結(jié)果。結(jié)論這種基于突變阻滯擴(kuò)增系統(tǒng)的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)便,特異性較好,并有望在此基礎(chǔ)上發(fā)展成為適合臨床應(yīng)用的突變檢測(cè)方法。
【作者單位】： 生物芯片上海國(guó)家工程研究中心;
【基金】：上海市浦東新區(qū)科技發(fā)展基金(PKJ2015-S)
【分類號(hào)】：R440
【正文快照】： 基因突變是人類各種遺傳疾病和惡性腫瘤發(fā)生的根本原因,檢測(cè)與遺傳病及腫瘤發(fā)生有關(guān)的突變基因一直是醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn),它對(duì)闡明遺傳病和腫瘤發(fā)生的分子生物學(xué)基礎(chǔ)及早期診斷具有重要意義。目前傳統(tǒng)的基因檢測(cè)方法有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(polymera

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于新芬;潘勁草;汪皓秋;孟冬梅;鄭偉;張蔚;;實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌耐熱腸毒素基因[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2007年05期

2 劉金華;賀丹;史艷宇;黃宇;王麗;任常菲;;黑曲霉實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2009年03期

3 高秀潔;李杰;劉紅軍;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立和評(píng)價(jià)[J];分子診斷與治療雜志;2009年01期

4 張海平;楊莉佳;陶詩沁;趙英偉;;實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)病原真菌方法的建立及其臨床應(yīng)用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2009年12期

5 劉曉岑;金玉娟;劉渠;許欣;陳應(yīng)堅(jiān);甘麗萍;楊慧;徐亞軍;;腸出血性大腸埃希菌雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年07期

6 胡興文;實(shí)時(shí)熒光PCR影響因素分析[J];實(shí)用醫(yī)技雜志;2005年18期

7 彭雁忠;賈宏;鄒原;肖性龍;黃勝中;林鏡中;;多聯(lián)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)幾種重要腸道致病菌的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2006年12期

8 邱楊;唐麗霞;趙麗;劉建麗;;志賀氏菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑的研制[J];現(xiàn)代食品科技;2008年11期

9 張子群;謝曉峰;袁金錢;由軒;徐義剛;單琳琳;宋銘忻;;旋毛蟲實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用研究[J];檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊;2009年03期

10 鄧平建;楊冬燕;;探討降低實(shí)時(shí)熒光PCR定量分析系統(tǒng)誤差的對(duì)策[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2011年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李樹清;易建平;胡永強(qiáng);李健;王巧全;陳志飛;羅滿林;周筱華;夏謙;潘曉鐘;方怡;陳敏;;套式PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR在檢測(cè)胸膜肺炎放線桿菌上的應(yīng)用[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

2 李樹清;易建平;胡永強(qiáng);李健;王巧全;陳志飛;羅滿林;周筱華;夏謙;潘曉鐘;方怡;陳敏;;套式PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR在檢測(cè)胸膜肺炎放線桿菌上的應(yīng)用[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

3 王金玲;張瑩;王芳;李俊環(huán);賈金生;;飼料中魚源性成分實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立[A];動(dòng)物檢疫學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2010年

4 懷雁;徐麗慧;謝關(guān)林;余山紅;;水稻細(xì)菌性谷枯病菌的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)技術(shù)研究[A];第四屆中國(guó)植物細(xì)菌病害學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

5 趙曉麗;李曉霞;胡大春;邵建春;陳弟;;自建實(shí)時(shí)熒光PCR方法與傳統(tǒng)血培養(yǎng)方法的比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

6 馬榮群;宋正旭;黃粵;岳文輝;李梅;;實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)及其在植物病害檢測(cè)中的應(yīng)用[A];科技創(chuàng)新與綠色植�！袊�(guó)植物保護(hù)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

7 陳丹;潘世揚(yáng);黃s顂，

本文編號(hào)：1207033