本文關(guān)鍵詞：常州地區(qū)抗酸桿菌菌種鑒定及耐藥性研究

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【摘要】：目的:通過對常州地區(qū)收集標(biāo)本的抗酸桿菌進行菌種鑒定并開展藥敏結(jié)果分析,了解該區(qū)域抗酸桿菌菌型分布及其耐藥情況,并對其耐藥原因進行分析,擬為該區(qū)域肺結(jié)核和NTM肺病的診斷與鑒別診斷、合理用藥提供參考。方法:1.收集2011年04月~2013年03月常州�？漆t(yī)院進行抗酸桿菌菌種鑒定和耐藥性研究的標(biāo)本400份,其中300份為痰液,70份為胸腹水,30份為支氣管肺泡灌洗液。2.采用NaOH-NaCl標(biāo)本處理法對400份標(biāo)本進行標(biāo)本預(yù)處理。細(xì)菌學(xué)檢測方法進行菌型和耐藥性鑒定:(1)菌種鑒定:標(biāo)本采用BacT/Alert 3D系統(tǒng)進行分離培養(yǎng),分別做抗酸染色和革蘭染色�？顾崛旧珵殛栃詷�(biāo)本進一步采用Gen-Probe分子生物學(xué)診斷的AccuProbe探針檢測試劑盒檢測,完成NTM和MTB的菌群檢測和鑒定。(2)耐藥試驗:對分枝桿菌培養(yǎng)陽性的菌株采用絕對濃度法對六種抗結(jié)核藥物:INH(異煙肼)、RFP(利福平)、EMB(乙胺丁醇)、SM(鏈霉素)、LFX(左氧氟沙星)、AMK(丁胺卡那)進行藥敏試驗(每一種藥物有低、高兩種濃度)。3.基因芯片檢測方法:采用基因芯片檢測利福平耐藥基因rpoB位點所包含的6個基因變化情況,及異煙肼耐藥基因KatG和inhA基因啟動子各1個位點。對標(biāo)本進行核酸提取,PCR擴增及雜交進行抗酸桿菌的分離及菌種鑒定:采用LuxScan10k-B微陣列芯片掃描儀,并運行配套的芯片判別系統(tǒng),對芯片進行掃描和結(jié)果判讀。記錄判讀結(jié)果和芯片信息。結(jié)果:1.標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢測結(jié)果:400例可疑標(biāo)本中,191例可疑標(biāo)本為抗酸桿菌陽性菌株,209例可疑標(biāo)本為陰性標(biāo)本;191例抗酸桿菌陽性菌株中175例抗酸桿菌培養(yǎng)陽性菌株為mtb菌株(91.62%);16例抗酸桿菌菌株為ntm(8.38%)。2.耐藥結(jié)果:(1)mtb與ntm耐藥情況比較:175例mtb對6種抗結(jié)核藥全部敏感比例高達63.43%,對各藥的耐藥情況為16.57%對inh耐藥,12.00%對rfp耐藥,9.14%對emb耐藥,16.00%對sm耐藥,15.43%對lfx耐藥,9.14%對amk耐藥;而ntm對常用的該6種抗結(jié)核藥物敏感率較低,敏感比例僅23.08%;16例ntm菌株中僅有13例有耐藥結(jié)果,該13例ntm菌株中76.92%對inh耐藥,38.46%對rfp耐藥,53.85%對emb耐藥,61.54%對sm耐藥,61.54%對lfx耐藥,46.15%對amk耐藥。(2)mtb與ntm對不同濃度藥物敏感性存在的差異性:175例mtb中對inh、rfp、emb、sm、lfx、amk6種抗結(jié)核藥,低濃度耐藥率最高的為lfx,耐藥率為17.42%,其次依次為emb7.30%,inh7.30%,amk6.18%,sm5.62%,rfp5.06%;而13例ntm對以上6種抗結(jié)核藥呈現(xiàn)普遍耐藥,其中低濃度耐藥率最高的為emb,低濃度耐藥率高達50.00%,其次依次為lfx41.67%,sm33.33%,inh25.00%,amk25.00%,rfp16.67%。3.基因芯片檢測:(1)菌種鑒定:191例抗酸桿菌陽性標(biāo)本基因芯片法檢測陽性率100%;209例陰性標(biāo)本中檢測出mtb5例、ntm2例。(2)耐藥基因檢測:191例抗酸桿菌陽性標(biāo)本采用基因芯片檢測耐利福平與傳統(tǒng)耐藥分析檢測一致率為90.1%(172/191)、耐利福平檢測的敏感性為79.3%(23/29)、特異性為98.2%(159/162)、陽性預(yù)測值為88.5%(23/26)、陰性預(yù)測值為96.4%(159/165)。191例抗酸桿菌陽性標(biāo)本采用基因檢測耐異煙肼與傳統(tǒng)耐藥分析檢測一致率為93.7%(179/191);耐異煙肼檢測敏感性為87.1%(34/29)、特異性為95.4%(145/152)、陽性預(yù)測值為82.9%(34/41)、陰性預(yù)測值為96.0%(145/151)。191例抗酸桿菌陽性標(biāo)本耐多藥基因檢測與傳統(tǒng)耐藥分析檢測一致率為96.7%(173/191);耐多藥檢測敏感性為86.7%(52/60)、特異性為92.4%(121/131)、陽性預(yù)測值為83.9%(52/62)、陰性預(yù)測值為93.8%(121/129)。結(jié)論:1.常州地區(qū)抗酸桿菌檢出以mtb為主,分離率高于全國水平,ntm分離率低于全國水平。2.基因芯片法與傳統(tǒng)細(xì)菌菌種鑒定及耐藥性鑒定具有較高的符合率,且有快速、高效、特異等優(yōu)點,為臨床可以使用的檢測方法之一。3.不同標(biāo)本中,支氣管肺泡灌洗液檢測抗酸桿菌陽性和耐多藥檢出率較高,其次是痰液和胸腹水。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5

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本文編號：1142611