本文關鍵詞：Kallistatin蛋白對膿毒癥大鼠炎癥反應及腎組織細胞凋亡的作用

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【摘要】：目的:探討人激肽釋放酶結合蛋白(Kallistatin,KS)對膿毒癥大鼠炎癥反應及腎組織細胞凋亡的作用。法:1、清潔級SD雄性大鼠32只。體重:300±20g,隨機分成四組:假手術組(簡稱為SM,n=8);膿毒癥組(簡稱為CP,n=8);KS重組體腺病毒處理組(簡稱為KS,n=8);空腺病毒處理組(簡稱為Ad,n=8)。2、在手術造模前48h,KS組尾靜脈注射腺病毒(Ad-KS),轉染KS基因,使大鼠體內表達人KS;Ad組尾靜脈注射空腺病毒(Ad),不轉染基因,不表達人KS。3、四組大鼠造模前12h開始禁食,CP組、KS組和Ad組行盲腸結扎并穿孔,即CLP(cecal ligation and puncture)術,建立膿毒癥大鼠模型。SM組只開腹,不進行CLP手術。4、手術結束后24h~48h,將所有存活的大鼠經(jīng)心臟穿刺采血,ELI SA檢測炎癥介質;抽血后處死大鼠,快速取雙腎組織標本,觀察組織(HE染色)病理改變,Western Blot法檢測腎組織Bcl-2相關蛋白/B淋巴細胞瘤-2基因(Bax/BCL-2),腎臟損傷因子-1(Kim-1)的表達.結果:1、大鼠腎組織病理切片及HE染色:SM組:腎小球大小正常,飽滿,腎小管結構清晰,無壞死,無管型,未觀察到炎性細胞增加或浸潤的現(xiàn)象。CP組:腎小球出現(xiàn)萎縮,腎小管結構模糊,腎小管上皮細胞出現(xiàn)壞死、少量管型,有炎性細胞浸潤。KS組:有腎小管萎縮,但相較CP組少,腎小管結構欠清晰,腎小管上皮細胞有壞死,少量管型,有炎性細胞浸潤,相較CP組、Ad組輕。Ad組:腎小球萎縮,腎小管結構欠清晰,腎小管上皮細胞壞死,有管型,有炎性細胞浸潤。2、ELISA法檢測血清TNF-ɑ、IL-6水平:CP組、Ad組血清TNF-ɑ、IL-6水平較SM組明顯升高(P0.05),KS組血清TNF-ɑ、IL-6水平較CP組、Ad組明顯下降(P0.05)。3、Western blot檢測大鼠腎組織凋亡相關蛋白表達:CP組、Ad組較SM組Bax明顯增加(P0.05),但CP組、Ad組、SM組三組間的Bcl-2表達無明顯差異。KS組Bax表達較CP組和Ad組減少,而B cl-2表達較其他三組增加(P0.05)。4、Western blot檢測大鼠腎組織Kim-1蛋白:CP組、Ad組腎組織Kim-1蛋白的表達較SM組明顯增加(P0.05)。KS組腎組織Ki m-1蛋白的表達較CP組、Ad組明顯減少(P0.05)。結論:1、Kallistatin蛋白能明顯降低膿毒癥大鼠血清TNF-ɑ,IL-6水平,從而發(fā)揮抗炎作用。2、Kallistatin蛋白能降低膿毒癥大鼠腎組織細胞凋亡相關蛋白、KIM-1的表達,從而減輕腎損傷。
【關鍵詞】：人激肽釋放酶結合蛋白 膿毒癥 腎損傷 細胞凋亡
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 縮略語表10-13
• 第一章 前言13-15
• 第二章 實驗材料15-19
• 第三章 實驗方法19-25
• 第四章 實驗結果25-31
• 第五章 討論31-35
• 第六章 結論35-37
• 參考文獻37-41
• 綜述41-51
• 參考文獻47-51
• 作者攻讀學位期間的科研成果51-53
• 致謝53

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本文編號：1070271