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基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料免疫層析法應(yīng)用于體外快速檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2017-10-17 01:31

  本文關(guān)鍵詞:基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料免疫層析法應(yīng)用于體外快速檢測(cè)


  更多相關(guān)文章: 上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù) 上抗體夾心免疫反應(yīng) 免疫層析分析方法 PCT cTnI


【摘要】:最近幾年,新型納米材料因其獨(dú)特的量子尺寸效應(yīng)、體積效應(yīng)以及表面效應(yīng)在光學(xué)、磁學(xué)、力學(xué)等性能方面與其他材料的表現(xiàn)不同,在國(guó)際上引起了一場(chǎng)重大的技術(shù)變革,并且成功的用在了生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,成為目前科研工作者研究的熱點(diǎn)。特別是摻雜鑭系稀土的上轉(zhuǎn)換納米顆?梢赃B續(xù)吸收兩個(gè)或者兩個(gè)以上的較低能態(tài)光子,卻發(fā)射出單個(gè)的高能態(tài)光子,故而將長(zhǎng)波長(zhǎng)的近紅外光轉(zhuǎn)換成了短波長(zhǎng)的可見(jiàn)光,讓它作為熒光納米顆粒在生物傳感和生物成像領(lǐng)域的應(yīng)用具有很大的潛力。免疫層析技術(shù)(ICA)是在20世紀(jì)50年代出現(xiàn)的一種免疫學(xué)分析方法,免疫層析試紙條(immunochromatographic test strips, ICTSs)有效的將層析法與免疫檢測(cè)法的優(yōu)勢(shì)結(jié)合,已經(jīng)發(fā)展成為了一種精確、簡(jiǎn)便的分析技術(shù)。本論文將上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù)與免疫層析分析方法結(jié)合起來(lái),用于快速檢測(cè)大分子蛋白。研究?jī)?nèi)容如下:在論文的第二章中,我們構(gòu)建了上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù)-免疫層析分析方法技術(shù)平臺(tái)。主要從以下幾個(gè)方面展開(kāi):UCP納米顆粒的合成;UCP納米顆粒的表面修飾與活化;UCP-生物活性分子結(jié)合物的的制備;檢測(cè)試紙條的材料選擇及研制;檢測(cè)試紙條的反應(yīng)原理;檢測(cè)試紙條的制備流程。該平臺(tái)是一種簡(jiǎn)單的、高靈敏度的、通用的免疫分析平臺(tái),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大分子抗原和抗體、病原體以及微生物等的快速檢測(cè)。降鈣素原(PCT)是一種無(wú)激素活性的降鈣素(CT)的前肽物質(zhì),由116個(gè)氨基酸組成,它的分子量為13 KD。PCT在細(xì)菌感染性疾病的診斷中有更好的特異性,因此在診斷感染狀態(tài)中是十分有應(yīng)用價(jià)值的生物學(xué)指標(biāo)。在論文的第三章中上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料免疫層析試紙條用于檢測(cè)降鈣素原(PCT)的研究。肌鈣蛋白I (cTnI)在心肌損傷發(fā)生6小時(shí)后,將cTnI視為判斷發(fā)生心肌損傷的血清標(biāo)志物。肌鈣蛋白I(cTnI)的特異性在96%以上,這對(duì)于急性心肌梗死進(jìn)行臨床診斷具有非常重要的研究?jī)r(jià)值。在論文的第四章中上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料免疫層析試紙條用于檢測(cè)肌鈣蛋白I(cTnI)的研究。本課題為了對(duì)膿毒癥、敗血癥、細(xì)菌性及非細(xì)菌性的鑒別、全身性嚴(yán)重細(xì)菌感染和其他感染性疾病的進(jìn)行早期的診斷和鑒別診斷,以及為了對(duì)心肌梗死相關(guān)高敏肌鈣蛋白Ⅰ的快速檢測(cè),利用了免疫層析試紙條的方法來(lái)進(jìn)行檢測(cè),對(duì)相關(guān)疾病的預(yù)防、診斷及治療提供了可靠地依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù) 上抗體夾心免疫反應(yīng) 免疫層析分析方法 PCT cTnI
【學(xué)位授予單位】:湖南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R446.6;TQ422
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • Abstract6-10
  • 第1章 緒論10-28
  • 1.1 納米材料的簡(jiǎn)介10-12
  • 1.1.1 納米技術(shù)的起源10
  • 1.1.2 納米材料的特性10-11
  • 1.1.3 納米材料的發(fā)展?fàn)顩r及趨勢(shì)11-12
  • 1.2 稀土上轉(zhuǎn)換熒光納米材料的簡(jiǎn)介12-24
  • 1.2.1 上轉(zhuǎn)換發(fā)光簡(jiǎn)介12
  • 1.2.2 上轉(zhuǎn)換發(fā)光機(jī)制12-15
  • 1.2.3 稀土上轉(zhuǎn)換熒光納米顆粒的合成15-17
  • 1.2.4 稀土上轉(zhuǎn)換熒光納米顆粒的表面功能化17-21
  • 1.2.5 稀土上轉(zhuǎn)換熒光納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用21-24
  • 1.3 免疫層析分析方法(ICA)及其應(yīng)用24-26
  • 1.3.1 免疫層析分析方法(ICA)的簡(jiǎn)介24-26
  • 1.3.2 免疫層析分析方法的應(yīng)用26
  • 1.4 本論文主要研究?jī)?nèi)容及研究目的意義26-28
  • 1.4.1 本論文研究的內(nèi)容26-27
  • 1.4.2 本論文研究的目的意義27-28
  • 第2章 UPT-ICA技術(shù)平臺(tái)的構(gòu)建28-39
  • 2.1 前言28
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)部分28-34
  • 2.2.1 試劑和儀器28-29
  • 2.2.2 發(fā)綠光的上轉(zhuǎn)換納米顆粒NaYF_4:Yb,Er/NaYF_4的制備29-30
  • 2.2.3 上轉(zhuǎn)換納米顆粒表面修飾30
  • 2.2.4 UCP-生物活性分子結(jié)合物的的制備30-31
  • 2.2.5 UCP-ICA檢測(cè)試紙條的材料選擇及研制31-34
  • 2.3 結(jié)果與討論34-38
  • 2.3.1 UPT-ICA檢測(cè)試紙條的反應(yīng)模式和反應(yīng)原理34-35
  • 2.3.2 上轉(zhuǎn)換納米顆粒的表征35-38
  • 2.4 小結(jié)38-39
  • 第3章 上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料免疫層析試紙條用于檢測(cè)降鈣素原(PCT)的研究39-48
  • 3.1 前言39-40
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)部分40-42
  • 3.2.1 試劑材料和儀器40-41
  • 3.2.2 基于雙抗體夾心反應(yīng)模式PCT抗原檢測(cè)試紙條的制備步驟41-42
  • 3.3 結(jié)果與討論42-47
  • 3.3.1 篩選出最佳儲(chǔ)存緩沖溶液42-43
  • 3.3.2 篩選出最佳結(jié)合墊及分析膜43-44
  • 3.3.3 檢測(cè)系列濃度PCT抗原標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)據(jù)結(jié)果44-45
  • 3.3.4 檢測(cè)試紙條對(duì)PCT抗原的選擇性探究45-47
  • 3.3.5 利用試紙條檢測(cè)PCT抗原的血清樣品的回收率47
  • 3.4 小結(jié)47-48
  • 第4章 上轉(zhuǎn)換納米顆粒免疫層析試紙條用于檢測(cè)肌鈣蛋白I(CTNI)的研究48-56
  • 4.1 前言48
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)部分48-51
  • 4.2.1 試劑材料和儀器48-50
  • 4.2.2 基于雙抗體夾心反應(yīng)模式的cTnI檢測(cè)試紙條的制備步驟50-51
  • 4.3 結(jié)果與討論51-55
  • 4.3.1 篩選出最佳儲(chǔ)存緩沖溶液51-52
  • 4.3.2 檢測(cè)系列濃度cTnI抗原標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)據(jù)結(jié)果52-54
  • 4.3.3 檢測(cè)試紙條對(duì)肌鈣蛋白I(ab50803)的選擇性探究54-55
  • 4.3.4 利用試紙條檢測(cè)肌鈣蛋白I抗原的血清樣品的回收率55
  • 4.4 小結(jié)55-56
  • 結(jié)論56-57
  • 參考文獻(xiàn)57-64
  • 附錄A 攻讀學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄64-65
  • 致謝65
,

本文編號(hào):1046062

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