本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光分析新方法建立及尿液樣品中的應(yīng)用研究

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【摘要】：化學(xué)發(fā)光(Chemiluminescence,CL)分析在我國(guó)自20世紀(jì)70年代末期發(fā)展起來(lái),因其具有靈敏度高、成本低廉、操作簡(jiǎn)便、易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化及快速檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)得到快速發(fā)展,不同的化學(xué)發(fā)光新體系的研發(fā)同樣是衛(wèi)生化學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一�；瘜W(xué)發(fā)光不需要外加光源,而是反應(yīng)體系中的某些物質(zhì)吸收了反應(yīng)釋放的化學(xué)能而被激發(fā),由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)過(guò)程中將能量以光輻射的形式釋放,從而產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光,避免了環(huán)境光線的影響。但因化學(xué)發(fā)光分析法的選擇性較差,限制了其應(yīng)用,因此常將化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)手段與高效液相色譜、毛細(xì)管電泳等具有高選擇性的技術(shù)聯(lián)用。與高效液相色譜相比,毛細(xì)管電泳在分離效率、分析速度、消耗成本及樣品用量等方面更具有優(yōu)勢(shì)。在前期的研究工作中發(fā)現(xiàn),在堿性條件下Ag(Ⅲ)絡(luò)合物與Ni(Ⅳ)絡(luò)合物皆能與魯米諾反應(yīng)并產(chǎn)生穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號(hào)。結(jié)合具有高效分離特點(diǎn)的毛細(xì)管電泳技術(shù),分別建立了Ag(Ⅲ)絡(luò)合物-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系與Ni(Ⅳ)絡(luò)合物-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系聯(lián)用毛細(xì)管電泳技術(shù)對(duì)尿液中物質(zhì)的分離檢測(cè)。該方法操作簡(jiǎn)單,不需要復(fù)雜的樣品前處理步驟,所得結(jié)果準(zhǔn)確可靠。第一部分、Ag(Ⅲ)化學(xué)發(fā)光-毛細(xì)管電泳檢測(cè)葉酸目的:建立測(cè)定葉酸的毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光新方法。方法:在堿性條件下,Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系具有穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號(hào),葉酸能顯著抑制Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系的信號(hào)強(qiáng)度,且發(fā)光強(qiáng)度與樣品濃度在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。對(duì)實(shí)驗(yàn)的分離條件及發(fā)光條件進(jìn)行優(yōu)化,在優(yōu)化的條件下確定葉酸的線性范圍并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,而后對(duì)片劑及尿液中的葉酸進(jìn)行分離檢測(cè)。結(jié)果:在優(yōu)化的條件下測(cè)得葉酸的線性范圍為5~150 mg/L,線性回歸方程:△I=3.5051C+9.916,相關(guān)系數(shù)r=0.9953,最低檢出限為2.31mg/L。對(duì)80 mg/L的葉酸連續(xù)進(jìn)行11次平行測(cè)定,獲得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.83%。對(duì)片劑及尿液中的葉酸進(jìn)行分離檢測(cè),其加標(biāo)回收率分別在81.30%~114.13%和81.98%~105.74%之間。結(jié)論:毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光法用于測(cè)定片劑及尿液中的葉酸,方法簡(jiǎn)便快捷、準(zhǔn)確可靠。第二部分、Ni(Ⅳ)化學(xué)發(fā)光-毛細(xì)管電泳測(cè)定8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷、高香草酸和5-羥基吲哚乙酸目的:建立測(cè)定8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷、高香草酸和5-羥基吲哚乙酸的毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光新方法。方法:在堿性條件下,Ni(Ⅳ)絡(luò)合物-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系具有穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號(hào),8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷、高香草酸和5-羥基吲哚乙酸能顯著抑制Ni(Ⅳ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系的信號(hào)強(qiáng)度,且發(fā)光強(qiáng)度與樣品濃度在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。對(duì)實(shí)驗(yàn)的分離條件及發(fā)光條件進(jìn)行優(yōu)化,在優(yōu)化的條件下確定葉酸的線性范圍并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,而后對(duì)尿液中的8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷、高香草酸和5-羥基吲哚乙酸進(jìn)行分離檢測(cè)。結(jié)果:在優(yōu)化的條件下測(cè)得8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷的線性范圍為0.2~10mg/L,線性回歸方程△I=16.455C+14.413,相關(guān)系數(shù)r=0.9955,最低檢出限為0.02 mg/L。對(duì)4 mg/L的8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷連續(xù)進(jìn)行7次平行測(cè)定,獲得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%。對(duì)尿液中的8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷進(jìn)行分離檢測(cè),其加標(biāo)回收率在94.73%~105.22%之間。在優(yōu)化的條件下測(cè)得高香草酸的線性范圍為0.08~5 mg/L,線性回歸方程△I=29.77C+4.777,相關(guān)系數(shù)r=0.9998,最低檢出限為0.08 mg/L。對(duì)4 mg/L的高香草酸連續(xù)進(jìn)行7次平行測(cè)定,獲得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.7%。對(duì)尿液中的高香草酸進(jìn)行分離檢測(cè),其加標(biāo)回收率在86.96%~106.37%之間。在優(yōu)化的條件下測(cè)得5-羥基吲哚乙酸的線性范圍為0.1~5 mg/L,線性回歸方程△I=30.827C+7.0585,相關(guān)系數(shù)r=0.9978,最低檢出限為0.1mg/L。對(duì)4 mg/L的高香草酸連續(xù)進(jìn)行7次平行測(cè)定,獲得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.96%。對(duì)尿液中的高香草酸進(jìn)行分離檢測(cè),其加標(biāo)回收率在84.88%~103.81%之間。結(jié)論:毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光法用于測(cè)定尿液中的8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷、高香草酸及5-羥基吲哚乙酸,方法簡(jiǎn)便快捷,準(zhǔn)確可靠。
【關(guān)鍵詞】：毛細(xì)管電泳 化學(xué)發(fā)光 Ag(Ⅲ)絡(luò)合物 Ni(Ⅳ)絡(luò)合物 魯米諾
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R446.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫(xiě)11-12
• 第一部分 毛細(xì)管電泳-Ag(III)化學(xué)發(fā)光新體系測(cè)定片劑及尿液中的葉酸12-29
• 前言12-13
• 材料與方法13-15
• 結(jié)果15-18
• 附圖18-23
• 附表23-25
• 討論25-26
• 小結(jié)26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 第二部分 毛細(xì)管電泳-Ni(IV)化學(xué)發(fā)光新體系檢測(cè)尿液中 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷與神經(jīng)遞質(zhì)類(lèi)代謝產(chǎn)物29-46
• 前言29-31
• 材料與方法31-33
• 結(jié)果33-36
• 附圖36-41
• 附表41-42
• 討論42-43
• 小結(jié)43-44
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 結(jié)論46-47
• 綜述 毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用研究進(jìn)展47-61
• 參考文獻(xiàn)54-61
• 致謝61-62
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷62-63

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本文編號(hào)：1039286